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三种水稻花青素合成调控转录因子的功能研究

摘要第7-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第12-13页
1 文献综述第13-25页
    1.1 研究概述第13页
    1.2 花青素研究进展第13-23页
        1.2.1 花青素的生理作用第13-14页
        1.2.2 花青素的结构及分类第14-16页
        1.2.3 花青素的生物合成第16-17页
        1.2.4 花青素生物合成途径的调控第17-21页
            1.2.4.1 花青素生物合成途径的结构基因第18页
            1.2.4.2 参与花青素代谢途径的转录因子第18-20页
            1.2.4.3 花青素代谢途径的调控第20-21页
        1.2.5 水稻中花青素代谢的研究第21-22页
        1.2.6 水稻花青素代谢途径的遗传改良第22-23页
    1.3 β-胡萝卜素研究进展第23-24页
    1.4 本研究的目的及意义第24-25页
2 实验材料第25-26页
3 实验方法第26-45页
    3.1 基本分子生物学实验第26-29页
        3.1.1 电转化感受态的制备第26页
        3.1.2 质粒抽提(碱裂解法)第26-27页
        3.1.3 水稻叶片DNA小量抽提第27页
        3.1.4 水稻叶片高质量DNA大量抽提第27-28页
        3.1.5 RNA抽提及反转录第28-29页
            3.1.5.1 RNA抽提第28-29页
            3.1.5.2 反转录第29页
    3.2 单基因超表达载体构建第29-34页
        3.2.1 PCR获得目的基因第29-30页
        3.2.2 目的基因亚克隆至pEASY-Blunt Zero载体第30-31页
        3.2.3 超表达载体构建第31-34页
    3.3 聚合载体构建第34-36页
        3.3.1 供体载体构建第34页
        3.3.2 聚合载体的构建第34-36页
    3.4 农杆菌介导的水稻遗传转化第36-37页
    3.5 PCR阳性检测第37页
    3.6 Southern blotting检测第37-40页
    3.7 基因表达量检测第40-41页
    3.8 花青素测量第41-43页
    3.9 β-胡萝卜素测量第43-44页
    3.10 水稻杂交第44-45页
4 结果与分析第45-59页
    4.1 OsC1、OsB2、OsPAC1单基因超表达分析第45-55页
        4.1.1 单基因超表达载体的获得第45页
        4.1.2 OsC1超表达分析第45-49页
            4.1.2.1 T_0代转化植株PCR阳性检测及拷贝数检测第45-46页
            4.1.2.2 OsC1基因表达量检测第46-47页
            4.1.2.3 表型鉴定第47-48页
            4.1.2.4 花青素生物合成途径结构基因表达量检测第48-49页
        4.1.3 OsPAC1超表达分析第49-52页
            4.1.3.1 T_0代转化植株PCR阳性检测及拷贝数检测第49-50页
            4.1.3.2 OsPAC1基因表达量检测第50-51页
            4.1.3.3 花青素生物合成途径结构基因表达量检测第51-52页
        4.1.4 OsB2超表达分析第52-55页
            4.1.4.1 T_0代转化植株PCR阳性检测和OsB2表达量检测第52-53页
            4.1.4.2 花青素生物合成途径结构基因表达量检测第53-55页
    4.2 双基因聚合转化分析第55页
        4.2.1 双基因聚合载体的获得第55页
        4.2.2 表型鉴定第55页
    4.3 富含花青素和β-胡萝卜素水稻材料的培育第55-59页
5 讨论第59-63页
    5.1 花青素相关转录因子的遗传转化分析第59-61页
        5.1.1 OsC1超表达分析第59-60页
        5.1.2 OsB2超表达分析第60页
        5.1.3 OsPAC1超表达分析第60页
        5.1.4 三个转录因子综合分析第60-61页
    5.2 富含花青素和β-胡萝卜素水稻材料培育的分析第61-63页
参考文献第63-76页
附录第76-90页
致谢第90页

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