| 符号说明 | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1. 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 嘧菌酯概述 | 第13-15页 |
| 1.1.1 嘧菌酯的结构和理化性质 | 第13页 |
| 1.1.2 嘧菌酯的应用和污染现状 | 第13-15页 |
| 1.1.3 嘧菌酯的生态毒性效应 | 第15页 |
| 1.2 实验指示生物——蚯蚓和斑马鱼 | 第15-16页 |
| 1.3 活性氧自由基(ROS)概述 | 第16-18页 |
| 1.3.1 ROS的产生 | 第16-17页 |
| 1.3.2 ROS的清除 | 第17-18页 |
| 1.3.3 ROS的生物学意义 | 第18页 |
| 1.4 氧化损伤的生物学指标概述 | 第18-20页 |
| 1.4.1 抗氧化酶系(SOD、CAT、POD) | 第18-19页 |
| 1.4.2 解毒酶——谷胱甘肽-S-转移酶(GST) | 第19-20页 |
| 1.4.3 丙二醛(MDA) | 第20页 |
| 1.5 单细胞凝胶电泳(SCGE)概述 | 第20-22页 |
| 1.5.1 DNA损伤及其检测方法 | 第20-22页 |
| 1.5.2 SCGE及其在检测遗传毒性方面的应用 | 第22页 |
| 1.6 本论文研究内容 | 第22-24页 |
| 2. 材料与方法 | 第24-39页 |
| 2.1 药品试剂 | 第24-25页 |
| 2.2 仪器设备 | 第25页 |
| 2.3 供式生物 | 第25-27页 |
| 2.3.1 蚯蚓及染毒方式 | 第25-26页 |
| 2.3.2 斑马鱼及染毒方式 | 第26-27页 |
| 2.4 蚯蚓氧化损伤指标的测定 | 第27-33页 |
| 2.4.1 蛋白含量标准曲线绘制方法及测定 | 第27-28页 |
| 2.4.2 蚯蚓ROS的测定 | 第28-29页 |
| 2.4.2.1 试剂配制 | 第28页 |
| 2.4.2.2 蚯蚓线粒体的制备 | 第28页 |
| 2.4.2.3 蚯蚓线粒体ROS测定 | 第28-29页 |
| 2.4.3 蚯蚓酶液的制备 | 第29页 |
| 2.4.4 蚯蚓SOD活性的测定 | 第29-30页 |
| 2.4.4.1 试剂制备 | 第29页 |
| 2.4.4.2 比活力测定 | 第29-30页 |
| 2.4.4.3 结果与计算 | 第30页 |
| 2.4.5 蚯蚓CAT活性的测定 | 第30-31页 |
| 2.4.5.1 试剂制备 | 第30页 |
| 2.4.5.2 比活力测定 | 第30页 |
| 2.4.5.3 结果与计算 | 第30-31页 |
| 2.4.6 蚯蚓POD活性的测定 | 第31页 |
| 2.4.6.1 试剂制备 | 第31页 |
| 2.4.6.2 比活力测定 | 第31页 |
| 2.4.6.3 结果与计算 | 第31页 |
| 2.4.7 蚯蚓GST活性的测定 | 第31-32页 |
| 2.4.7.1 试剂制备 | 第31-32页 |
| 2.4.7.2 比活力测定 | 第32页 |
| 2.4.7.3 结果与计算 | 第32页 |
| 2.4.8 蚯蚓MDA含量的测定 | 第32-33页 |
| 2.4.8.1 试剂配制 | 第32-33页 |
| 2.4.8.2 MDA测定 | 第33页 |
| 2.5 蚯蚓DNA损伤的测定 | 第33-36页 |
| 2.5.1 试剂配制 | 第33-34页 |
| 2.5.2 蚯蚓体腔细胞悬浮液的制备 | 第34-35页 |
