| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 插图和附表清单 | 第11-13页 |
| 缩略词 | 第13-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-30页 |
| 1.1 甲醛的危害性以及防治措施 | 第14-15页 |
| 1.1.1 甲醛的性质及其危害性 | 第14页 |
| 1.1.2 甲醛危害性的防治措施 | 第14-15页 |
| 1.2 甲醛毒性机理及其胁迫应答基因 | 第15-16页 |
| 1.2.1 甲醛毒性机理 | 第15-16页 |
| 1.2.2 甲醛胁迫应答基因 | 第16页 |
| 1.3 热激因子的概述 | 第16-17页 |
| 1.4 植物热激因子的结构和分类 | 第17-19页 |
| 1.4.1 植物热激因子的结构和分类 | 第17-18页 |
| 1.4.2 植物热激因子的结构域的特征 | 第18-19页 |
| 1.5 热激因子的调节作用 | 第19-23页 |
| 1.5.1 HSF对HSP的调节机制 | 第19-20页 |
| 1.5.2 HSF的磷酸化调节 | 第20-21页 |
| 1.5.3 HSF对非HSP的调节机制 | 第21-22页 |
| 1.5.4 HSF参与热激和氧化,通路是否有交叉性 | 第22-23页 |
| 1.6 A类热激因子的研究进展 | 第23-26页 |
| 1.6.1 A类热激因子的表达与耐热性的获得 | 第23-25页 |
| 1.6.2 HSF对转录因子的调控产生对胁迫的耐受性 | 第25页 |
| 1.6.3 A类热激因子在种子发育中的作用 | 第25-26页 |
| 1.6.4 拟南芥AtHSFA6a的定位研究 | 第26页 |
| 1.6.5 A类热激因子DNA结合位点的研究 | 第26页 |
| 1.7 B类、C类热激因子及HSF1的研究进展 | 第26-27页 |
| 1.8 HSFs分子水平研究其协调作用 | 第27-28页 |
| 1.9 本研究的主要内容和意义 | 第28-30页 |
| 1.9.1 本研究的主要内容 | 第28-29页 |
| 1.9.2 本研究的意义 | 第29-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-48页 |
| 2.1 材料 | 第30-34页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第30-31页 |
| 2.1.2 植物材料 | 第31页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第31页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第31页 |
| 2.1.5 主要培养基配方 | 第31-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-48页 |
| 2.2.1 引物合成 | 第34页 |
| 2.2.2 引物稀释 | 第34页 |
| 2.2.3 分子克隆技术 | 第34-41页 |
| 2.2.4 植物遗传转化(农杆菌介导法) | 第41-42页 |
| 2.2.5 目的蛋白重组菌的构建表达与蛋白纯化方法 | 第42-45页 |
| 2.2.6 甲醛胁迫下HSFA1d的表达谱分析 | 第45-46页 |
| 2.2.7 酿酒酵母感受态细胞的制备及其电转化表达载体到酿酒酵母 | 第46页 |
| 2.2.8 植物吸收液体甲醛检测 | 第46-47页 |
| 2.2.9 植物对甲醛的吸收与抗性分析 | 第47-48页 |
| 第三章 结果与分析 | 第48-72页 |
| 3.1 甲醛胁迫下拟南芥HSFA1d的表达谱分析 | 第48-49页 |
| 3.2 △C-AtHSFA1d重组蛋白的制备与抗体制备 | 第49-58页 |
| 3.2.1 pET32a(+)-△C-AtHSFA1d原核表达载体的构建 | 第49-54页 |
| 3.2.2 △C-AtHSFA1d重组蛋白的原核表达 | 第54-57页 |
| 3.2.3 △C-AtHSFA1d重组蛋白抗体制备的效价结果 | 第57-58页 |
| 3.3 AtHSFA1d基因在酵母中的表达与功能分析 | 第58-63页 |
| 3.3.1 pYES3-AtHSFA1d酵母表达载体的构建流程 | 第58页 |
| 3.3.2 pYES3-AtHSFA1d表达载体的构建 | 第58-61页 |
| 3.3.3 良酒酵母遗传转化 | 第61-62页 |
| 3.3.4 pYES3-AtHSFA1d在酿酒酵母的功能鉴定 | 第62-63页 |
| 3.4 AtHSFA1d基因在转基因烟草中的过量表达与功能分析 | 第63-72页 |
| 3.4.1 pK_2GW_7-AtHSFA1d表达载体的构建策略 | 第63-64页 |
| 3.4.2 pK_2GW_7-AtHSFA1d表达载体的构建 | 第64-66页 |
| 3.4.3 烟草遗传转化 | 第66-67页 |
| 3.4.4 PCR检测目的基因在烟草中的整合情况 | 第67页 |
| 3.4.5 目的基因的转录水平检测 | 第67-68页 |
| 3.4.6 目的基因的蛋白表达水平检测 | 第68页 |
| 3.4.7 转基因烟草的甲醛吸收速率检测 | 第68-69页 |
| 3.4.8 转基因烟草对甲醛的吸收与抗性分析 | 第69-72页 |
| 第四章 讨论 | 第72-76页 |
| 4.1 热激因子AtHSFA1d的作用探讨 | 第72-73页 |
| 4.2 目的蛋白在宿主菌的表达情况分析 | 第73-74页 |
| 4.3 转基因植物表达水平高低的讨论 | 第74-76页 |
| 第五章 总结与展望 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-88页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文及获得奖项 | 第88页 |
