中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-10页 |
第一章 前言 | 第15-25页 |
一.肺炎链球菌及危害 | 第15-16页 |
二.肺炎疫苗的研究进展 | 第16-19页 |
三.PspA蛋白及疫苗研究现状 | 第19-21页 |
四.BLP及粘膜疫苗 | 第21-22页 |
五.论文设计 | 第22-25页 |
1.研究目的 | 第22页 |
2.实验设计 | 第22-25页 |
第二章 系统免疫PspA蛋白疫苗免疫原组合的优选 | 第25-53页 |
第一节 材料,试剂与仪器 | 第25-31页 |
第二节 实验方法 | 第31-37页 |
1.免疫原的诱导和表达 | 第31页 |
2.免疫原的纯化 | 第31-32页 |
3.SDS-PAGE蛋白凝胶电泳鉴定 | 第32-33页 |
4.Western-Blot检测 | 第33-34页 |
5.系统免疫PspA蛋白疫苗免疫策略的确定 | 第34-35页 |
6.系统免疫PspA蛋白疫苗攻毒保护实验 | 第35页 |
7.ELISA法测定抗体效价 | 第35-37页 |
第三节 实验结果与讨论 | 第37-51页 |
1.免疫原PspA4蛋白和PsaA-PspA23蛋白的表达与纯化 | 第37-39页 |
2.免疫原的鉴定和定量 | 第39-41页 |
3.系统免疫PspA蛋白疫苗的免疫原性检测 | 第41-44页 |
4.通过动物攻毒存活率对免疫组合的优选 | 第44-51页 |
第四节 本章小结 | 第51-53页 |
第三章 系统免疫PspA蛋白疫苗与粘膜免疫PspA疫苗的比较 | 第53-75页 |
第一节 材料,试剂与仪器 | 第53-56页 |
第二节 实验方法 | 第56-61页 |
1.系统免疫PspA蛋白疫苗免疫原制备 | 第56页 |
2.粘膜免疫PspA疫苗免疫原制备 | 第56-57页 |
3.BLPs及PspA-PA-BLP定量 | 第57-58页 |
4.Western-Blot检测抗体效价 | 第58页 |
5.粘膜疫苗免疫策略的确定 | 第58页 |
6.两种PspA疫苗攻毒保护实验 | 第58-59页 |
7.ELISA法测定抗体效价 | 第59页 |
8.免疫小鼠鼻腔攻毒后血液与肺菌体载量的测定 | 第59-61页 |
第三节 实验结果与讨论 | 第61-74页 |
1.免疫原制备 | 第61-63页 |
2.系统疫苗与粘膜疫苗免疫策略的确定 | 第63-65页 |
3.系统疫苗和粘膜疫苗保护性研究 | 第65-69页 |
4.免疫小鼠鼻腔攻毒后血液与肺菌体载量的测定 | 第69-71页 |
5.系统疫苗和粘膜疫苗的免疫原性检测。 | 第71-74页 |
第四节 本章小结 | 第74-75页 |
第四章 PspA蛋白疫苗皮下与肌肉二种免疫途径的比较 | 第75-89页 |
第一节 材料,试剂与仪器 | 第75-77页 |
第二节 实验方法 | 第77-79页 |
1.疫苗免疫原制备 | 第77页 |
2.疫苗免疫的接种方法 | 第77页 |
3.疫苗的免疫原性检测 | 第77-79页 |
第三节 结果与讨论 | 第79-87页 |
1.PspA蛋白疫苗皮下与肌肉二种免疫途径的免疫原性检测 | 第79-82页 |
2.通过攻毒后血肺菌载量的测试对免疫途径的优选 | 第82-84页 |
3.通过动物攻毒存活率对免疫途径的优选 | 第84-87页 |
第四节 本章小结 | 第87-89页 |
第五章 系统免疫PspA蛋白疫苗广谱性评价 | 第89-105页 |
第一节 材料与仪器 | 第89-91页 |
第二节 实验方法 | 第91-93页 |
1.免疫原制备 | 第91页 |
2.肺炎球菌全菌体Western-Blot鉴定 | 第91页 |
3.肺炎球菌补体杀伤实验 | 第91-93页 |
4.肺炎链球菌PspA不同家族菌株的攻毒保护性研究 | 第93页 |
第三节 实验结果与讨论 | 第93-104页 |
1.体外实验评价疫苗的广谱性 | 第93-99页 |
2.体内实验评价疫苗的广谱性 | 第99-104页 |
第四节 本章小结 | 第104-105页 |
全文总结和结论 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-115页 |
作者简介及在学期间所获得的科研成果作者简历 | 第115-117页 |
致谢 | 第117页 |