| 中文摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 活性氧 | 第12-14页 |
| 1.1.1 活性氧概述 | 第12页 |
| 1.1.2 活性氧的产生与代谢 | 第12-13页 |
| 1.1.3 活性氧与人类健康 | 第13-14页 |
| 1.2 氧化应激 | 第14-15页 |
| 1.2.1 氧化应激概述 | 第14页 |
| 1.2.2 氧化应激与健康 | 第14-15页 |
| 1.3 硒 | 第15-18页 |
| 1.3.1 硒的概述 | 第15-16页 |
| 1.3.2 硒代半胱氨酸的作用机制 | 第16-18页 |
| 1.4 谷胱甘肽过氧化物酶 | 第18-21页 |
| 1.4.1 GPx概述 | 第18页 |
| 1.4.2 主要GPx分类 | 第18-19页 |
| 1.4.3 GPx与ROS | 第19-20页 |
| 1.4.4 GPx作用机制 | 第20-21页 |
| 1.5 立题依据 | 第21-23页 |
| 第2章 实验内容 | 第23-35页 |
| 2.1 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2.2 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.3 实验菌株 | 第25页 |
| 2.4 试剂配制 | 第25-28页 |
| 2.5 实验方法 | 第28-35页 |
| 2.5.1 PCR构建真核内表达的GPx | 第28-29页 |
| 2.5.2 pSelExpress1-hGPx1重组质粒的构建 | 第29-30页 |
| 2.5.3 重组质粒的筛选 | 第30-31页 |
| 2.5.4 重组质粒的提取与浓度测定 | 第31页 |
| 2.5.5 Hek293T细胞的培养 | 第31页 |
| 2.5.6 脂质体转染及细胞裂解 | 第31页 |
| 2.5.7 蛋白纯化 | 第31-32页 |
| 2.5.8 Westernblot鉴定实验 | 第32页 |
| 2.5.9 建立H_2O_2诱导氧化应激损伤模型 | 第32页 |
| 2.5.10 GPx1安全剂量的选择 | 第32-33页 |
| 2.5.11 MTT法测定Hek293T细胞存活率 | 第33-34页 |
| 2.5.12 脂质过氧化产物丙二醛(Malondialdehyde, MDA)的含量测定 | 第34页 |
| 2.5.13 细胞胞浆酶一乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)含量测定 | 第34-35页 |
| 第3章 实验结果 | 第35-46页 |
| 3.1 真核表达 | 第35-38页 |
| 3.1.1 PCR及琼脂糖凝胶电泳结果图 | 第35-36页 |
| 3.1.2 双酶切鉴定结果 | 第36页 |
| 3.1.3 质粒纯度测定 | 第36-37页 |
| 3.1.4 Westernblot实验结果 | 第37-38页 |
| 3.2 抗氧化实验 | 第38-46页 |
| 3.2.1 H_2O_2诱导氧化应激损伤模型建立 | 第38-39页 |
| 3.2.2 安全剂量的选择 | 第39-40页 |
| 3.2.3 预保护作用对细胞存活率的影响 | 第40-41页 |
| 3.2.4 治疗作用对细胞存活率的影响 | 第41-42页 |
| 3.2.5 脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量测定 | 第42-44页 |
| 3.2.6 细胞胞浆酶一乳酸脱氢酶(LDH)含量测定 | 第44-46页 |
| 第4章 结论与讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-58页 |
| 作者简介及学期间的科研成果 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
