| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-22页 |
| 1.1 血栓形成及血栓栓塞性疾病的治疗 | 第11-13页 |
| 1.1.1 血栓的形成机制及溶栓机制 | 第11-12页 |
| 1.1.2 溶栓药物的发展与现状 | 第12-13页 |
| 1.2 丝氨酸蛋白酶研究现状 | 第13-16页 |
| 1.2.1 丝氨酸蛋白酶与疾病 | 第14页 |
| 1.2.2 豆豉纤溶酶的研究现状 | 第14-16页 |
| 1.3 微生物基因组测序及注释研究概况 | 第16-17页 |
| 1.3.1 微生物基因组学研究工具与方法 | 第17页 |
| 1.4 微生物蛋白质组学的研究方法 | 第17-20页 |
| 1.4.1 双向电泳技术 | 第17-18页 |
| 1.4.2 ESI-LC-MS/MS 质谱法 | 第18页 |
| 1.4.3 MALDI-TOF-TOF 质谱法 | 第18页 |
| 1.4.4 iTRAQ | 第18-20页 |
| 1.5 本课题的选题背景及研究内容 | 第20-22页 |
| 1.5.1 本课题的选题背景与立题依据 | 第20页 |
| 1.5.2 本课题研究的主要内容 | 第20-22页 |
| 第二章 解淀粉芽孢杆菌 DC-12 基因组测序补洞及丝氨酸蛋白酶基因分析 | 第22-52页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第22页 |
| 2.1.2 试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 培养基 | 第22页 |
| 2.1.4 试剂的配制 | 第22-24页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-30页 |
| 2.2.1 解淀粉芽孢杆菌 DC-12 生长曲线测定 | 第24页 |
| 2.2.2 基因组测序 | 第24-25页 |
| 2.2.3 PCR 法补基因组测序结果内洞 | 第25-30页 |
| 2.2.4 解淀粉芽孢杆菌 DC-12 基因组分析 | 第30页 |
| 2.3 结果 | 第30-50页 |
| 2.3.1 解淀粉芽孢杆菌 DC-12 生长曲线 | 第30-31页 |
| 2.3.2 碱裂解法提取基因组及基因组测序结果 | 第31-38页 |
| 2.3.3 内洞未知序列 PCR 补内洞结果 | 第38-46页 |
| 2.3.4 Bacillus amyloliquefaciens DC-12 丝氨酸蛋白酶基因分析结果 | 第46-50页 |
| 2.4 讨论 | 第50-51页 |
| 2.5 本章小结 | 第51-52页 |
| 第三章 解淀粉芽孢杆菌 DC-12 的酶活积累曲线测定及产酶分析 | 第52-59页 |
| 3.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第52页 |
| 3.1.2 试剂 | 第52页 |
| 3.1.3 培养基 | 第52页 |
| 3.1.4 试剂的配制 | 第52-53页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第53页 |
| 3.2 实验方法 | 第53-55页 |
| 3.2.1 纤维蛋白平板的制作 | 第53-54页 |
| 3.2.2 尿激酶酶活标准曲线测定 | 第54页 |
| 3.2.3 豆豉纤溶酶酶活积累曲线测定 | 第54页 |
| 3.2.4 豆豉纤溶酶产酶时间点及累积酶活最高发酵时间点 | 第54-55页 |
| 3.3 实验结果 | 第55-57页 |
| 3.3.1 尿激酶标准曲线 | 第55页 |
| 3.3.2 豆豉纤溶酶酶活累积曲线 | 第55-56页 |
| 3.3.3 产酶初和酶活累积最高时间点的确定 | 第56-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-58页 |
| 3.5 本章小结 | 第58-59页 |
| 第四章 解淀粉芽孢杆菌 DC-12 定量蛋白质组学分析 | 第59-82页 |
| 4.1 实验材料 | 第59-62页 |
| 4.1.1 菌株 | 第59页 |
| 4.1.2 试剂 | 第59页 |
| 4.1.3 培养基 | 第59页 |
| 4.1.4 常用试剂配制方法 | 第59-61页 |
| 4.1.5 仪器设备 | 第61-62页 |
| 4.2 试验方法 | 第62-67页 |
| 4.2.1 解淀粉芽孢杆菌 DC-12 各部分蛋白提取 | 第62-64页 |
| 4.2.2 SDS-PAGE 分析 | 第64-65页 |
| 4.2.3 细胞各部分蛋白浓度测定 | 第65-66页 |
| 4.2.4 iTRAQ 定量蛋白质组学分析 | 第66-67页 |
| 4.3 实验结果 | 第67-80页 |
| 4.3.1 解淀粉芽孢杆菌 DC12 各部分蛋白 SDS-PAGE 电泳 | 第67-68页 |
| 4.3.2 解淀粉芽孢杆菌 DC-12 各部分蛋白浓度 | 第68-70页 |
| 4.3.3 iTRAQ 定量蛋白质组学分析 | 第70-80页 |
| 4.4 讨论 | 第80-81页 |
| 4.5 本章小结 | 第81-82页 |
| 结论与展望 | 第82-84页 |
| 结论 | 第82页 |
| 展望 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-92页 |
| 附录 1 | 第92-94页 |
| 附录 2 | 第94-99页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 附件 | 第101页 |
