摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-22页 |
1.1 穗发芽的研究进展 | 第11-15页 |
1.1.1 小麦穗发芽的危害 | 第11页 |
1.1.2 影响小麦穗发芽的主要因素 | 第11-15页 |
1.1.2.1 环境因子对穗发芽的影响 | 第12页 |
1.1.2.2 穗部形状和籽粒特性对穗发芽的影响 | 第12-13页 |
1.1.2.3 种子休眠对穗发芽的影响 | 第13-15页 |
1.1.2.3.1 植物激素对种子休眠的影响 | 第13-14页 |
1.1.2.3.2 温度对种子休眠的影响 | 第14-15页 |
1.1.2.3.3 种皮颜色对种子休眠的影响 | 第15页 |
1.1.2.4 与穗发芽相关的基因 | 第15页 |
1.2 小麦遗传转化的研究进展 | 第15-20页 |
1.2.1 基因枪介导的小麦转化 | 第16-17页 |
1.2.2 bar筛选标记基因的研究进展 | 第17-19页 |
1.2.3 PMI筛选标记基因的研究进展 | 第19-20页 |
1.3 RNAi的研究进展 | 第20-21页 |
1.4 研究目的及意义 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-34页 |
2.1 供试材料 | 第22-26页 |
2.1.1 菌株及质粒 | 第22页 |
2.1.2 基因 | 第22页 |
2.1.3 转化受体 | 第22页 |
2.1.4 酶及试剂 | 第22-24页 |
2.1.4.1 制备最小表达框的酶及试剂 | 第22-23页 |
2.1.4.2 小麦基因组DNA和种子RNA提取试剂 | 第23页 |
2.1.4.3 小麦种子内源ABA含量提取试剂 | 第23-24页 |
2.1.5 培养基 | 第24-25页 |
2.1.5.1 制备片段所需的培养基 | 第24页 |
2.1.5.2 小麦组织培养所需的培养基 | 第24-25页 |
2.1.6 引物 | 第25-26页 |
2.2 试验方法 | 第26-34页 |
2.2.1 质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
2.2.2 DNA片段回收 | 第27-28页 |
2.2.3 幼胚的接种和培养 | 第28页 |
2.2.4 愈伤组织的高渗及基因枪轰击 | 第28-29页 |
2.2.5 恢复培养及筛选 | 第29页 |
2.2.6 壮苗、春化及移栽 | 第29页 |
2.2.7 DNA的提取 | 第29-30页 |
2.2.8 PCR扩增 | 第30页 |
2.2.9 T_2代材料种子RNA的提取 | 第30-31页 |
2.2.10 RT-PCR扩增 | 第31页 |
2.2.11 种子的萌发、春化 | 第31页 |
2.2.12 转基因植株种子内源ABA提取 | 第31-32页 |
2.2.13 转基因植株种子内源ABA水平测定 | 第32页 |
2.2.14 转基因植株的种子萌发实验 | 第32页 |
2.2.15 转基因植株的穗发芽实验 | 第32-34页 |
3 结果与分析 | 第34-49页 |
3.1 最小表达框的制备 | 第34-35页 |
3.2 小麦幼胚转化及转基因植株的获得 | 第35页 |
3.3 不同生长环境对小麦遗传转化的影响 | 第35-36页 |
3.4 不同筛选剂对小麦遗传转化的影响 | 第36-38页 |
3.5 转基因小麦的PCR鉴定 | 第38-43页 |
3.5.1 2011年田间小麦转化T_0代PCR鉴定 | 第38-39页 |
3.5.2 2011年田间小麦转化T_1代PCR鉴定 | 第39-40页 |
3.5.3 2011年田间小麦转化T_2代RT-PCR鉴定 | 第40-41页 |
3.5.4 2011年温室小麦转化PCR鉴定 | 第41-42页 |
3.5.5 2012年田间小麦转化PCR鉴定 | 第42-43页 |
3.6 转基因小麦T_3代种子ABA水平测定 | 第43-44页 |
3.7 转基因小麦的种子萌发鉴定 | 第44-45页 |
3.8 转基因小麦的穗发芽鉴定 | 第45-46页 |
3.9 讨论 | 第46-47页 |
3.10 下一步工作计划 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-59页 |
致谢 | 第59页 |