| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 英文缩略词表 | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 大熊猫及其消化道结构研究进展 | 第13-14页 |
| 2 大熊猫肠道菌群研究进展 | 第14-15页 |
| 3 枯草芽孢杆菌研究进展 | 第15-17页 |
| 4 sRNA研究进展 | 第17-20页 |
| 5 C12P研究背景 | 第20-21页 |
| 6 基因打靶技术的研究进展 | 第21-23页 |
| 7 研究目的与意义 | 第23-25页 |
| 第二章 HH2菌株纤维素分解能力研究及SRNA-C12P表达验证 | 第25-44页 |
| 1 试验材料 | 第25-28页 |
| 1.1 主要实验仪器 | 第25-26页 |
| 1.2 生化试剂和酶 | 第26-27页 |
| 1.3 菌株 | 第27页 |
| 1.4 培养基配制 | 第27-28页 |
| 1.5 引物 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-32页 |
| 2.1 HH2分离株纤维素分解能力研究 | 第29页 |
| 2.2 sRNA-C12P验证 | 第29-30页 |
| 2.3 qPCR试验检测sRNA-C12P表达差异 | 第30-32页 |
| 3 结果 | 第32-39页 |
| 3.1 HH2分离株纤维素分解能力研究 | 第32-34页 |
| 3.2 sRNA-C12P验证 | 第34-35页 |
| 3.3 qPCR检测sRNA-C12P表达量 | 第35-38页 |
| 3.4 纤维素分解试验 | 第38-39页 |
| 4 分析与讨论 | 第39-44页 |
| 4.1 葡萄糖是HH2菌株最适宜的碳源,在纤维素培养基中,菌株生长缓慢 | 第39-41页 |
| 4.2 HH2菌株具有很强的纤维素分解能力 | 第41页 |
| 4.3 HH2菌株存在sRNA-C12P,在纤维素培养基中表达量最高 | 第41-44页 |
| 第三章 HH2ΔC12P构建及其纤维素分解能力研究 | 第44-77页 |
| 1 试验材料 | 第44-47页 |
| 1.1 主要实验仪器 | 第44页 |
| 1.2 生化试剂和酶 | 第44-46页 |
| 1.3 菌株 | 第46页 |
| 1.4 质粒 | 第46页 |
| 1.5 培养基及试剂配制 | 第46-47页 |
| 2 方法 | 第47-56页 |
| 2.1 序列分析 | 第47页 |
| 2.2 引物设计 | 第47-49页 |
| 2.3 骨架质粒pMD19-T-KanR构建 | 第49-51页 |
| 2.4 HH2分离株DNA提取 | 第51页 |
| 2.5 C12P下游同源臂C12P-D的克隆 | 第51-53页 |
| 2.6 C12P上游同源臂(C12P-U)的扩增 | 第53-55页 |
| 2.7 枯草芽孢杆菌HH2分离株感受态细胞制备 | 第55页 |
| 2.8 HH2ΔC12P构建 | 第55-56页 |
| 2.9 HH2ΔC12P纤维素分解能力研究 | 第56页 |
| 3 结果 | 第56-74页 |
| 3.1 序列分析结果 | 第56页 |
| 3.2 骨架质粒构建 | 第56-60页 |
| 3.3 HH2 DNA提取 | 第60-61页 |
| 3.4 C12P下游同源臂C12P-D的克隆 | 第61-66页 |
| 3.5 C12P上游同源臂片段C12P-U扩增 | 第66-70页 |
| 3.6 pMD19-T-KanR-D-U质粒提取 | 第70页 |
| 3.7 枯草芽孢杆菌HH2分离株感受态细胞制备 | 第70页 |
| 3.8 HH2ΔC12P构建 | 第70-71页 |
| 3.9 B.subtilis HH2ΔC12P纤维素分解能力研究 | 第71-74页 |
| 4 讨论 | 第74-77页 |
| 4.1 HH2ΔC12P对高纤维素环境胁迫的适应能力下降 | 第74-76页 |
| 4.2 HH2ΔC12P对纤维素分解能力降低 | 第76-77页 |
| 结论 | 第77-78页 |
| 附录 | 第78-81页 |
| 参考文献 | 第81-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 攻读学位期间发表的论文目录 | 第92页 |
