耐底物腈水合酶高产菌选育及其产酶条件优化
| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 1 绪论 | 第10-23页 |
| 1.1 腈水合酶概述 | 第10-16页 |
| 1.1.1 腈水合酶简介 | 第10-12页 |
| 1.1.2 腈水合酶产生菌 | 第12-14页 |
| 1.1.3 腈水合酶的用途 | 第14-16页 |
| 1.2 诱变育种技术 | 第16-18页 |
| 1.2.1 热诱变育种 | 第16页 |
| 1.2.2 紫外诱变育种 | 第16-17页 |
| 1.2.3 复合诱变育种 | 第17-18页 |
| 1.3 原生质体融合技术 | 第18-20页 |
| 1.3.1 原生质体融合技术及其优点 | 第18-19页 |
| 1.3.2 融合子检出的方法 | 第19页 |
| 1.3.3 原生质体融合技术的应用 | 第19-20页 |
| 1.4 本研究的意义、目的及内容 | 第20-22页 |
| 1.4.1 目的及意义 | 第20-21页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 1.5 研究的技术路线 | 第22-23页 |
| 2 诺卡氏菌的自然分离和双重诱变 | 第23-30页 |
| 2.1 材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 菌株 | 第23页 |
| 2.1.2 培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第24页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-27页 |
| 2.2.1 自然分离初筛 | 第25页 |
| 2.2.2 自然分离复筛 | 第25页 |
| 2.2.3 热诱变 | 第25-26页 |
| 2.2.4 紫外诱变 | 第26页 |
| 2.2.5 致死率和正负突变率计算 | 第26页 |
| 2.2.6 突变株遗传稳定性实验 | 第26页 |
| 2.2.7 腈水合酶活力测定 | 第26-27页 |
| 2.2.8 菌种保藏 | 第27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-29页 |
| 2.3.1 自然分离的结果 | 第27-29页 |
| 2.3.3 诱变摇瓶筛选结果 | 第29页 |
| 2.3.4 突变株遗传稳定性实验 | 第29页 |
| 2.4 小结 | 第29-30页 |
| 3 NK10 和 NK8 双亲本抗药性标记的筛选 | 第30-34页 |
| 3.1 材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 菌种 | 第30页 |
| 3.1.2 培养基 | 第30页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第30-31页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-32页 |
| 3.2.1 双亲本抗药性标记定性实验 | 第31-32页 |
| 3.2.2 双亲本抗药浓度实验 | 第32页 |
| 3.3 结果与分析 | 第32-33页 |
| 3.3.1 双亲本抗药性标记定性实验 | 第32-33页 |
| 3.3.2 双亲本抗药浓度实验 | 第33页 |
| 3.4 小结 | 第33-34页 |
| 4 原生质体融合及融合子的检出 | 第34-43页 |
| 4.1 材料 | 第34-37页 |
| 4.1.1 菌种 | 第34页 |
| 4.1.2 培养基 | 第34-35页 |
| 4.1.3 溶液 | 第35-36页 |
| 4.1.4 主要试剂 | 第36页 |
| 4.1.5 主要仪器及设备 | 第36-37页 |
| 4.2 实验方法 | 第37-39页 |
| 4.2.1 原生质体制备及融合 | 第37-38页 |
| 4.2.2 酶解时间对原生质体形成率的影响 | 第38页 |
| 4.2.3 融合子检出 | 第38-39页 |
| 4.3 结果与分析 | 第39-42页 |
| 4.3.1 不同酶解时间原生质体形成率 | 第39-41页 |
| 4.3.4 融合子的再生及检出 | 第41-42页 |
| 4.4 小结 | 第42-43页 |
| 5 融合子产酶条件优化 | 第43-58页 |
| 5.1 材料 | 第43-44页 |
| 5.1.1 菌种 | 第43页 |
| 5.1.2 培养基 | 第43页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第43-44页 |
| 5.1.4 主要仪器及设备 | 第44页 |
| 5.2 实验方法 | 第44-46页 |
| 5.2.1 融合子发酵条件的优化实验 | 第44页 |
| 5.2.2 融合子发酵培养基的优化实验 | 第44-45页 |
| 5.2.3 统计学数据及软件 | 第45-46页 |
| 5.2.4 最优发酵条件验证及耐受性检验试验 | 第46页 |
| 5.3 结果与分析 | 第46-57页 |
| 5.3.1 融合子发酵条件的优选实验 | 第46-49页 |
| 5.3.2 融合子发酵培养基的优选实验 | 第49-57页 |
| 5.3.3 最优产酶条件及耐受性验证结果 | 第57页 |
| 5.4 小结 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 在读期间公开发表论文（著）及科研情况 | 第64页 |
