| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第1章 绪论 | 第11-19页 |
| 1.1 L-赖氨酸的概述 | 第11-12页 |
| 1.1.1 L-赖氨酸的特性 | 第11页 |
| 1.1.2 L-赖氨酸的应用 | 第11-12页 |
| 1.2 L-赖氨酸合成的研究现状 | 第12-15页 |
| 1.2.1 L-赖氨酸的生产方法 | 第12-13页 |
| 1.2.2 L-赖氨酸的生产菌株 | 第13页 |
| 1.2.3 L-赖氨酸菌株选育情况 | 第13-15页 |
| 1.3 氨基酸转运蛋白的研究现状 | 第15-17页 |
| 1.3.1 谷氨酸胞外转运蛋白的GluE的研究现状 | 第16页 |
| 1.3.2 分支氨基酸和甲硫氨酸胞外转运蛋白BrnFE的研究现状 | 第16-17页 |
| 1.3.3 赖氨酸胞内转运蛋白LysP的研究现状 | 第17页 |
| 1.4 研究的背景和研究内容 | 第17-19页 |
| 1.4.1 研究背景 | 第17-18页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第18-19页 |
| 第2章 失活gluE、brnFE基因对谷氨酸棒杆菌产L-赖氨酸的影响 | 第19-41页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.2.1 菌种与质粒 | 第19-20页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第20页 |
| 2.2.3 主要培养基 | 第20-21页 |
| 2.2.4 仪器与设备 | 第21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-28页 |
| 2.3.1 C.glutamicum 23604卡那霉素抗性实验 | 第21页 |
| 2.3.2 质粒pK19mobsacB-gluE、pK19mobsacB-brnFE的构建 | 第21-26页 |
| 2.3.3 重组质粒的转化与鉴定 | 第26页 |
| 2.3.4 重组质粒的提取与浓缩 | 第26页 |
| 2.3.5 重组菌C.glutamicum WL1701、C.glutamicum WL1702的构建 | 第26-27页 |
| 2.3.6 阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第27页 |
| 2.3.7 两种重组菌的稳定性验证 | 第27页 |
| 2.3.8 两种重组菌的发酵 | 第27-28页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第28-38页 |
| 2.4.1 C.glutamicum23604卡那霉素抗性实验 | 第28页 |
| 2.4.2 C.glutamicum23604基因组的提取 | 第28-29页 |
| 2.4.3 目的基因片段的扩增 | 第29页 |
| 2.4.4 提取pK19mobsacB质粒及其线性化 | 第29-31页 |
| 2.4.5 重组质粒的转化与鉴定 | 第31-32页 |
| 2.4.6 两种重组菌的构建与鉴定及稳定性分析 | 第32-35页 |
| 2.4.7 重组菌C.glutamicum WL1701的发酵结果分析 | 第35-36页 |
| 2.4.8 重组菌C.glutamicum WL1702的发酵结果分析 | 第36-38页 |
| 2.5 本章小结 | 第38-41页 |
| 第3章 失活lysP对谷氨酸棒杆菌产L-赖氨酸的影响 | 第41-49页 |
| 3.1 引言 | 第41页 |
| 3.2 实验材料 | 第41-42页 |
| 3.2.1 菌种与质粒 | 第41页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第41页 |
| 3.2.3 主要培养基 | 第41页 |
| 3.2.4 仪器与设备 | 第41-42页 |
| 3.3 实验方法 | 第42-44页 |
| 3.3.1 基因敲除载体pK19mobsacB-lysP的构建 | 第42-43页 |
| 3.3.2 基因敲除载体的转化与鉴定 | 第43页 |
| 3.3.3 重组菌C.glutamicum WL1703的构建 | 第43页 |
| 3.3.4 阳性重组菌的筛选与鉴定 | 第43-44页 |
| 3.3.5 重组菌C.glutamicum WL1703稳定性的验证 | 第44页 |
| 3.3.6 重组菌C.glutamicum WL1703的发酵结果与分析 | 第44页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第44-48页 |
| 3.4.1 重组同源性片段的扩增 | 第44-45页 |
| 3.4.2 基因敲除载体的转化与鉴定 | 第45页 |
| 3.4.3 阳性重组菌C.glutamicum WL1703的筛选与鉴定及稳定性分析 | 第45-46页 |
| 3.4.4 重组菌C.glutamicum WL1703的发酵结果与分析 | 第46-48页 |
| 3.5 本章小结 | 第48-49页 |
| 第4章 重组菌C.glutamicum WL1705的构建及发酵验证 | 第49-57页 |
| 4.1 引言 | 第49页 |
| 4.2 实验材料 | 第49页 |
| 4.2.1 菌种与质粒 | 第49页 |
| 4.2.2 主要培养基 | 第49页 |
| 4.2.3 仪器与设备 | 第49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49-50页 |
| 4.3.1 重组菌C.glutamicum WL1704、C.glutamicum WL1706的构建 | 第49-50页 |
| 4.3.2 重组菌C.glutamicum WL1705的构建 | 第50页 |
| 4.4 重组菌C.glutamicum WL1705的发酵结果分析 | 第50页 |
| 4.5 实验结果 | 第50-54页 |
| 4.5.1 两种双缺失菌的筛选与鉴定 | 第50-51页 |
| 4.5.2 C.glutamicum WL1705阳性重组菌的筛选与鉴定 | 第51-52页 |
| 4.5.3 重组菌C.glutamicum WL1705的发酵结果分析 | 第52-54页 |
| 4.6 本章小结 | 第54-57页 |
| 第5章 结论与展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 在学期间主要科研成果 | 第71页 |
