| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第10-16页 |
| 縮略词表 | 第16-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-36页 |
| 1.1 MDR发生的原因 | 第18-21页 |
| 1.1.1 药物进出细胞异常 | 第18-19页 |
| 1.1.2 细胞凋亡途径的异常 | 第19页 |
| 1.1.3 DNA修复功能的异常 | 第19页 |
| 1.1.4 谷胱甘肽-s-转移酶(Glutathione S-transferease,GSTs) | 第19-20页 |
| 1.1.5 DNA拓扑异构酶改变引起的耐药性 | 第20-21页 |
| 1.1.6 肿瘤干细胞的耐药性和MDR的发生 | 第21页 |
| 1.2 逆转肿瘤MDR的策略 | 第21-26页 |
| 1.2.1 药物代谢酶介导的MDR及其逆转策略 | 第22页 |
| 1.2.2 凋亡调控基因介导的机制及逆转 | 第22页 |
| 1.2.3 基于药物转运异常产生的MDR的逆转 | 第22-26页 |
| 1.2.3.1 抑制ABC转运蛋白的转运功能而逆转耐药性 | 第23-24页 |
| 1.2.3.2 调节ABC药物转运蛋白的表达而逆转耐药性 | 第24页 |
| 1.2.3.3 通过影响ABC药物转运蛋白的翻译后修饰或细胞内转运而逆转MDR | 第24-25页 |
| 1.2.3.4 通过改变细胞膜微环境促进药物的吸收或干扰ABC药物转运蛋白的而逆转耐药性 | 第25页 |
| 1.2.3.5 通过microRNA调控p-gp的表达而逆转MDR | 第25-26页 |
| 1.2.3.6 多重逆转策略联合使用促进耐药性 | 第26页 |
| 1.3 以p-gp为靶标的MDR逆转剂的研究进展 | 第26-30页 |
| 1.3.1 p-gp的结构与功能 | 第27页 |
| 1.3.2 以P-gp为靶标的MDR逆转剂的筛选及研究模型 | 第27-30页 |
| 1.3.2.1 细胞水平的筛选模型 | 第28-29页 |
| 1.3.2.2 膜蛋白水平的筛选模型 | 第29页 |
| 1.3.2.3 p-gP抑制剂的在体研究模型 | 第29-30页 |
| 1.4 近40年来以p-gP为靶标的MDR逆转剂的研究进展 | 第30-34页 |
| 1.4.1 小分子p-gp抑制剂研究 | 第30页 |
| 1.4.2 天然药物中的P-gp抑制剂 | 第30-33页 |
| 1.4.2.1 通过抑制P-gp活性而逆转MDR的植物活性组分 | 第31-32页 |
| 1.4.2.2 非P-gp依赖的MDR逆转植物活性组分 | 第32-33页 |
| 1.4.3 其他的P-gp抑制剂研究 | 第33-34页 |
| 1.5 本课题的研究目标及意义 | 第34-36页 |
| 第二章 植物药中MDR逆转剂的筛选 | 第36-52页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第37-39页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第37-38页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第38-39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-42页 |
| 2.2.1 溶液的配制 | 第39-40页 |
| 2.2.2 中药提取物的制备 | 第40页 |
| 2.2.3 罗丹明-123蓄积实验 | 第40页 |
| 2.2.4 活性植物提取物功能的初步验证 | 第40-42页 |
| 2.2.4.1 活性植物提取物的细胞毒性试验(MTT法) | 第40-41页 |
| 2.2.4.2 活性植物提取物对Caco-2细胞内罗丹明-123蓄积的影响 | 第41页 |
| 2.2.4.3 活性植物提取物与ADM联用后对细胞增殖的影响 | 第41页 |
| 2.2.4.4 活性提取物对细胞内ADM蓄积的影响 | 第41-42页 |
| 2.2.5 统计分析 | 第42页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第42-50页 |
| 2.3.1 植物药提取物制备 | 第42-43页 |
| 2.3.2 Rho-123蓄积实验 | 第43-45页 |
| 2.3.3 活性提取物的功能验证 | 第45-50页 |
| 2.3.3.1 细胞毒性检测 | 第45页 |
| 2.3.3.2 活性提取物对细胞内Rho-123蓄积的FCM检测 | 第45-46页 |
| 2.3.3.3 活性提取物与ADM联合作用后对细胞增殖的影响 | 第46-47页 |
| 2.3.3.4 活性提取物细胞内ADM蓄积的影响 | 第47-50页 |
| 2.4 结论 | 第50-52页 |
| 第三章 灵芝提取物逆转MDR活性部位的追踪及逆转机制研究 | 第52-82页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第53-54页 |
| 3.1.1 细胞系 | 第53页 |
| 3.1.2 材料与试剂 | 第53-54页 |
| 3.1.3 主要仪器和设备 | 第54页 |
| 3.2 实验方法 | 第54-63页 |
| 3.2.1 溶液配制 | 第54页 |
| 3.2.2 灵芝总提物的制备 | 第54页 |
