| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语及符号 | 第12-13页 |
| 绪论 | 第13-14页 |
| 第一篇 文献综述 | 第14-36页 |
| 第一章 猪肺炎支原体研究进展 | 第14-28页 |
| 1.猪肺炎支原体概述 | 第14页 |
| 2.猪肺炎支原体致病机理 | 第14-15页 |
| 3.猪肺炎支原体检测 | 第15-18页 |
| 3.1 病原分离鉴定 | 第15页 |
| 3.2 免疫血清学方法 | 第15-16页 |
| 3.3 分子生物学诊断方法 | 第16-18页 |
| 4.猪肺炎支原体疫苗研究进展 | 第18-19页 |
| 4.1 灭活疫苗 | 第18-19页 |
| 4.2 弱毒疫苗 | 第19页 |
| 5.ELISA方法在灭活疫苗抗原检测中的应用 | 第19-22页 |
| 参考文献 | 第22-28页 |
| 第二章 猪鼻支原体研究进展 | 第28-36页 |
| 1.形态特征 | 第28页 |
| 2.培养特征 | 第28页 |
| 3.猪鼻支原体的致病机制 | 第28-29页 |
| 4.猪鼻支原体的病原检测技术 | 第29-32页 |
| 4.1 病原的分离与鉴定 | 第29-30页 |
| 4.2 双抗体夹心ELISA方法 | 第30页 |
| 4.3 间接免疫荧光试验 | 第30页 |
| 4.4 胶体金免疫层析检测 | 第30页 |
| 4.5 PCR方法 | 第30-32页 |
| 参考文献 | 第32-36页 |
| 第二篇 实验部分 | 第36-80页 |
| 第一章 猪肺炎支原体抗原定量ELISA检测方法的建立及用于培养物检测的研究 | 第36-54页 |
| 1.试验材料与方法 | 第37-40页 |
| 1.1 菌种和抗体 | 第37页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第37页 |
| 1.3 猪肺炎支原体菌液的培养 | 第37-38页 |
| 1.4 检测猪肺炎支原体抗原的夹心ELISA方法的初步建立 | 第38页 |
| 1.5 ELISA最佳反应条件的确定 | 第38-39页 |
| 1.6 ELISA方法的特异性 | 第39页 |
| 1.7 ELISA方法的敏感性 | 第39页 |
| 1.8 方法的重复性 | 第39页 |
| 1.9 ELISA方法的初步应用 | 第39-40页 |
| 1.10 对猪肺炎支原体培养物的检测 | 第40页 |
| 2.结果 | 第40-47页 |
| 2.1 最佳配对抗体的选择 | 第40-41页 |
| 2.2 ELISA最佳反应条件的确定 | 第41-43页 |
| 2.3 双抗体夹心ELISA检测方法操作程序的确定 | 第43页 |
| 2.4 夹心ELISA方法的特异性 | 第43页 |
| 2.5 夹心ELISA方法的敏感性 | 第43-44页 |
| 2.6 夹心ELISA方法的重复性 | 第44-45页 |
| 2.7 夹心ELISA方法检测不同浓度的猪肺炎支原体培养物 | 第45-46页 |
| 2.8 对不同批次猪肺炎支原体培养物的检测及其与CCU检测的对比 | 第46-47页 |
| 3.讨论 | 第47-52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 第二章 猪肺炎支原体抗原定量ELISA检测方法用于成品灭活疫苗的检测研究 | 第54-68页 |
| 1.试验材料与方法 | 第55-58页 |
| 1.1 菌种及实验动物 | 第55页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第55页 |
| 1.3 猪肺炎支原体疫苗的准备 | 第55-56页 |
| 1.4 油包水型疫苗破乳方法的确定 | 第56页 |
| 1.5 夹心ELISA检测破乳的油包水型疫苗抗原含量确定破乳方法 | 第56-57页 |
| 1.6 ELISA测定抗原含量方法与疫苗免疫检测血清抗体方法的比较 | 第57-58页 |
| 2.结果 | 第58-61页 |
| 2.1 灭活疫苗的制备 | 第58页 |
| 2.2 油包水型灭活疫苗的破乳方法初步筛选 | 第58-59页 |
| 2.3 夹心ELISA检测破乳的油包水型疫苗抗原含量 | 第59-60页 |
| 2.4 ELISA测定抗原含量方法与疫苗免疫检测血清抗体方法的比较 | 第60-61页 |
| 3.讨论 | 第61-66页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 第三章 一株猪鼻支原体特异性单克隆抗体的制备及鉴定 | 第68-80页 |
| 1.材料与方法 | 第68-71页 |
| 1.1 主要材料和试剂 | 第68-69页 |
| 1.2 支原体全菌抗原的制备 | 第69页 |
| 1.3 猪鼻支原体单克隆抗体的制备及纯化 | 第69-70页 |
| 1.4 单抗类型及亚型鉴定 | 第70页 |
| 1.5 纯化抗体效价测定 | 第70页 |
| 1.6 单抗特异性鉴定 | 第70页 |
| 1.7 单抗与膜蛋白的反应性鉴定 | 第70-71页 |
| 1.8 菌落免疫杂交试验 | 第71页 |
| 1.9 单抗用于间接免疫荧光鉴试验 | 第71页 |
| 2.结果 | 第71-74页 |
| 2.1 单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 | 第71页 |
| 2.2 亚型鉴定 | 第71页 |
| 2.3 纯化抗体效价测定 | 第71-72页 |
| 2.4 单抗特异性鉴定 | 第72-73页 |
| 2.5 单抗与猪鼻支原体膜蛋白反应 | 第73页 |
| 2.6 菌落免疫杂交 | 第73-74页 |
| 2.7 间接免疫荧光鉴定 | 第74页 |
| 3.讨论 | 第74-78页 |
| 参考文献 | 第78-80页 |
| 结论与展望 | 第80-82页 |
| 附录 | 第82-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 个人简历与攻读学位期间发表的学术论文 | 第88页 |
