| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| Ⅰ 前言 | 第12-16页 |
| 1.1 先天性免疫系统 | 第12-13页 |
| 1.1.1 体液免疫 | 第12-13页 |
| 1.1.2 细胞免疫 | 第13页 |
| 1.2 吞噬反应 | 第13-14页 |
| 1.3 包囊反应 | 第14页 |
| 1.4 20-羟基蜕皮酮 | 第14-15页 |
| 1.5 棉铃虫 | 第15-16页 |
| Ⅱ HaCTL3介导20E信号促进棉铃虫血细胞包囊和吞噬 | 第16-36页 |
| 1. 研究背景及意义 | 第16-17页 |
| 2. 材料与方法 | 第17-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 实验用棉铃虫 | 第17页 |
| 2.1.2 实验用菌株和蛋白 | 第17页 |
| 2.1.3 实验用试剂、药品 | 第17-18页 |
| 2.1.4 实验用仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-27页 |
| 2.2.1 Western blot检测HaCTL3在不同发育阶段的蛋白表达水平 | 第19-20页 |
| 2.2.2 Western blot检测注射20E对HaCTL3蛋白水平表达的影响 | 第20页 |
| 2.2.3 20E受体复合物EcR-USP的RNA干扰实验 | 第20-23页 |
| 2.2.4 Western blot检测注射beads对HaCTL3蛋白水平表达的影响 | 第23页 |
| 2.2.5 HaCTL3的RNA干扰实验 | 第23-25页 |
| 2.2.6 孵育rHaCTL3对血细胞吞噬率的影响 | 第25页 |
| 2.2.7 敲降Haβ-integrin对棉铃虫血细胞吞噬率的影响 | 第25-27页 |
| 3. 结果与分析 | 第27-34页 |
| 3.1 HaCTL3在变态期脂肪体、血细胞和血浆中蛋白水平升高 | 第27页 |
| 3.2 20E通过其受体ECR-USP复合物诱导HaCTL3表达 | 第27-29页 |
| 3.3 Beads刺激诱导HaCTL3蛋白表达 | 第29-30页 |
| 3.4 敲降HaCTL3导致血细胞包囊率降低 | 第30页 |
| 3.5 敲降HaCTL3导致血细胞吞噬率降低 | 第30-31页 |
| 3.6 孵育rHaCTL3促进血细胞吞噬率 | 第31-32页 |
| 3.7 敲降Haβ-integrin抑制了HaCTL3介导的血细胞吞噬反应 | 第32-34页 |
| 4. 讨论 | 第34-36页 |
| Ⅲ HaGBPB介导20E信号抑制棉铃虫血细胞包囊反应 | 第36-62页 |
| 1. 研究背景及意义 | 第36-38页 |
| 1.1 细胞因子 | 第36页 |
| 1.2 Growth-blocking pepide(GBP) | 第36-37页 |
| 1.3 GBP-bindingprotein (GBPB) | 第37-38页 |
| 2. 材料与方法 | 第38-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第38页 |
| 2.1.1 实验用棉铃虫 | 第38页 |
| 2.1.2 实验用菌株和载体 | 第38页 |
| 2.1.3 实验用试剂、药品 | 第38页 |
| 2.1.4 实验用仪器设备 | 第38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-48页 |
| 2.2.1 HaGBPB基因的克隆表达及纯化 | 第38-42页 |
| 2.2.2 Western blot抗体检测实验 | 第42页 |
| 2.2.3 Western blot检测HaGBPB在棉铃虫不同发育阶段的蛋白水平表达 | 第42页 |
| 2.2.4 免疫细胞化学定位检测HaGBPB蛋白在血细胞中的定位 | 第42-43页 |
| 2.2.5 Western blot检测注射20E对HaGBPB蛋白水平表达的影响 | 第43-44页 |
| 2.2.6 免疫细胞化学定位检测20E对HaGBPB蛋白在血细胞中的表达和定位的影响 | 第44页 |
| 2.2.7 Western blot检测注射beads对HaGBPB蛋白水平表达的影响 | 第44页 |
| 2.2.8 免疫细胞化学定位检测beads对HaGBPB蛋白在血细胞中的表达和定位的影响 | 第44页 |
| 2.2.9 HaGBPB的RNAi实验 | 第44-46页 |
| 2.2.10 注射Anti- rHaGBPB1抗血清对棉铃虫血细胞包囊率的影响 | 第46页 |
| 2.2.11 孵育rHaGBPB蛋白对棉铃虫血细胞包囊率的影响 | 第46页 |
| 2.2.12 Isothermal Titration Calorimetry (ITC)实验 | 第46-48页 |
| 3. 结果与分析 | 第48-59页 |
| 3.1 rHaGBPB1,rF1R1,rF2R2和rHaGBPB2蛋白纯化 | 第48-50页 |
| 3.1.1 重组表达质粒的构建 | 第48页 |
| 3.1.2 阳性筛选结果 | 第48-49页 |
| 3.1.3 重组蛋白表达纯化 | 第49-50页 |
| 3.2 Anti-rHaGBPB1抗血清识别rHaGBPB1和rHaGBB2 | 第50-51页 |
| 3.3 HaGBPB蛋白在变态期棉铃虫血浆中上调表达 | 第51页 |
| 3.4 HaGBPB蛋白在不同发育阶段血细胞中的定位 | 第51-53页 |
| 3.5 20E诱导HaGBPB蛋白从类绛色血细胞释放到血浆 | 第53-54页 |
| 3.6 Beads刺激促进HaGBPB从类绛色血细胞释放到血浆 | 第54-55页 |
| 3.7 HaGBPB1抑制棉铃虫血细胞包囊 | 第55-57页 |
| 3.9 rHaGBPB1通过其N端与HaGBP多肽相结合 | 第57-59页 |
| 4. 讨论 | 第59-62页 |
| Ⅳ 总结 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 攻读硕士期间论文发表情况 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