| 2.5.3 单细胞凝胶电泳实验 | 第35-36页 |
| 2.6 斑马鱼氧化损伤指标的测定 | 第36-37页 |
| 2.6.1 斑马鱼ROS的测定 | 第36-37页 |
| 2.6.1.1 试剂配制 | 第36页 |
| 2.6.1.2 斑马鱼肝脏线粒体的制备 | 第36-37页 |
| 2.6.1.3 斑马鱼肝脏线粒体ROS测定 | 第37页 |
| 2.6.2 斑马鱼肝脏酶液的制备 | 第37页 |
| 2.6.3 斑马鱼肝脏SOD活性的测定 | 第37页 |
| 2.6.4 斑马鱼肝脏CAT活性的测定 | 第37页 |
| 2.6.5 斑马鱼GST活性的测定 | 第37页 |
| 2.6.6 斑马鱼肝脏MDA含量的测定 | 第37页 |
| 2.7 斑马鱼DNA损伤的测定 | 第37-38页 |
| 2.7.1 试剂配制 | 第37-38页 |
| 2.7.2 斑马鱼肝脏细胞悬浮液的制备 | 第38页 |
| 2.7.3 单细胞凝胶电泳实验 | 第38页 |
| 2.8 数据处理 | 第38-39页 |
| 3. 结果与分析 | 第39-50页 |
| 3.1 嘧菌酯对蚯蚓的氧化损伤情况 | 第39-43页 |
| 3.1.1 嘧菌酯对蚯蚓ROS含量的影响 | 第39页 |
| 3.1.2 嘧菌酯对蚯蚓SOD活性的影响 | 第39-40页 |
| 3.1.3 嘧菌酯对蚯蚓CAT活性的影响 | 第40-41页 |
| 3.1.4 嘧菌酯对蚯蚓POD活性的影响 | 第41页 |
| 3.1.5 嘧菌酯对蚯蚓GST活性的影响 | 第41-42页 |
| 3.1.6 嘧菌酯对蚯蚓MDA含量的影响 | 第42-43页 |
| 3.2 嘧菌酯对蚯蚓的DNA损伤情况 | 第43-44页 |
| 3.3 嘧菌酯对斑马鱼肝脏的氧化损伤情况 | 第44-47页 |
| 3.3.1 嘧菌酯对斑马鱼肝脏ROS含量的影响 | 第44页 |
| 3.3.2 嘧菌酯对斑马鱼肝脏SOD活性的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.3 嘧菌酯对斑马鱼肝脏CAT活性的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.4 嘧菌酯对斑马鱼肝脏GST活性的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.5 嘧菌酯对斑马鱼肝脏MDA含量的影响 | 第47页 |
| 3.4 嘧菌酯对斑马鱼的肝脏DNA损伤情况 | 第47-50页 |
| 4. 讨论 | 第50-56页 |
| 4.1 嘧菌酯对蚯蚓和斑马鱼肝脏的氧化损伤 | 第50-53页 |
| 4.1.1 嘧菌酯对蚯蚓和斑马鱼肝脏ROS含量和酶活性的影响 | 第50-53页 |
| 4.1.1.1 嘧菌酯对蚯蚓ROS含量和酶活性的影响 | 第50-52页 |
| 4.1.1.2 嘧菌酯对斑马鱼肝脏ROS含量和酶活性的影响 | 第52-53页 |
| 4.1.2 嘧菌酯对蚯蚓和斑马鱼肝脏细胞脂质过氧化的影响 | 第53页 |
| 4.2 嘧菌酯对蚯蚓和斑马鱼肝脏细胞的遗传毒性 | 第53-54页 |
| 4.3 毒性试验中雌雄斑马鱼的性别差异 | 第54-55页 |
| 4.4 各项生物学指标关联性 | 第55-56页 |
| 5. 结论 | 第56-57页 |
| 6. 本论文创新之处 | 第57-58页 |
| 7. 参考文献 | 第58-64页 |
| 8. 致谢 | 第64-65页 |
| 9. 攻读学位期间发表论文 | 第65页 |
