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氨基酸转运蛋白对谷氨酸棒杆菌发酵产L-赖氨酸的影响研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
第1章 绪论第11-19页
    1.1 L-赖氨酸的概述第11-12页
        1.1.1 L-赖氨酸的特性第11页
        1.1.2 L-赖氨酸的应用第11-12页
    1.2 L-赖氨酸合成的研究现状第12-15页
        1.2.1 L-赖氨酸的生产方法第12-13页
        1.2.2 L-赖氨酸的生产菌株第13页
        1.2.3 L-赖氨酸菌株选育情况第13-15页
    1.3 氨基酸转运蛋白的研究现状第15-17页
        1.3.1 谷氨酸胞外转运蛋白的GluE的研究现状第16页
        1.3.2 分支氨基酸和甲硫氨酸胞外转运蛋白BrnFE的研究现状第16-17页
        1.3.3 赖氨酸胞内转运蛋白LysP的研究现状第17页
    1.4 研究的背景和研究内容第17-19页
        1.4.1 研究背景第17-18页
        1.4.2 研究内容第18-19页
第2章 失活gluE、brnFE基因对谷氨酸棒杆菌产L-赖氨酸的影响第19-41页
    2.1 引言第19页
    2.2 实验材料第19-21页
        2.2.1 菌种与质粒第19-20页
        2.2.2 主要试剂第20页
        2.2.3 主要培养基第20-21页
        2.2.4 仪器与设备第21页
    2.3 实验方法第21-28页
        2.3.1 C.glutamicum 23604卡那霉素抗性实验第21页
        2.3.2 质粒pK19mobsacB-gluE、pK19mobsacB-brnFE的构建第21-26页
        2.3.3 重组质粒的转化与鉴定第26页
        2.3.4 重组质粒的提取与浓缩第26页
        2.3.5 重组菌C.glutamicum WL1701、C.glutamicum WL1702的构建第26-27页
        2.3.6 阳性克隆子的筛选与鉴定第27页
        2.3.7 两种重组菌的稳定性验证第27页
        2.3.8 两种重组菌的发酵第27-28页
    2.4 实验结果与讨论第28-38页
        2.4.1 C.glutamicum23604卡那霉素抗性实验第28页
        2.4.2 C.glutamicum23604基因组的提取第28-29页
        2.4.3 目的基因片段的扩增第29页
        2.4.4 提取pK19mobsacB质粒及其线性化第29-31页
        2.4.5 重组质粒的转化与鉴定第31-32页
        2.4.6 两种重组菌的构建与鉴定及稳定性分析第32-35页
        2.4.7 重组菌C.glutamicum WL1701的发酵结果分析第35-36页
        2.4.8 重组菌C.glutamicum WL1702的发酵结果分析第36-38页
    2.5 本章小结第38-41页
第3章 失活lysP对谷氨酸棒杆菌产L-赖氨酸的影响第41-49页
    3.1 引言第41页
    3.2 实验材料第41-42页
        3.2.1 菌种与质粒第41页
        3.2.2 主要试剂第41页
        3.2.3 主要培养基第41页
        3.2.4 仪器与设备第41-42页
    3.3 实验方法第42-44页
        3.3.1 基因敲除载体pK19mobsacB-lysP的构建第42-43页
        3.3.2 基因敲除载体的转化与鉴定第43页
        3.3.3 重组菌C.glutamicum WL1703的构建第43页
        3.3.4 阳性重组菌的筛选与鉴定第43-44页
        3.3.5 重组菌C.glutamicum WL1703稳定性的验证第44页
        3.3.6 重组菌C.glutamicum WL1703的发酵结果与分析第44页
    3.4 实验结果与讨论第44-48页
        3.4.1 重组同源性片段的扩增第44-45页
        3.4.2 基因敲除载体的转化与鉴定第45页
        3.4.3 阳性重组菌C.glutamicum WL1703的筛选与鉴定及稳定性分析第45-46页
        3.4.4 重组菌C.glutamicum WL1703的发酵结果与分析第46-48页
    3.5 本章小结第48-49页
第4章 重组菌C.glutamicum WL1705的构建及发酵验证第49-57页
    4.1 引言第49页
    4.2 实验材料第49页
        4.2.1 菌种与质粒第49页
        4.2.2 主要培养基第49页
        4.2.3 仪器与设备第49页
    4.3 实验方法第49-50页
        4.3.1 重组菌C.glutamicum WL1704、C.glutamicum WL1706的构建第49-50页
        4.3.2 重组菌C.glutamicum WL1705的构建第50页
    4.4 重组菌C.glutamicum WL1705的发酵结果分析第50页
    4.5 实验结果第50-54页
        4.5.1 两种双缺失菌的筛选与鉴定第50-51页
        4.5.2 C.glutamicum WL1705阳性重组菌的筛选与鉴定第51-52页
        4.5.3 重组菌C.glutamicum WL1705的发酵结果分析第52-54页
    4.6 本章小结第54-57页
第5章 结论与展望第57-59页
参考文献第59-69页
致谢第69-71页
在学期间主要科研成果第71页

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