| 3.2.3 灵芝不同化学部位的制备 | 第54-55页 |
| 3.2.4 灵芝不同提取部位对化学部位Caco-2细胞中Rho-123的蓄积的检测 | 第55-56页 |
| 3.2.5 灵芝活性提取部位逆转MDR作用的初步验证 | 第56-57页 |
| 3.2.5.1 细胞毒性检测 | 第56页 |
| 3.2.5.2 灵芝活性提取部位与ADM联用后对细胞增殖的影响 | 第56页 |
| 3.2.5.3 细胞内Rho-123和ADM蓄积的FCM检测 | 第56-57页 |
| 3.2.6 灵芝活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞耐药性的逆转作用 | 第57-61页 |
| 3.2.6.1 SGC-7901/ADR耐药细胞耐药性的检测 | 第57-58页 |
| 3.2.6.2 灵芝活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞的细胞毒检测 | 第58页 |
| 3.2.6.3 灵芝活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞耐药逆转作用的检测 | 第58页 |
| 3.2.6.4 灵芝活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞内阿霉素蓄积的影响 | 第58页 |
| 3.2.6.5 灵芝活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞MDR1基因的转录的影响 | 第58-60页 |
| 3.2.6.6 灵芝活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞p-gp蛋白表达的影响 | 第60-61页 |
| 3.2.7 灵芝活性提取部位对MCF/ADM耐药细胞耐药性的逆转作用 | 第61-63页 |
| 3.2.7.1 MCF/ADM细胞耐药性的检测 | 第61页 |
| 3.2.7.2 灵芝活性提取部位对MCF-7,MCF/ADM细胞的细胞毒检测 | 第61-62页 |
| 3.2.7.3 灵芝活性提取部位对MCF/ADM细胞耐药逆转作用的检测 | 第62页 |
| 3.2.7.4 灵芝活性提取部位对MCF/ADM细胞内阿霉素蓄积的影响 | 第62页 |
| 3.2.7.5 灵芝活性提取部位对MCF/ADM细胞MDR1基因的转录的影响 | 第62页 |
| 3.2.7.6 灵芝活性提取部位对MCF/ADM细胞p-gp蛋白表达的影响 | 第62-63页 |
| 3.2.8 数据处理方法 | 第63页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第63-80页 |
| 3.3.1 灵芝不同提取部位的制备 | 第63-64页 |
| 3.3.2 灵芝不同提取部位对Caco-2细胞的细胞毒性检测 | 第64-65页 |
| 3.3.3 灵芝不同部位对Caco-2细胞内Rho-123蓄积的影响 | 第65页 |
| 3.3.4 灵芝不同部位与ADM联用后对细胞增殖的影响 | 第65页 |
| 3.3.5 流式细胞仪检测细胞内Rho-123、ADM蓄积实验 | 第65-70页 |
| 3.3.6 灵芝活性提取部位对SGC-7901/ADR耐药细胞耐药性的逆转作用 | 第70-75页 |
| 3.3.6.1 SGC-7901/ADR耐药细胞耐药性的检测 | 第70-71页 |
| 3.3.6.2 灵芝活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞的细胞毒检测 | 第71页 |
| 3.3.6.3 灵芝活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞耐药逆转作用的检测 | 第71-72页 |
| 3.3.6.4 灵芝活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞内阿霉素蓄积的影响 | 第72-73页 |
| 3.3.6.5 灵芝活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞MDR1基因的转录的影响 | 第73页 |
| 3.3.6.6 灵芝活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞p-gp蛋白表达的影响 | 第73-75页 |
| 3.3.7 灵芝活性提取部位对MCF/ADM耐药细胞耐药性的逆转作用 | 第75-80页 |
| 3.3.7.1 MCF/ADM细胞耐药性的检测 | 第75-76页 |
| 3.3.7.2 灵芝活性提取部位对MCF-7,MCF/ADM细胞的细胞毒检测 | 第76页 |
| 3.3.7.3 灵芝活性提取部位对MCF/ADM细胞耐药逆转作用的检测 | 第76-77页 |
| 3.3.7.4 灵芝活性提取部位对MCF/ADM细胞内阿霉素蓄积的影响 | 第77-78页 |
| 3.3.7.5 灵芝活性提取部位对MCF/ADM细胞MDR1基因的转录的影响 | 第78-79页 |
| 3.3.7.6 灵芝活性提取部位对MCF/ADM细胞p-gp蛋白表达的影响 | 第79-80页 |
| 3.4 结论 | 第80-82页 |
| 第四章 冬凌草提取物逆转MDR活性部位的追踪及相关组分的逆转作用研究 | 第82-106页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第83-84页 |
