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双马来酰亚胺标记质谱定量法及其在细胞凋亡酶-3活性检测中的应用

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 绪论第11-41页
    1.1 巯基翻译后修饰与质谱技术简介第11-17页
        1.1.1 巯基翻译后修饰的分类及其生物学意义第11-12页
        1.1.2 巯基亚硝基化修饰水平的检测方法第12-15页
        1.1.3 质谱技术简介第15-17页
    1.2 定量蛋白质组学及其应用第17-23页
        1.2.1 定量蛋白质组学基本概念与在生物领域中的应用第17-18页
        1.2.2 常用的质谱标记定量方法概述第18-21页
        1.2.3 非同位素标记内标定量法第21-23页
    1.3 细胞凋亡酶-3及其活性检测第23-27页
        1.3.1 细胞凋亡酶-3简介第23页
        1.3.2 细胞凋亡酶-3活性检测的生物学意义第23-24页
        1.3.3 常见的酶活性检测方法第24-27页
    1.4 质谱技术在酶活性检测中的应用第27-30页
        1.4.1 MALDI质谱在酶活性检测中的应用第27-29页
        1.4.2 其它质谱技术在酶活性检测中的应用第29-30页
    1.5 本研究课题的选题依据第30-31页
    参考文献第31-41页
第二章 基于双马来酰亚胺标记技术的半胱氨肽相对和绝对定量法第41-68页
    2.1 引言第41-44页
    2.2 实验部分第44-47页
        2.2.1 实验仪器与试剂第44-45页
            2.2.1.1 实验仪器第44页
            2.2.1.2 实验试剂第44-45页
        2.2.2 半胱氨肽的选择性标记第45-46页
        2.2.3 标记效率的测定第46页
        2.2.4 标记反应的动态范围第46页
        2.2.5 半胱氨肽相对和绝对定量第46页
        2.2.6 复杂背景下的定量稳定性装与蛋白样品的富集第46页
        2.2.7 含有半胱氨酸的蛋白质酶解组装与蛋白样品的富集第46-47页
        2.2.8 MALDI-TOF分析第47页
    2.3 实验结果与讨论第47-63页
        2.3.1 设计策略第47-48页
        2.3.2 半胱计策氨肽的特异性标记第48-50页
        2.3.3 标记反应条件优化第50-52页
        2.3.4 标记效率和灵敏度第52-53页
        2.3.5 比值测定的可重复性第53-55页
        2.3.6 半胱氨肽的绝对定量第55-56页
        2.3.7 半胱氨肽相对定量第56-59页
        2.3.8 含半胱氨酸蛋白的相对定量第59-63页
    2.4 小结第63页
    参考文献第63-68页
第三章 双马来酰亚胺标记定量法在细胞凋亡酶-3活性检测中的应用第68-93页
    3.1 引言第68-70页
    3.2 实验部分第70-74页
        3.2.1 实验仪器及试剂第70-72页
            3.2.1.1 实验仪器第70-71页
            3.2.1.2 实验试剂第71-72页
        3.2.2 多肽酶活性质谱探针的制备第72页
        3.2.3 多肽探针的酶切反应及酶特异性检测第72-73页
        3.2.4 体外酶活性检测与抑制剂筛选第73页
        3.2.5 细胞裂解液中的酶活性检测第73-74页
    3.3 实验结果讨论第74-88页
        3.3.1 多肽酶活性质谱探针的制备第74-75页
        3.3.2 双马来酰亚胺标记定量法在Caspase-3酶活性检测中的应用第75-79页
        3.3.3 体外酶活性检测与抑制剂筛选第79-86页
        3.3.4 细胞裂解液中的酶活性检测第86-88页
    3.4 小结第88页
    参考文献第88-93页
第四章 结论与展望第93-95页
    4.1 结论第93-94页
    4.2 展望第94-95页
硕士期间发表的论文和专利第95-96页
致谢第96-98页

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