摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-27页 |
1.1 骨骼肌的生长发育 | 第13-21页 |
1.1.1 动物胚胎期骨骼肌的形成 | 第13-15页 |
1.1.2 动物出生后骨骼肌的生长 | 第15页 |
1.1.3 骨骼肌损伤后再生 | 第15-16页 |
1.1.4 骨骼肌生长发育的主要调控因子 | 第16-21页 |
1.2 NDRG4的研究进展 | 第21-26页 |
1.2.1 NDRG4的生物学特性与结构特征 | 第21页 |
1.2.2 NDRG4的主要功能 | 第21-23页 |
1.2.3 NDRG4基因的表达调控及相互作用因子研究 | 第23-26页 |
1.3 本研究的目的意义 | 第26-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-51页 |
2.1 本研究的技术路线 | 第27页 |
2.2 实验材料 | 第27-32页 |
2.2.1 细胞与动物 | 第27-28页 |
2.2.2 菌株和载体 | 第28-29页 |
2.2.3 主要试剂和试剂盒 | 第29-31页 |
2.2.4 主要仪器和设备 | 第31-32页 |
2.2.5 应用的分析软件和生物信息学网站 | 第32页 |
2.3 实验方法 | 第32-51页 |
2.3.1 NDRG4超表达载体构建 | 第32-39页 |
2.3.2 NDRG4干扰片段设计 | 第39页 |
2.3.3 细胞培养 | 第39-40页 |
2.3.4 细胞转染 | 第40-41页 |
2.3.5 RTCAxCELLigence细胞增殖检测 | 第41-42页 |
2.3.6 流式细胞仪分析细胞周期 | 第42页 |
2.3.7 荧光定量PCR分析 | 第42-43页 |
2.3.8 细胞蛋白提取 | 第43页 |
2.3.9 蛋白浓度的测定 | 第43页 |
2.3.10 Westernblotting分析 | 第43-45页 |
2.3.11 免疫荧光分析 | 第45-46页 |
2.3.12 Co-IP分析 | 第46页 |
2.3.13 ChIP分析 | 第46-50页 |
2.3.14 试验猪群与性状测定 | 第50页 |
2.3.15 SNP数据统计与关联分析 | 第50-51页 |
第三章 实验结果 | 第51-81页 |
3.1 猪NDRG4基因的多序列比对与系统进化树的构建 | 第51-53页 |
3.2 NDRG4在细胞成肌分化时期和肌肉损伤修复过程中表达的变化 | 第53-57页 |
3.2.1 NDRG4在C2C12细胞成肌分化不同时期的表达 | 第53-54页 |
3.2.2 NDRG4在猪骨骼肌卫星细胞成肌分化过程中的表达 | 第54-56页 |
3.2.3 NDRG4在小鼠肌肉损伤修复过程中的表达 | 第56-57页 |
3.3 超表达NDRG4对C2C12细胞增殖和分化的影响 | 第57-63页 |
3.3.1 NDRG4超表达载体的鉴定 | 第57-58页 |
3.3.2 超表达NDRG4对C2C12细胞增殖的影响 | 第58-60页 |
3.3.3 超表达NDRG4对C2C12细胞成肌分化的影响 | 第60-63页 |
3.4 干涉NDRG4对C2C12细胞增殖和分化的影响 | 第63-69页 |
3.4.1 NDRG4干涉片段的筛选 | 第63页 |
3.4.2 干涉NDRG4对C2C12细胞增殖的影响 | 第63-66页 |
3.4.3 干涉NDRG4对C2C12细胞分化的影响 | 第66-69页 |
3.5 NDRG4基因调控C2C12细胞成肌分化的分子机制 | 第69-76页 |
3.5.1 NDRG4通过Akt/CREB通路调控C2C12细胞成肌分化 | 第69-71页 |
3.5.2 NDRG4通过竞争性结合CTMP调节Akt信号通路 | 第71-73页 |
3.5.3 NDRG4通过调控CREB的转录活性影响成肌分化 | 第73-76页 |
3.6 猪NDRG4基因多态性与遗传效应分析结果 | 第76-81页 |
3.6.1 猪NDRG4基因多态性检测结果 | 第76-78页 |
3.6.2 NDRG4基因不同猪群体中的SNP基因型分布 | 第78-79页 |
3.6.3 NDRG4基因SNP多态性与猪生产性状间的关联分析 | 第79-81页 |
第四章 讨论 | 第81-87页 |
4.1 NDRG4在骨骼肌生长发育过程中的表达模式分析 | 第81-82页 |
4.2 NDRG4对C2C12细胞增殖和分化的影响 | 第82-83页 |
4.3 NDRG4通过Akt/CREB信号通路促进C2C12细胞成肌分化 | 第83-84页 |
4.4 NDRG4通过与pAkt竞争性结合CTMP激活Akt信号通路 | 第84页 |
4.5 NDRG4促进骨骼肌细胞成肌分化的机制模型 | 第84-85页 |
4.6 NDRG4基因多态性与猪相关性状的关联分析 | 第85-87页 |
第五章 总结 | 第87-89页 |
5.1 主要研究结果 | 第87页 |
5.2 主要创新点 | 第87页 |
5.3 不足之处 | 第87-88页 |
5.4 下一步计划 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-99页 |
附图 | 第99-100页 |
在读期间发表的文章 | 第100-101页 |
致谢 | 第101-103页 |