| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-24页 |
| ·杆状病毒表达系统简介 | 第11-13页 |
| ·杆状病毒 | 第11页 |
| ·杆状病毒表达系统 | 第11-13页 |
| ·杆状病毒表达系统在研究中的应用 | 第13页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒简介 | 第13-17页 |
| ·病原学 | 第14-15页 |
| ·分子生物学 | 第15-17页 |
| ·高致病性猪繁殖与呼吸综合征 | 第17-22页 |
| ·流行情况 | 第17-18页 |
| ·临床症状及病理变化 | 第18页 |
| ·HP-PRRSV遗传变异分析 | 第18-19页 |
| ·诊断 | 第19-21页 |
| ·防制 | 第21-22页 |
| ·单克隆抗体的简介 | 第22-23页 |
| ·研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 材料和方法 | 第24-35页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·毒株、细胞 | 第24页 |
| ·载体、菌株、血清及实验动物 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-35页 |
| ·引物设计 | 第25页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第25页 |
| ·目的基因的扩增 | 第25-26页 |
| ·目的基因的克隆 | 第26-27页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第27页 |
| ·ORF3基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第27-28页 |
| ·包涵体的纯化、复性与Western blot鉴定 | 第28页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第28页 |
| ·重组杆粒的获得与鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组杆状病毒的获得与鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白的表达及免疫学鉴定 | 第30-31页 |
| ·小鼠免疫 | 第31页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第31-32页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第32-34页 |
| ·单克隆抗体的特性鉴定 | 第34-35页 |
| 3 结果 | 第35-45页 |
| ·基因的扩增与转移载体的构建 | 第35页 |
| ·重组质粒pMD18-ORF3的酶切鉴定 | 第35页 |
| ·原核表达载体的双酶切鉴定 | 第35页 |
| ·ORF3基因在大肠杆菌中表达、纯化及Western blot结果 | 第35-37页 |
| ·真核表达载体的构建结果 | 第37页 |
| ·重组杆粒的PCR鉴定 | 第37页 |
| ·重组杆状病毒PCR鉴定 | 第37-38页 |
| ·ORF3基因在昆虫细胞中的表达、纯化及Western blot鉴定 | 第38-40页 |
| ·重组杆状病毒IFA鉴定 | 第40页 |
| ·ELISA方法建立结果 | 第40页 |
| ·抗原最佳包被浓度与血清最佳稀释度的确定 | 第40页 |
| ·间接ELISA其他工作条件的摸索 | 第40页 |
| ·细胞融合与筛选结果 | 第40-42页 |
| ·动物免疫 | 第41页 |
| ·细胞的融合率 | 第41-42页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选结果 | 第42页 |
| ·单克隆抗体的特性鉴定结果 | 第42-45页 |
| ·上清及腹水效价测定 | 第42页 |
| ·单克隆抗体亚类的鉴定 | 第42-43页 |
| ·特异性鉴定 | 第43页 |
| ·单克隆抗体的Western blot鉴定 | 第43-44页 |
| ·间接免疫荧光 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| ·目的基因的选择 | 第45页 |
| ·免疫抗原和筛选抗原的选择 | 第45-46页 |
| ·小鼠的免疫 | 第46-47页 |
| ·细胞融合 | 第47页 |
| ·单抗特性的鉴定 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录 | 第56-59页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第59页 |
