中文摘要 | 第4-5页 |
英文摘要 | 第5页 |
第一部分 引言 | 第8-14页 |
一 酵母双杂交系统(Yeast Two-Hybrid System) | 第8-11页 |
(一) 酵母双杂交系统概述 | 第8-9页 |
(二) 酵母双杂交系统的形式 | 第9-10页 |
(三) 酵母双杂交系统的特点 | 第10页 |
(四) 酵母双杂交系统的应用及发展 | 第10-11页 |
二 激活素受体相互作用蛋白(Activin Receptor Interacting Proteins,ARIPs) | 第11-14页 |
第二部分 实验材料与方法 | 第14-21页 |
一 实验材料 | 第14-16页 |
(一) 质粒及菌种 | 第14页 |
(二) 试剂及试剂盒 | 第14页 |
(三) 主要试剂和缓冲液 | 第14-15页 |
(四) 主要仪器与设备 | 第15页 |
(五) 聚合酶链式反应(PCR)引物 | 第15-16页 |
二 实验方法 | 第16-21页 |
(一) pGBK-ARIP5重组子的鉴定 | 第16页 |
(二) pGBK-ARIP5重组子的蛋白表达及鉴定 | 第16页 |
(三) 酵母双杂交筛选与pGBK-ARIP5相互作用的蛋白 | 第16-21页 |
第三部分 实验结果与分析 | 第21-27页 |
一 pGBK-ARIP5重组子的鉴定 | 第21-22页 |
(一) PCR法验证pGBK-ARIP5重组子 | 第21页 |
(二) 测序验证pGBK-ARIP5重组子 | 第21-22页 |
二 pGBK-ARIP5重组子的蛋白表达及鉴定 | 第22页 |
三 酵母双杂交系统筛选与pGBK-ARIP5相互作用的蛋白 | 第22-27页 |
(一) pGBK-ARIP5重组子的毒性及自激活作用验证 | 第23-24页 |
(二) 人cDNA文库的滴度测定、扩增及纯化 | 第24页 |
(三) 酵母双杂交筛选人cDNA表达文库 | 第24-25页 |
(四) 质粒PCR验证阳性克隆的插入片段 | 第25页 |
(五) 阳性克隆插入片段的序列分析 | 第25-27页 |
第四部分 讨论 | 第27-29页 |
第五部分 结论 | 第29-30页 |
参考文献 | 第30-32页 |
致谢 | 第32页 |