摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第13-26页 |
1.1 植物叶片衰老机制 | 第13-20页 |
1.1.1 植物叶片衰老转录水平的调控 | 第15-17页 |
1.1.2 染色质水平的调控 | 第17-18页 |
1.1.3 转录后水平的调控 | 第18页 |
1.1.4 翻译水平的调控 | 第18-19页 |
1.1.5 翻译后水平的调控 | 第19-20页 |
1.1.6 小结 | 第20页 |
1.2 NO与植物叶片衰老 | 第20-23页 |
1.2.1 NO的性质和产生途径 | 第20-22页 |
1.2.2 NO与叶片衰老的关系 | 第22-23页 |
1.3 植物UGT家族基因与叶片衰老 | 第23页 |
1.4 棉花中衰老研究相关报道 | 第23-25页 |
1.5 本研究的目的意义 | 第25-26页 |
第二章 叶片衰老过程中NO的含量变化 | 第26-32页 |
2.1 材料与方法 | 第26页 |
2.1.1 实验材料 | 第26页 |
2.1.2 实验设计 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-28页 |
2.2.1 叶绿素含量的测定 | 第26-27页 |
2.2.2 可溶性蛋白含量的测定 | 第27页 |
2.2.3 丙二醛(MDA)含量的测定 | 第27-28页 |
2.2.4 NO含量的测定 | 第28页 |
2.3 结果与分析 | 第28-30页 |
2.3.1 叶片衰老特性的鉴定 | 第28页 |
2.3.2 叶片发育过程中NO含量的变化 | 第28-30页 |
2.4 讨论 | 第30-32页 |
第三章 NO合成和降解基因在棉花中的遗传转化 | 第32-41页 |
3.1 材料和方法 | 第32页 |
3.1.1 实验材料 | 第32页 |
3.1.2 实验设计 | 第32页 |
3.2 实验方法 | 第32-37页 |
3.2.1 棉花叶片总RNA的提取和检测 | 第32-33页 |
3.2.2 cDNA第一链的合成 | 第33-34页 |
3.2.3 GhNR1、nNOS和NOD的克隆 | 第34-35页 |
3.2.4 表达载体的构建 | 第35页 |
3.2.5 重组质粒转化农杆菌 | 第35-36页 |
3.2.6 棉花的遗传转化 | 第36-37页 |
3.3 结果与分析 | 第37-38页 |
3.3.1 GhNR1、nNOS和NOD基因的克隆 | 第37-38页 |
3.3.2 GhNR1、nNOS和NOD基因在棉花中的遗传转化 | 第38页 |
3.3.3 再生苗阳性株的鉴定 | 第38页 |
3.3.4 阳性株的移植与生长 | 第38页 |
3.4 讨论 | 第38-41页 |
第四章 棉花叶片响应NO的转录组分析 | 第41-52页 |
4.1 材料和方法 | 第41页 |
4.1.1 实验材料 | 第41页 |
4.1.2 实验设计 | 第41页 |
4.2 实验方法 | 第41-45页 |
4.2.1 棉花叶片总RNA的提取和检测 | 第41-42页 |
4.2.2 数字表达谱测序和分析 | 第42页 |
4.2.3 荧光定量PCR验证DGE的可靠性 | 第42-45页 |
4.3 结果与分析 | 第45-48页 |
4.3.1 RNA的提取及质量检测 | 第45页 |
4.3.2 DGE测序结果统计 | 第45-46页 |
4.3.3 DGE基因匹配 | 第46-47页 |
4.3.4 差异基因筛选 | 第47页 |
4.3.5 DGE可靠性的验证 | 第47-48页 |
4.3.6 差异基因的GO功能分类 | 第48页 |
4.4 讨论 | 第48-52页 |
第五章 棉花叶片响应NO的蛋白组分析 | 第52-61页 |
5.1 材料和方法 | 第52页 |
5.1.1 实验材料 | 第52页 |
5.1.2 实验设计 | 第52页 |
5.2 实验方法 | 第52-53页 |
5.2.1 iTRAQ测序流程 | 第52页 |
5.2.2 信息分析流程 | 第52-53页 |
5.3 结果与分析 | 第53-59页 |
5.3.1 总蛋白定量和检测 | 第53页 |
5.3.2 蛋白质鉴定 | 第53-54页 |
5.3.3 蛋白质的GO功能分类 | 第54-56页 |
5.3.4 蛋白质的COG功能分类 | 第56-57页 |
5.3.5 差异蛋白的筛选 | 第57-58页 |
5.3.6 差异蛋白的PATHWAY富集 | 第58-59页 |
5.3.7 蛋白组与转录组的相关性分析 | 第59页 |
5.4 讨论 | 第59-61页 |
第六章 棉花UGT基因家族分析 | 第61-72页 |
6.1 实验方法 | 第61-63页 |
6.1.1 棉花UGT家族基因的鉴定 | 第61-62页 |
6.1.2 系统发育关系分析 | 第62页 |
6.1.3 染色体定位和同源关系分析 | 第62页 |
6.1.4 GC含量分析 | 第62页 |
6.1.5 内含子位置分析 | 第62页 |
6.1.6 陆地棉UGT基因表达分析 | 第62-63页 |
6.2 结果与分析 | 第63-68页 |
6.2.1 UGT家族基因的鉴定 | 第63页 |
6.2.2 UGT家族基因的系统发育关系分析 | 第63-64页 |
6.2.3 UGT家族基因的染色体定位 | 第64页 |
6.2.4 UGT家族中同源基因的鉴定 | 第64-65页 |
6.2.5 不同物种间UGT基因家族的GC含量分析 | 第65-66页 |
6.2.6 外显子/内含子位置 | 第66-67页 |
6.2.7 叶片衰老过程中GhUGTs基因的表达谱分析 | 第67页 |
6.2.8 纤维起始阶段GhUGTs基因的表达谱分析 | 第67-68页 |
6.3 讨论 | 第68-72页 |
第七章 GhUGT85O1 基因的克隆及功能鉴定 | 第72-82页 |
7.1 材料和方法 | 第72-73页 |
7.1.1 实验材料 | 第72页 |
7.1.2 实验设计 | 第72-73页 |
7.2 实验方法 | 第73-74页 |
7.2.1 核酸提取及cDNA的合成 | 第73页 |
7.2.2 基因克隆及序列分析 | 第73-74页 |
7.2.3 qRT-PCR | 第74页 |
7.2.4 表达载体的构建和拟南芥转化 | 第74页 |
7.2.5 叶绿素含量的测定 | 第74页 |
7.2.6 启动子缺失实验和瞬时表达 | 第74页 |
7.3 结果与分析 | 第74-80页 |
7.3.1 GhUGT85O1 全长基因的克隆及序列分析 | 第74-76页 |
7.3.2 GhUGT85O1 在棉花中的表达模式分析 | 第76-79页 |
7.3.3 GhUGT85O1 在拟南芥中表达情况 | 第79-80页 |
7.3.4 启动子缺失实验 | 第80页 |
7.4 讨论 | 第80-82页 |
第八章 结论与展望 | 第82-84页 |
8.1 结论 | 第82-83页 |
8.2 展望 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-94页 |
附录 | 第94-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
作者简介 | 第112页 |