| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 绪论 | 第8-18页 |
| 1.1 膜泡运输过程 | 第8页 |
| 1.2 拴留因子 | 第8-9页 |
| 1.2.1 拴留因子的分类及分布 | 第8-9页 |
| 1.3 DSL1复合体 | 第9-12页 |
| 1.3.1 DSL1复合体成员的结构 | 第9-12页 |
| 1.4 Dsl1复合体及拟南芥MAG2同源复合体各亚基的功能 | 第12-15页 |
| 1.4.1 Dsl1复合体的功能 | 第12-14页 |
| 1.4.2 MAG2复合体的功能 | 第14页 |
| 1.4.3 Dsl1及同源复合体在分裂期的功能 | 第14-15页 |
| 1.5 与Dsl1复合体及其功能相关的因子 | 第15-16页 |
| 1.5.1 SNARE因子 | 第15-16页 |
| 1.5.2 衣被复合体 | 第16页 |
| 1.5.3 Rab蛋白 | 第16页 |
| 1.5.4 SM蛋白 | 第16页 |
| 1.6 拟南芥MAG2及其同源复合体的研究意义及问题展望 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法1 | 第18-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.2 Gateway系统构建质粒 | 第18-22页 |
| 2.2.1 模板制备 | 第18-19页 |
| 2.2.2 PCR扩增及胶回收 | 第19-20页 |
| 2.2.3 Topo反应连接 | 第20页 |
| 2.2.4 大肠杆菌转化、阳性克隆鉴定及质粒提取 | 第20-22页 |
| 2.2.5 LR反应 | 第22页 |
| 2.3 转基因植株的制作 | 第22-23页 |
| 2.3.1 农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| 2.3.2 农杆菌转化及阳性克隆鉴定 | 第23页 |
| 2.3.3 农杆菌侵染 | 第23页 |
| 2.4 突变体的筛选 | 第23-24页 |
| 2.5 拟南芥植株杂交 | 第24页 |
| 2.6 Western检测 | 第24-28页 |
| 2.6.1 样品的制备 | 第25页 |
| 2.6.2 SDS-PAGE电泳 | 第25-28页 |
| 2.6.2.1 试剂配制 | 第25-26页 |
| 2.6.2.2 电泳 | 第26页 |
| 2.6.2.3 转膜 | 第26-27页 |
| 2.6.2.4 封闭 | 第27页 |
| 2.6.2.5 一抗、二抗的孵育及洗涤 | 第27页 |
| 2.6.2.6 1AS4000成像 | 第27-28页 |
| 2.7 瞬时表达 | 第28-30页 |
| 2.7.1 高浓度质粒的提取 | 第28页 |
| 2.7.2 试剂的配制 | 第28-30页 |
| 2.7.3 瞬时表达操作 | 第30页 |
| 2.8 酵母双杂交 | 第30-33页 |
| 2.8.1 试剂的配制 | 第30-31页 |
| 2.8.2 酵母双杂交步骤 | 第31-32页 |
| 2.8.3 相互作用结果的分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-41页 |
| 3.1 MIP基因在膜泡运输过程中的功能 | 第33-37页 |
| 3.1.1 MIP蛋白的一级结构分析 | 第33页 |
| 3.1.2 瞬时表达检测亚细胞定位 | 第33-34页 |
| 3.1.3 植物的制作与筛选 | 第34-35页 |
| 3.1.4 储藏蛋白质前体蓄积情况 | 第35-36页 |
| 3.1.5 种子细胞形态观察 | 第36-37页 |
| 3.1.6 酵母双杂交检测MAG2复合体成员的相互作用关系 | 第37页 |
| 3.2 MIP基因对植物生长发育的影响 | 第37-39页 |
| 3.2.1 MIP2沉默植株的表型观察 | 第37-38页 |
| 3.2.2 生长发育表型观察 | 第38-39页 |
| 3.3 MIP基因对环境的应答 | 第39-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
