| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略词表 | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-18页 |
| 1.1 糖尿病背景介绍 | 第11页 |
| 1.2 血管内皮细胞的生理功能 | 第11-12页 |
| 1.2.1 屏障功能 | 第11页 |
| 1.2.2 调节血管通透性 | 第11-12页 |
| 1.2.3 维持血管张力和血液正常流动 | 第12页 |
| 1.2.4 抗粘附性 | 第12页 |
| 1.2.5 调节血管平滑肌细胞 | 第12页 |
| 1.3 高血糖与血管内皮功能损伤 | 第12-15页 |
| 1.3.1 高血糖与血管内皮细胞功能紊乱 | 第12-14页 |
| 1.3.2 高血糖与血管内皮细胞凋亡 | 第14-15页 |
| 1.4 王不留行黄酮苷(vaccarin)研究现状 | 第15-16页 |
| 1.5 本课题研究意义和内容 | 第16-18页 |
| 1.5.1 本课题研究意义 | 第16-17页 |
| 1.5.2 本课题研究内容 | 第17-18页 |
| 第二章 王不留行黄酮苷通过ROS/AMPK/miR-34a/eNOS促进NO释放 | 第18-32页 |
| 2.1 引言 | 第18页 |
| 2.2 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.2.1 细胞株 | 第18页 |
| 2.2.2 药品与试剂 | 第18-19页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.2.4 主要试剂的配制 | 第20页 |
| 2.3 实验方法 | 第20-24页 |
| 2.3.1 人HMEC-1的复苏 | 第20-21页 |
| 2.3.2 HMEC-1的培养和传代 | 第21页 |
| 2.3.3 HMEC-1的冻存 | 第21页 |
| 2.3.4 HMEC-1的处理 | 第21页 |
| 2.3.5 miR-34a inhibitor和mimic瞬时转染 | 第21页 |
| 2.3.6 酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞NO含量 | 第21页 |
| 2.3.7 qPCR检测 | 第21-23页 |
| 2.3.8 蛋白质免疫印记(Western blot)分析技术 | 第23-24页 |
| 2.3.9 细胞内ROS的检测 | 第24页 |
| 2.3.10 统计学处理 | 第24页 |
| 2.4 结果 | 第24-29页 |
| 2.4.1 Vaccarin对HMEC-1细胞NO生成的影响 | 第24-25页 |
| 2.4.2 eNOS的表达在vaccarin促NO生成中的作用 | 第25页 |
| 2.4.3 miR-34a的表达在vaccarin促NO生成中的作用 | 第25-26页 |
| 2.4.4 AMPK的表达在vaccarin促NO生成中的作用 | 第26-28页 |
| 2.4.5 ROS生成在vaccarin促NO生成中的作用 | 第28-29页 |
| 2.5 讨论 | 第29-31页 |
| 2.6 结论 | 第31-32页 |
| 第三章 王不留行黄酮苷通过ROS/HDAC1减轻血管内皮细胞凋亡 | 第32-45页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 实验材料 | 第32-34页 |
| 3.2.1 细胞株 | 第32页 |
| 3.2.2 药品及试剂 | 第32-33页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第33-34页 |
| 3.2.4 主要试剂的配制 | 第34页 |
| 3.3 实验方法 | 第34-35页 |
| 3.3.1 人HMEC-1的复苏 | 第34页 |
| 3.3.2 HMEC-1的培养和传代 | 第34页 |
| 3.3.3 HMEC-1的冻存 | 第34页 |
| 3.3.4 HMEC-1的处理 | 第34页 |
| 3.3.5 HMEC-1的细胞活性检测 | 第34页 |
| 3.3.6 细胞内ROS的检测 | 第34页 |
| 3.3.7 试剂盒检测SOD、CAT和GSH-Px水平 | 第34页 |
| 3.3.8 HMEC-1细胞周期检测 | 第34-35页 |
| 3.3.9 HMEC-1细胞凋亡检测 | 第35页 |
| 3.3.10 TUNEL法检测细胞凋亡 | 第35页 |
| 3.3.11 Caspase-3活性测定 | 第35页 |
| 3.3.12 蛋白质免疫印记(Western blot)分析技术 | 第35页 |
| 3.3.13 统计学处理 | 第35页 |
| 3.4 结果 | 第35-42页 |
| 3.4.1 Vaccarin对HG诱导的细胞活力、周期阻滞和细胞凋亡的影响 | 第35-38页 |
| 3.4.2 Vaccarin对HG诱导的氧化应激的影响 | 第38页 |
| 3.4.3 Vaccarin抑制HG诱导的HMEC-1细胞HDAC1的表达 | 第38-40页 |
| 3.4.4 Vaccarin抑制HG诱导的HMEC-1细胞ROS的积累 | 第40-42页 |
| 3.4.5 Vaccarin通过对ROS和HDAC1相互调节抑制HG诱导的HMEC-1损伤 | 第42页 |
| 3.5 讨论 | 第42-44页 |
| 3.6 结论 | 第44-45页 |
| 第四章 王不留行黄酮苷改善糖尿病内皮功能障碍 | 第45-55页 |
| 4.1 引言 | 第45页 |
| 4.2 实验材料 | 第45-47页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第45页 |
| 4.2.2 药品与试剂 | 第45-46页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第46-47页 |
| 4.2.4 主要试剂的配制 | 第47页 |
| 4.3 实验方法 | 第47-50页 |
| 4.3.1 2型糖尿病模型的建立 | 第47-48页 |
| 4.3.2 血糖(FBG)测定 | 第48页 |
| 4.3.3 口服糖耐量实验(OGTT)和胰岛素耐量实验(ITT) | 第48页 |
| 4.3.4 血清生化指标测定 | 第48页 |
| 4.3.5 酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清NO | 第48页 |
| 4.3.6 小鼠胸主动脉张力测定 | 第48-49页 |
| 4.3.7 血管ROS检测 | 第49页 |
| 4.3.8 qPCR检测 | 第49页 |
| 4.3.9 蛋白质免疫印记分析技术(Western blot) | 第49页 |
| 4.3.10 Caspase-3活性检测 | 第49-50页 |
| 4.3.11 统计学处理 | 第50页 |
| 4.4 结果 | 第50-53页 |
| 4.4.1 Vaccarin对糖尿病小鼠糖代谢、胰岛素抵抗的影响 | 第50页 |
| 4.4.2 Vaccarin对糖尿病小鼠血清生化指标的影响 | 第50-51页 |
| 4.4.3 Vaccarin对糖尿病小鼠主动脉功能的影响 | 第51页 |
| 4.4.4 Vaccarin对STZ/HFD诱导的糖尿病小鼠氧化应激的影响 | 第51-52页 |
| 4.4.5 在体验证vaccarin对糖尿病小鼠血管内皮功能紊乱的影响 | 第52-53页 |
| 4.4.6 在体验证vaccarin对糖尿病小鼠血管内皮细胞凋亡的影响 | 第53页 |
| 4.5 讨论 | 第53-54页 |
| 4.6 结论 | 第54-55页 |
| 小结与展望 | 第55-58页 |
| 小结 | 第55-57页 |
| 展望 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 附录1:作者在攻读全日制硕士学位期间发表的论文 | 第64页 |