| 4.1.1 细胞系 | 第83-84页 |
| 4.1.2 材料与试剂 | 第84页 |
| 4.1.3 主要仪器和设备 | 第84页 |
| 4.2 实验方法 | 第84-89页 |
| 4.2.1 溶液配制 | 第84页 |
| 4.2.2 冬凌草总提物的制备 | 第84页 |
| 4.2.3 冬凌草不同化学部位的制备 | 第84-85页 |
| 4.2.4 冬凌草不同提取部位对Caco-2细胞中Rho-123的蓄积的检测 | 第85页 |
| 4.2.5 冬凌草活性提取部位逆转MDR作用的初步验证 | 第85-86页 |
| 4.2.5.1 细胞毒性检测 | 第85-86页 |
| 4.2.5.2 冬凌草活性提取部位与ADM联用后对细胞增殖的影响 | 第86页 |
| 4.2.5.3 细胞内Rho-123和ADM蓄积的FCM检测 | 第86页 |
| 4.2.6 冬凌草活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞耐药性的逆转作用 | 第86-88页 |
| 4.2.6.1 冬凌草活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞的细胞毒检测 | 第86-87页 |
| 4.2.6.2 冬凌草活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞耐药逆转作用的检测 | 第87页 |
| 4.2.6.3 冬凌草活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞内阿霉素蓄积的影响 | 第87页 |
| 4.2.6.4 冬凌草活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞MDR1基因的转录的影响 | 第87页 |
| 4.2.6.5 冬凌草活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞p-gp蛋白表达的影响 | 第87-88页 |
| 4.2.7 冬凌草活性提取部位对MCF-7/ADM耐药细胞耐药性的逆转作用 | 第88-89页 |
| 4.2.7.1 冬凌草活性提取部位对MCF-7,MCF-7/ADM细胞的细胞毒检测 | 第88页 |
| 4.2.7.2 冬凌草活性提取部位对MCF-7/ADM细胞耐药逆转作用的检测 | 第88页 |
| 4.2.7.3 冬凌草活性提取部位对MCF-7/ADM细胞内阿霉素蓄积的影响 | 第88页 |
| 4.2.7.4 冬凌草活性提取部位对MCF-7/ADM细胞MDR1基因的转录的影响 | 第88-89页 |
| 4.2.7.5 冬凌草活性提取部位对MCF-7/ADM细胞p-gp蛋白表达的影响 | 第89页 |
| 4.2.8 数据处理方法 | 第89页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第89-104页 |
| 4.3.1 冬凌草不同提取部位的制备 | 第89-90页 |
| 4.3.2 冬凌草不同提取部位对Caco-2细胞内Rho-123蓄积的影响 | 第90-91页 |
| 4.3.3 冬凌草不同提取部位对Caco-2细胞的细胞毒性检测 | 第91页 |
| 4.3.4 冬凌草不同部位与ADM联用后对细胞增殖的影响 | 第91-92页 |
| 4.3.5 流式细胞仪检测细胞内Rho-123,ADM蓄积实验 | 第92-95页 |
| 4.3.6 冬凌草活性提取部位对SGC-7901/ADR耐药细胞耐药性的逆转作用研究 | 第95-100页 |
| 4.3.6.1 冬凌草活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞的细胞毒检测 | 第95-96页 |
| 4.3.6.2 冬凌草活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞耐药逆转作用的检测 | 第96页 |
| 4.3.6.3 冬凌草活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞内阿霉素蓄积的影响 | 第96-99页 |
| 4.3.6.4 冬凌草活性提取部位对SGC-7901/ADR细胞p-gp蛋白表达的影响 | 第99-100页 |
| 4.3.7 冬凌草活性提取部位对MCF-7/ADM耐药细胞耐药性的逆转作用 | 第100-104页 |
| 4.3.7.1 冬凌草活性提取部位对MCF-7,MCF-7/ADM细胞的细胞毒检测 | 第100-101页 |
| 4.3.7.2 冬凌草活性提取部位对MCF-7/ADM细胞耐药逆转作用的检测 | 第101页 |
| 4.3.7.3 冬凌草活性提取部位对MCF-7/ADM细胞内阿霉素蓄积的影响 | 第101-103页 |
| 4.3.7.4 冬凌草活性提取部位对MCF-7/ADM细胞MDR1基因的转录的影响 | 第103-104页 |
| 4.3.7.5 冬凌草活性提取部位对MCF-7/ADM细胞p-gp蛋白表达的影响 | 第104页 |
| 4.4 结论 | 第104-106页 |
| 总结 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-122页 |
| 致谢 | 第122-124页 |
| 攻读博士学位期间的研究成果 | 第124页 |
