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利用酵母双杂交系统筛选与ARIP5相互作用的蛋白质

中文摘要第4-5页
英文摘要第5页
第一部分 引言第8-14页
    一 酵母双杂交系统(Yeast Two-Hybrid System)第8-11页
        (一) 酵母双杂交系统概述第8-9页
        (二) 酵母双杂交系统的形式第9-10页
        (三) 酵母双杂交系统的特点第10页
        (四) 酵母双杂交系统的应用及发展第10-11页
    二 激活素受体相互作用蛋白(Activin Receptor Interacting Proteins,ARIPs)第11-14页
第二部分 实验材料与方法第14-21页
    一 实验材料第14-16页
        (一) 质粒及菌种第14页
        (二) 试剂及试剂盒第14页
        (三) 主要试剂和缓冲液第14-15页
        (四) 主要仪器与设备第15页
        (五) 聚合酶链式反应(PCR)引物第15-16页
    二 实验方法第16-21页
        (一) pGBK-ARIP5重组子的鉴定第16页
        (二) pGBK-ARIP5重组子的蛋白表达及鉴定第16页
        (三) 酵母双杂交筛选与pGBK-ARIP5相互作用的蛋白第16-21页
第三部分 实验结果与分析第21-27页
    一 pGBK-ARIP5重组子的鉴定第21-22页
        (一) PCR法验证pGBK-ARIP5重组子第21页
        (二) 测序验证pGBK-ARIP5重组子第21-22页
    二 pGBK-ARIP5重组子的蛋白表达及鉴定第22页
    三 酵母双杂交系统筛选与pGBK-ARIP5相互作用的蛋白第22-27页
        (一) pGBK-ARIP5重组子的毒性及自激活作用验证第23-24页
        (二) 人cDNA文库的滴度测定、扩增及纯化第24页
        (三) 酵母双杂交筛选人cDNA表达文库第24-25页
        (四) 质粒PCR验证阳性克隆的插入片段第25页
        (五) 阳性克隆插入片段的序列分析第25-27页
第四部分 讨论第27-29页
第五部分 结论第29-30页
参考文献第30-32页
致谢第32页

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