| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-30页 |
| 1.1 魔芋研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.1 魔芋栽培与分布概述 | 第12页 |
| 1.1.2 魔芋的经济价值 | 第12-14页 |
| 1.1.3 魔芋分子生物学研究进展 | 第14页 |
| 1.2 魔芋器官发生研究概述 | 第14-17页 |
| 1.2.1 魔芋各器官发生的过程及决定其膨大的组织 | 第14-16页 |
| 1.2.2 器官生长发育的影响因素 | 第16页 |
| 1.2.3 控制植物器官大小的相关基因 | 第16-17页 |
| 1.3 植物细胞壁研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3.1 植物细胞壁的组成 | 第17页 |
| 1.3.2 细胞壁的成分 | 第17-18页 |
| 1.3.3 细胞壁的功能 | 第18-19页 |
| 1.4 Expansin研究进展 | 第19-30页 |
| 1.4.1 Expansin的发现 | 第19-20页 |
| 1.4.2 Expansin蛋白的结构与分类 | 第20-21页 |
| 1.4.3 Expansin蛋白的作用机理 | 第21-23页 |
| 1.4.4 Expansin蛋白的理化性质 | 第23页 |
| 1.4.5 Expansin蛋白的功能与表达特异性 | 第23-28页 |
| 1.4.6 Expansin蛋白的研究展望 | 第28-30页 |
| 第2章 前言 | 第30-32页 |
| 第3章 魔芋expansin基因的克隆与序列分析 | 第32-50页 |
| 3.1 实验材料 | 第32页 |
| 3.1.1 供试材料 | 第32页 |
| 3.1.2 主要的实验试剂 | 第32页 |
| 3.1.3 主要的实验仪器 | 第32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-41页 |
| 3.2.1 魔芋不同组织总RNA的提取与质检 | 第32-34页 |
| 3.2.2 反转录 | 第34页 |
| 3.2.3 魔芋EXPA基因保守片段的克隆 | 第34-38页 |
| 3.2.4 魔芋EXPA基因电子克隆及cDNA全长的获得 | 第38-39页 |
| 3.2.5 魔芋EXPA基因gDNA全长的克隆 | 第39-40页 |
| 3.2.6 魔芋EXPA基因的生物信息学分析 | 第40-41页 |
| 3.3 结果及分析 | 第41-47页 |
| 3.3.1 魔芋不同组织总RNA的提取与质检 | 第41页 |
| 3.3.2 魔芋EXPA基因保守片段的获得 | 第41-42页 |
| 3.3.3 魔芋EXPA全长基因的获得 | 第42页 |
| 3.3.4 魔芋EXPA基因的生物信息学分析 | 第42-47页 |
| 3.4 讨论 | 第47-50页 |
| 第4章 魔芋expansin基因的原核表达分析 | 第50-60页 |
| 4.1 实验材料 | 第50页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第50页 |
| 4.1.2 菌种和质粒 | 第50页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第50页 |
| 4.1.4 主要实验仪器 | 第50页 |
| 4.2 实验方法 | 第50-57页 |
| 4.2.1 实验试剂的制备 | 第50-51页 |
| 4.2.2 原核表达载体的构建 | 第51-55页 |
| 4.2.3 重组蛋白的诱导表达 | 第55-57页 |
| 4.3 结果分析 | 第57-58页 |
| 4.3.1 克隆载体的构建 | 第57页 |
| 4.3.2 原核表达载体的构建 | 第57-58页 |
| 4.3.3 重组蛋白表达的SDS-PAGE电泳检测 | 第58页 |
| 4.4 讨论 | 第58-60页 |
| 第5章 魔芋expansin基因的表达模式分析 | 第60-68页 |
| 5.1 实验材料 | 第60页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第60页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第60页 |
| 5.1.3 主要实验仪器 | 第60页 |
| 5.2 实验方法 | 第60-62页 |
| 5.2.1 总RNA的提取 | 第60页 |
| 5.2.2 cDNA的合成 | 第60-61页 |
| 5.2.3 定量引物的设计和特异性检测 | 第61-62页 |
| 5.2.4 标准曲线的建立 | 第62页 |
| 5.2.5 实时荧光定量PCR | 第62页 |
| 5.3 结果分析 | 第62-66页 |
| 5.3.1 荧光定量PCR引物的熔解曲线特异性分析结果 | 第62-63页 |
| 5.3.2 荧光定量PCR引物标准曲线分析结果 | 第63-64页 |
| 5.3.3 基因表达的实时荧光定量表达分析结果 | 第64-66页 |
| 5.4 讨论 | 第66-68页 |
| 第6章 魔芋EXPA4基因启动子克隆与活性分析 | 第68-86页 |
| 6.1 实验材料 | 第68页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第68页 |
| 6.1.2 载体和菌株 | 第68页 |
| 6.1.3 主要试剂 | 第68页 |
| 6.1.4 主要实验仪器 | 第68页 |
| 6.1.5 自配试剂与培养基 | 第68页 |
| 6.2 实验方法 | 第68-73页 |
| 6.2.1 魔芋基因组DNA的提取与质量检测 | 第68-69页 |
| 6.2.2 AaEXPA4和AkEXPA4基因启动子的克隆 | 第69-70页 |
| 6.2.3 克隆载体AaEXPA4-pro和AkEXPA4-pro的构建 | 第70-71页 |
| 6.2.4 AaEXPA4和AkEXPA4基因启动子序列的生物信息学分析 | 第71页 |
| 6.2.5 植物表达载体的构建 | 第71页 |
| 6.2.6 农杆菌感受态的制备、转化、转化子的鉴定 | 第71-72页 |
| 6.2.7 叶盘侵染法检测启动子的瞬时表达活性 | 第72-73页 |
| 6.3 结果与分析 | 第73-83页 |
| 6.3.1 魔芋基因组DNA的提取 | 第73-74页 |
| 6.3.2 hiTAIL-PCR扩增的电泳检测 | 第74-75页 |
| 6.3.3 特异条带的回收与测序 | 第75页 |
| 6.3.4 启动子序列的生物信息学分析 | 第75-81页 |
| 6.3.5 克隆载体的构建 | 第81-82页 |
| 6.3.6 重组载体的构建 | 第82页 |
| 6.3.7 转化子的鉴定及工程菌的获得 | 第82-83页 |
| 6.3.8 启动子瞬时活性分析 | 第83页 |
| 6.4 讨论 | 第83-86页 |
| 第7章 魔芋expansin基因超表达载体的构建 | 第86-92页 |
| 7.1 实验材料 | 第86页 |
| 7.1.1 植物材料 | 第86页 |
| 7.1.2 菌株与载体 | 第86页 |
| 7.1.3 主要仪器设备 | 第86页 |
| 7.1.4 主要购买试剂 | 第86页 |
| 7.2 实验方法 | 第86-88页 |
| 7.2.1 克隆载体的构建 | 第86-87页 |
| 7.2.2 超表达载体的构建 | 第87-88页 |
| 7.2.3 超表达重组质粒转化农杆菌 | 第88页 |
| 7.2.4 工程菌的获得 | 第88页 |
| 7.3 结果分析 | 第88-90页 |
| 7.3.1 克隆载体的构建 | 第88-89页 |
| 7.3.2 超表达载体的构建 | 第89-90页 |
| 7.3.3 工程菌的鉴定 | 第90页 |
| 7.4 讨论 | 第90-92页 |
| 第8章 结论与展望 | 第92-94页 |
| 8.1 主要结论 | 第92页 |
| 8.2 展望 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-102页 |
| 学习期间发表的论文 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
