摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
第一章 百脉根LORE1插入突变体的分离及共生相关基因的功能鉴定 | 第11-33页 |
1. 前言 | 第11-21页 |
1.1 共生固氮的意义 | 第11-12页 |
1.2 豆科植物与根瘤菌共生固氮体系的建立 | 第12-19页 |
1.2.1 根瘤的形成过程 | 第12-13页 |
1.2.2 结瘤早期信号的传导 | 第13-15页 |
1.2.3 结瘤因子受体NFR1和NFR5 | 第15-16页 |
1.2.4 小G蛋白ROP6 | 第16-17页 |
1.2.5 共生受体激酶SymRK及其互作蛋白SIP1 | 第17-18页 |
1.2.6 植物硫酸肽PSK | 第18-19页 |
1.3 LORE1插入突变体 | 第19-20页 |
1.4 本研究目的及意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-25页 |
2.1 材料 | 第21-23页 |
2.1.1 菌株 | 第21页 |
2.1.2 引物 | 第21-22页 |
2.1.3 分子生物学和植物转化相关试剂 | 第22页 |
2.1.4 植物材料 | 第22页 |
2.1.5 主要的培养基和试剂 | 第22-23页 |
2.2 方法 | 第23-25页 |
2.2.1 突变体的分离和筛选 | 第23页 |
2.2.2 突变体的表型鉴定 | 第23-24页 |
2.2.3 数据分析 | 第24-25页 |
3 结果与分析 | 第25-31页 |
3.1 LORE1突变体的分离和筛选 | 第25-27页 |
3.1.1 LORE1突变体的插入位点分析和系统进化树 | 第25-26页 |
3.1.2 PCR扩增总基因组分离LORE1突变体 | 第26-27页 |
3.2 LORE1突变体的表型鉴定 | 第27-31页 |
3.2.1 LORE1突变体的早期共生表型 | 第27-29页 |
3.2.2 LORE1突变体后期结瘤时期的表型 | 第29-31页 |
4. 小结 | 第31-33页 |
第二章 百脉根BAK1/SERK3与SymRK等蛋白的相互作用研究 | 第33-71页 |
1 前言 | 第33-45页 |
1.1 植物的先天免疫防御反应 | 第33-34页 |
1.2 根瘤菌在入侵过程中抑制豆科植物的防御反应 | 第34-35页 |
1.3 SERK蛋白家族 | 第35-37页 |
1.4 受体激酶BAK1/SERK3 | 第37-40页 |
1.4.1 BAK1的结构 | 第37-38页 |
1.4.2 BAK1的功能 | 第38-40页 |
1.5 分裂泛素系统 | 第40-41页 |
1.6 2in1克隆载体系统 | 第41-43页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第43-45页 |
2 材料与方法 | 第45-59页 |
2.1 材料 | 第45-53页 |
2.1.1 质粒和菌株 | 第45-48页 |
2.1.2 主要引物和试剂 | 第48-52页 |
2.1.3 主要的培养基 | 第52-53页 |
2.2 方法 | 第53-59页 |
2.2.1 酵母双杂交验证蛋白相互作用 | 第53-55页 |
2.2.2 Western Blot检测酵母蛋白 | 第55-56页 |
2.2.3 2in1重组载体的构建 | 第56-57页 |
2.2.4 拟南芥原生质体分离与PEG转化 | 第57-59页 |
3 结果与分析 | 第59-71页 |
3.1 LjBAK1/SERK3蛋白的结构分析 | 第59-61页 |
3.2 酵母双杂交鉴定SERKs与SymRK等的相互作用 | 第61-65页 |
3.2.1 酵母重组质粒的构建和鉴定 | 第61-62页 |
3.2.2 LjSERKs与LjSymRK特异相互作用 | 第62-63页 |
3.2.3 BAK1/SERK3与SymRK互作在不同豆科植物中是保守的 | 第63页 |
3.2.4 BAK1的磷酸化失活突变抑制其与SymRK的互作 | 第63-64页 |
3.2.5 未在酵母体内检测到LjBAK1与LjFLS2,BRI1互作 | 第64-65页 |
3.2.6 Western blot检测LjBAK1/SERK3和LjSymRK蛋白的表达 | 第65页 |
3.3 分裂泛素系统研究LjSERKs与LjSymRK的相互作用 | 第65-68页 |
3.3.1 以LexA-VP16为报告蛋白的Split-Ub系统酵母表达载体的构建 | 第65-66页 |
3.3.2 以LexA-VP16为报告蛋白的Split-Ub系统验证SERKs与SymRK的互作 | 第66-68页 |
3.4 2in1克隆载体系统的应用 | 第68-71页 |
3.4.1 LjSERKs和Lj SymRK的2in1重组载体的构建 | 第68-69页 |
3.4.2 LjSERKs和Lj SymRK的原生质体共定位 | 第69-71页 |
第三章 总结和讨论 | 第71-77页 |
1 总结 | 第71-72页 |
1.1 百脉根LORE1插入突变体的分离及共生相关基因的功能鉴定 | 第71页 |
1.2 百脉根BAK1/SERK3与SymRK等蛋白的相互作用研究 | 第71-72页 |
2 讨论 | 第72-75页 |
2.1 百脉根LORE1插入突变体的分离及共生相关基因的功能鉴定 | 第72-73页 |
2.2 百脉根BAK1/SERK3与SymRK等蛋白的相互作用研究 | 第73-75页 |
3 展望 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-87页 |
致谢 | 第87页 |