中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩略词索引表 | 第13-15页 |
第1章 绪论 | 第15-22页 |
1.1 寡核苷酸的研究现状 | 第15-17页 |
1.1.1 反义寡核苷酸类药物简介及应用 | 第15-16页 |
1.1.2 RNAi的研究现状 | 第16-17页 |
1.2 AS-ODN和siRNA作为治疗药物所遇到的生物屏障及传递系统 | 第17-20页 |
1.2.1 AS-ODN和siRNA作为治疗药物所遇到的问题 | 第17页 |
1.2.2 AS-ODN和siRNA作为治疗药物的传递系统 | 第17-20页 |
1.3 基于聚乙烯亚胺的非病毒基因载体 | 第20页 |
1.4 立题依据及研究思路 | 第20-22页 |
第2章 聚乙烯亚胺-油胺聚合物(PEI-SS-OA)的合成及POLP的建立 | 第22-36页 |
2.1 仪器与试剂 | 第22-23页 |
2.1.1 仪器 | 第22-23页 |
2.1.2 试剂与材料 | 第23页 |
2.1.3 细胞株 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-27页 |
2.2.1 PEI-SS-OA聚合物的合成 | 第23-24页 |
2.2.2 POLP载药系统的建立 | 第24页 |
2.2.3 POLP载药系统的性质考察 | 第24-25页 |
2.2.4 不同制备工艺对POLP载药系统的影响 | 第25-26页 |
2.2.5 POLP载药系统稳定性研究 | 第26页 |
2.2.6 统计学分析 | 第26-27页 |
2.3 结果与讨论 | 第27-34页 |
2.3.1 POLP载药系统缓冲容量的测定 | 第27页 |
2.3.2 各种介质对POLP系统粒径的影响 | 第27-28页 |
2.3.3 不同PH值的介质对POLP粒径的影响 | 第28-29页 |
2.3.4 不同离子强度的介质对POLP载药系统粒径的影响 | 第29页 |
2.3.5 PEI-SS-OA注入量对POLP载药系统粒径和zeta电位的影响 | 第29-31页 |
2.3.6 POLP载药系统细胞毒性的考察 | 第31-32页 |
2.3.7 POLP载药系统稳定性的考察 | 第32-34页 |
2.4 本章小结 | 第34-36页 |
第3章 POLP传递siRNA系统的建立和评价 | 第36-52页 |
3.1 仪器与材料 | 第36-37页 |
3.1.1 仪器 | 第36页 |
3.1.2 试剂与材料 | 第36-37页 |
3.1.3 细胞株 | 第37页 |
3.2 实验方法 | 第37-41页 |
3.2.1 POLP传递siRNA系统的建立和优化 | 第37-38页 |
3.2.2 siRNA传递系统的性质考察 | 第38页 |
3.2.3 体外细胞评价实验 | 第38-41页 |
3.2.4 统计学分析 | 第41页 |
3.3 实验结果与讨论 | 第41-49页 |
3.3.1 不同N/P对siRNA-POLP粒径的影响 | 第41-42页 |
3.3.2 不同N/P对siRNA-POLP的zeta电位的影响 | 第42页 |
3.3.3 琼脂糖凝胶电泳考察POLP与siRNA的结合度 | 第42-43页 |
3.3.4 流式细胞仪测定转染效率 | 第43-45页 |
3.3.5 激光共聚焦显微镜观察转染效果 | 第45-47页 |
3.3.6 Western-blot测定survivin蛋白含量 | 第47-48页 |
3.3.7 siRNA传递系统入胞机制的研究 | 第48-49页 |
3.4 本章小结 | 第49-52页 |
第4章 POLP传递LOR-2501系统的建立和评价 | 第52-65页 |
4.1 仪器与材料 | 第52-53页 |
4.1.1 仪器 | 第52-53页 |
4.1.2 试剂与材料 | 第53页 |
4.1.3 细胞株 | 第53页 |
4.2 试验方法 | 第53-57页 |
4.2.1 PEI-SS-OA脂质体传递LOR-2501系统的建立和优化 | 第53-54页 |
4.2.2 LOR-2501传递系统的性质考察 | 第54页 |
4.2.3 体外细胞评价实验 | 第54-56页 |
4.2.4 统计学分析 | 第56-57页 |
4.3 实验结果与讨论 | 第57-63页 |
4.3.1 不同N/P对LOR-POLP体系粒径的影响 | 第57页 |
4.3.2 不同N/P对LOR-POLP体系zeta电位的影响 | 第57-58页 |
4.3.3 琼脂糖凝胶电泳考察POLP与LOR-2501的结合度 | 第58-59页 |
4.3.4 流式细胞仪测定转染效率 | 第59-60页 |
4.3.5 激光共聚焦显微镜观察转染效果 | 第60-62页 |
4.3.6 Western-blot测定R1蛋白含量 | 第62-63页 |
4.4 本章小结 | 第63-65页 |
第5章 结论与展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-69页 |
作者简介及科研成果 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |