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NDRG4基因对成肌细胞分化和猪生产性状的影响及其分子机制研究

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
缩略词表第12-13页
第一章 文献综述第13-27页
    1.1 骨骼肌的生长发育第13-21页
        1.1.1 动物胚胎期骨骼肌的形成第13-15页
        1.1.2 动物出生后骨骼肌的生长第15页
        1.1.3 骨骼肌损伤后再生第15-16页
        1.1.4 骨骼肌生长发育的主要调控因子第16-21页
    1.2 NDRG4的研究进展第21-26页
        1.2.1 NDRG4的生物学特性与结构特征第21页
        1.2.2 NDRG4的主要功能第21-23页
        1.2.3 NDRG4基因的表达调控及相互作用因子研究第23-26页
    1.3 本研究的目的意义第26-27页
第二章 材料与方法第27-51页
    2.1 本研究的技术路线第27页
    2.2 实验材料第27-32页
        2.2.1 细胞与动物第27-28页
        2.2.2 菌株和载体第28-29页
        2.2.3 主要试剂和试剂盒第29-31页
        2.2.4 主要仪器和设备第31-32页
        2.2.5 应用的分析软件和生物信息学网站第32页
    2.3 实验方法第32-51页
        2.3.1 NDRG4超表达载体构建第32-39页
        2.3.2 NDRG4干扰片段设计第39页
        2.3.3 细胞培养第39-40页
        2.3.4 细胞转染第40-41页
        2.3.5 RTCAxCELLigence细胞增殖检测第41-42页
        2.3.6 流式细胞仪分析细胞周期第42页
        2.3.7 荧光定量PCR分析第42-43页
        2.3.8 细胞蛋白提取第43页
        2.3.9 蛋白浓度的测定第43页
        2.3.10 Westernblotting分析第43-45页
        2.3.11 免疫荧光分析第45-46页
        2.3.12 Co-IP分析第46页
        2.3.13 ChIP分析第46-50页
        2.3.14 试验猪群与性状测定第50页
        2.3.15 SNP数据统计与关联分析第50-51页
第三章 实验结果第51-81页
    3.1 猪NDRG4基因的多序列比对与系统进化树的构建第51-53页
    3.2 NDRG4在细胞成肌分化时期和肌肉损伤修复过程中表达的变化第53-57页
        3.2.1 NDRG4在C2C12细胞成肌分化不同时期的表达第53-54页
        3.2.2 NDRG4在猪骨骼肌卫星细胞成肌分化过程中的表达第54-56页
        3.2.3 NDRG4在小鼠肌肉损伤修复过程中的表达第56-57页
    3.3 超表达NDRG4对C2C12细胞增殖和分化的影响第57-63页
        3.3.1 NDRG4超表达载体的鉴定第57-58页
        3.3.2 超表达NDRG4对C2C12细胞增殖的影响第58-60页
        3.3.3 超表达NDRG4对C2C12细胞成肌分化的影响第60-63页
    3.4 干涉NDRG4对C2C12细胞增殖和分化的影响第63-69页
        3.4.1 NDRG4干涉片段的筛选第63页
        3.4.2 干涉NDRG4对C2C12细胞增殖的影响第63-66页
        3.4.3 干涉NDRG4对C2C12细胞分化的影响第66-69页
    3.5 NDRG4基因调控C2C12细胞成肌分化的分子机制第69-76页
        3.5.1 NDRG4通过Akt/CREB通路调控C2C12细胞成肌分化第69-71页
        3.5.2 NDRG4通过竞争性结合CTMP调节Akt信号通路第71-73页
        3.5.3 NDRG4通过调控CREB的转录活性影响成肌分化第73-76页
    3.6 猪NDRG4基因多态性与遗传效应分析结果第76-81页
        3.6.1 猪NDRG4基因多态性检测结果第76-78页
        3.6.2 NDRG4基因不同猪群体中的SNP基因型分布第78-79页
        3.6.3 NDRG4基因SNP多态性与猪生产性状间的关联分析第79-81页
第四章 讨论第81-87页
    4.1 NDRG4在骨骼肌生长发育过程中的表达模式分析第81-82页
    4.2 NDRG4对C2C12细胞增殖和分化的影响第82-83页
    4.3 NDRG4通过Akt/CREB信号通路促进C2C12细胞成肌分化第83-84页
    4.4 NDRG4通过与pAkt竞争性结合CTMP激活Akt信号通路第84页
    4.5 NDRG4促进骨骼肌细胞成肌分化的机制模型第84-85页
    4.6 NDRG4基因多态性与猪相关性状的关联分析第85-87页
第五章 总结第87-89页
    5.1 主要研究结果第87页
    5.2 主要创新点第87页
    5.3 不足之处第87-88页
    5.4 下一步计划第88-89页
参考文献第89-99页
附图第99-100页
在读期间发表的文章第100-101页
致谢第101-103页

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