摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词 | 第17-18页 |
第一章 绪论 | 第18-35页 |
1.1 环境中HCHO污染现状 | 第18-19页 |
1.2 环境中HCHO对人体的危害 | 第19页 |
1.3 环境中HCHO治理的现状 | 第19-21页 |
1.4 高等植物吸收HCHO的研究进展 | 第21-23页 |
1.4.1 野生型植物吸收HCHO的研究进展 | 第21-22页 |
1.4.2 基因工程改造植物吸收HCHO的研究进展 | 第22-23页 |
1.5 高等植物代谢HCHO的研究进展 | 第23-25页 |
1.5.1 高等植物代谢气体HCHO的研究进展 | 第23页 |
1.5.2 高等植物代谢液体HCHO的研究进展 | 第23-25页 |
1.6 14-3-3蛋白的研究进展 | 第25-29页 |
1.6.1 14-3-3蛋白的结构与功能 | 第25-26页 |
1.6.2 14-3-3蛋白调控靶蛋白的作用机制 | 第26页 |
1.6.3 14-3-3蛋白对植物抗氧化酶的调控作用 | 第26-27页 |
1.6.4 14-3-3蛋白对植物碳、氮代谢的调控作用 | 第27-29页 |
1.7 电化学分析方法的应用进展 | 第29-33页 |
1.7.1 丝网印刷技术和电极概述 | 第29-30页 |
1.7.2 电化学DNA传感器的研究进展 | 第30-32页 |
1.7.3 电化学免疫传感器的研究进展 | 第32-33页 |
1.8 本研究的目的和意义 | 第33-35页 |
第二章 电化学方法分析14-3-3c和g基因转录水平 | 第35-49页 |
2.1 材料与方法 | 第36-40页 |
2.1.1 植物材料 | 第36页 |
2.1.2 烟草的培养 | 第36-37页 |
2.1.3 烟草叶片总RNA提取及cDNA合成 | 第37-38页 |
2.1.4 荧光定量PCR | 第38-39页 |
2.1.5 电极的制备 | 第39页 |
2.1.6 DNA探针的固定 | 第39-40页 |
2.1.7 DNA杂交 | 第40页 |
2.1.8 指示剂的嵌入及电化学检测 | 第40页 |
2.2 结果与分析 | 第40-47页 |
2.2.1 荧光定量PCR分析14-3-3c和g基因在烟草中的转录水平 | 第40-42页 |
2.2.2 不同修饰电极的电化学表征 | 第42页 |
2.2.3 亚甲基蓝在不同修饰的电极上的差分脉冲伏安曲线 | 第42-43页 |
2.2.4 电化学DNA传感器的选择性 | 第43-44页 |
2.2.5 标准曲线的制作 | 第44-45页 |
2.2.6 烟草RNA样品的电化学检测 | 第45-46页 |
2.2.7 烟草cDNA样品的电化学检测 | 第46-47页 |
2.3 讨论 | 第47-49页 |
第三章 电化学方法分析14-3-3c和g蛋白表达水平 | 第49-64页 |
3.1 材料与方法 | 第50-56页 |
3.1.1 植物材料 | 第50页 |
3.1.2 烟草的培养 | 第50页 |
3.1.3 烟草叶片总蛋白的提取 | 第50页 |
3.1.4 蛋白浓度的测定 | 第50页 |
3.1.5 14-3-3蛋白的诱导表达 | 第50-51页 |
3.1.6 14-3-3蛋白的纯化 | 第51页 |
3.1.7 WesternBlot分析 | 第51-54页 |
3.1.8 抗体的生物素标记 | 第54页 |
3.1.9 丝网印刷碳电极的电化学活化 | 第54页 |
3.1.10 抗体的组装 | 第54页 |
3.1.11 样品的检测 | 第54-55页 |
3.1.12 电化学测量 | 第55-56页 |
3.2 结果与分析 | 第56-62页 |
3.2.1 14-3-3蛋白的表达和纯化 | 第56页 |
3.2.2 WesternBlot分析14-3-3c和g蛋白表达水平 | 第56-57页 |
3.2.3 TMB在印刷电极上的活性检测 | 第57-59页 |
3.2.4 印刷电极的电化学活化检测 | 第59-60页 |
3.2.5 不同浓度的14-3-3抗原与电流之间的关系 | 第60-61页 |
3.2.6 烟草总蛋白样品的电化学检测 | 第61-62页 |
3.3 讨论 | 第62-64页 |
第四章 14-3-3c和g在转基因烟草中的功能分析 | 第64-76页 |
4.1 材料与方法 | 第64-66页 |
4.1.1 植物材料 | 第64页 |
4.1.2 烟草的培养 | 第64页 |
4.1.3 14-3-3转基因烟草叶片抗氧化酶及甲醛代谢相关酶基因转录水平分析 | 第64-65页 |
4.1.4 厌氧胁迫下转基因烟草叶片代谢产物的13C-NMR测定 | 第65页 |
4.1.5 液体H13CHO胁迫下转基因烟草叶片代谢产物的13C-NMR测定 | 第65-66页 |
4.2 结果与分析 | 第66-74页 |
4.2.1 14-3-3c和g表达改变对转基因烟草叶片抗氧化酶基因转录的影响 | 第66-68页 |
4.2.2 14-3-3c和g表达改变对烟草叶片甲醛代谢相关酶基因转录的影响 | 第68-69页 |
4.2.3 14-3-3c和g表达改变对转基因烟草叶片厌氧代谢的影响 | 第69-70页 |
4.2.4 14-3-3c和g表达改变对转基因烟草叶片甲醛代谢的影响 | 第70-74页 |
4.3 讨论 | 第74-76页 |
第五章 总结与展望 | 第76-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-86页 |
附录A 攻读硕士期间发表的论文和专利 | 第86页 |