中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-41页 |
1.1 巯基翻译后修饰与质谱技术简介 | 第11-17页 |
1.1.1 巯基翻译后修饰的分类及其生物学意义 | 第11-12页 |
1.1.2 巯基亚硝基化修饰水平的检测方法 | 第12-15页 |
1.1.3 质谱技术简介 | 第15-17页 |
1.2 定量蛋白质组学及其应用 | 第17-23页 |
1.2.1 定量蛋白质组学基本概念与在生物领域中的应用 | 第17-18页 |
1.2.2 常用的质谱标记定量方法概述 | 第18-21页 |
1.2.3 非同位素标记内标定量法 | 第21-23页 |
1.3 细胞凋亡酶-3及其活性检测 | 第23-27页 |
1.3.1 细胞凋亡酶-3简介 | 第23页 |
1.3.2 细胞凋亡酶-3活性检测的生物学意义 | 第23-24页 |
1.3.3 常见的酶活性检测方法 | 第24-27页 |
1.4 质谱技术在酶活性检测中的应用 | 第27-30页 |
1.4.1 MALDI质谱在酶活性检测中的应用 | 第27-29页 |
1.4.2 其它质谱技术在酶活性检测中的应用 | 第29-30页 |
1.5 本研究课题的选题依据 | 第30-31页 |
参考文献 | 第31-41页 |
第二章 基于双马来酰亚胺标记技术的半胱氨肽相对和绝对定量法 | 第41-68页 |
2.1 引言 | 第41-44页 |
2.2 实验部分 | 第44-47页 |
2.2.1 实验仪器与试剂 | 第44-45页 |
2.2.1.1 实验仪器 | 第44页 |
2.2.1.2 实验试剂 | 第44-45页 |
2.2.2 半胱氨肽的选择性标记 | 第45-46页 |
2.2.3 标记效率的测定 | 第46页 |
2.2.4 标记反应的动态范围 | 第46页 |
2.2.5 半胱氨肽相对和绝对定量 | 第46页 |
2.2.6 复杂背景下的定量稳定性装与蛋白样品的富集 | 第46页 |
2.2.7 含有半胱氨酸的蛋白质酶解组装与蛋白样品的富集 | 第46-47页 |
2.2.8 MALDI-TOF分析 | 第47页 |
2.3 实验结果与讨论 | 第47-63页 |
2.3.1 设计策略 | 第47-48页 |
2.3.2 半胱计策氨肽的特异性标记 | 第48-50页 |
2.3.3 标记反应条件优化 | 第50-52页 |
2.3.4 标记效率和灵敏度 | 第52-53页 |
2.3.5 比值测定的可重复性 | 第53-55页 |
2.3.6 半胱氨肽的绝对定量 | 第55-56页 |
2.3.7 半胱氨肽相对定量 | 第56-59页 |
2.3.8 含半胱氨酸蛋白的相对定量 | 第59-63页 |
2.4 小结 | 第63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
第三章 双马来酰亚胺标记定量法在细胞凋亡酶-3活性检测中的应用 | 第68-93页 |
3.1 引言 | 第68-70页 |
3.2 实验部分 | 第70-74页 |
3.2.1 实验仪器及试剂 | 第70-72页 |
3.2.1.1 实验仪器 | 第70-71页 |
3.2.1.2 实验试剂 | 第71-72页 |
3.2.2 多肽酶活性质谱探针的制备 | 第72页 |
3.2.3 多肽探针的酶切反应及酶特异性检测 | 第72-73页 |
3.2.4 体外酶活性检测与抑制剂筛选 | 第73页 |
3.2.5 细胞裂解液中的酶活性检测 | 第73-74页 |
3.3 实验结果讨论 | 第74-88页 |
3.3.1 多肽酶活性质谱探针的制备 | 第74-75页 |
3.3.2 双马来酰亚胺标记定量法在Caspase-3酶活性检测中的应用 | 第75-79页 |
3.3.3 体外酶活性检测与抑制剂筛选 | 第79-86页 |
3.3.4 细胞裂解液中的酶活性检测 | 第86-88页 |
3.4 小结 | 第88页 |
参考文献 | 第88-93页 |
第四章 结论与展望 | 第93-95页 |
4.1 结论 | 第93-94页 |
4.2 展望 | 第94-95页 |
硕士期间发表的论文和专利 | 第95-96页 |
致谢 | 第96-98页 |