| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 常用词语缩写 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-18页 |
| ·IGFBPS的研究进展 | 第11-14页 |
| ·IGFBPs的概况 | 第11页 |
| ·IGFBPs的结构和功能 | 第11-13页 |
| ·IGFBPs的生物学功能 | 第13-14页 |
| ·IGFBP-1研究进展 | 第14-15页 |
| ·IGFBP-1基因的结构 | 第14-15页 |
| ·IGFBP-1的生物学功能 | 第15页 |
| ·IGFBP-5研究进展 | 第15-16页 |
| ·IGFBP-5基因的结构和表达 | 第15页 |
| ·IGFBP-5的生物学功能 | 第15-16页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
| 2 试验材料与方法 | 第18-27页 |
| ·试验材料 | 第18-20页 |
| ·试验动物 | 第18页 |
| ·仪器与试剂 | 第18-20页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·主要试剂盒与试剂 | 第19页 |
| ·主要试剂配制 | 第19-20页 |
| ·试验方法 | 第20-27页 |
| ·总RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·总RNA质量检测 | 第21页 |
| ·引物设计 | 第21页 |
| ·cDNA第一条链合成 | 第21-22页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第22-23页 |
| ·反应体系 | 第22页 |
| ·反应条件 | 第22-23页 |
| ·PCR产物的胶回收 | 第23页 |
| ·RT-PCR产物克隆 | 第23-25页 |
| ·载体连接 | 第23-24页 |
| ·连接产物的转化 | 第24页 |
| ·扩增子菌液PCR鉴定 | 第24页 |
| ·测序 | 第24页 |
| ·生物信息学分析 | 第24-25页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5基因表达检测 | 第25-27页 |
| ·荧光定量引物设计 | 第25页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第25-26页 |
| ·统计分析 | 第26-27页 |
| 3 试验结果与分析 | 第27-55页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5基因的克隆 | 第27-39页 |
| ·RNA质量 | 第27页 |
| ·重组质粒的构建 | 第27页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第27-28页 |
| ·目的片段的测序结果 | 第28页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5基因生物信息学分析 | 第28-39页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5基因CDS区序列分析 | 第28-29页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5基因CDS序列的碱基组成 | 第29-30页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5基因编码蛋白质的组成、分子量、等电点的分析 | 第30-31页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5基因的系统发育分析 | 第31-33页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5蛋白糖基化位点分析 | 第33-35页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5蛋白疏水性分析 | 第35-36页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5蛋白质跨膜螺旋特征 | 第36-37页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5编码蛋白信号肽分析 | 第37-38页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5蛋白二级结构的预测 | 第38-39页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5基因的表达 | 第39-55页 |
| ·荧光定量引物验证 | 第39-40页 |
| ·Real-time PCR标准曲线的建立 | 第40页 |
| ·荧光定PCR扩增产物的特异性 | 第40-41页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5基因的性别表达差异 | 第41-44页 |
| ·IGFBP-1基因的性别表达差异 | 第41页 |
| ·IGFBP-5基因的性别表达差异 | 第41-44页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5基因的组织表达差异 | 第44-49页 |
| ·IGFBP-1基因的组织表达差异 | 第44页 |
| ·IGFBP-5基因的组织表达差异 | 第44-49页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5基因的发育性变化 | 第49-55页 |
| ·IGFBP-1基因表达的发育性变化 | 第49-50页 |
| ·IGFBP-5基因表达的发育性变化 | 第50-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5基因的序列分析 | 第55-56页 |
| ·克隆DNA序列的分析 | 第55页 |
| ·系统发育分析 | 第55页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5蛋白功能分析 | 第55页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5蛋白翻译后修饰 | 第55-56页 |
| ·IGFBP-1和IGFBP-5基因的表达 | 第56-58页 |
| ·实时定量内参的选用 | 第56-57页 |
| ·IGFBP-1基因相对定量 | 第57页 |
| ·IGFBP-5基因相对定量 | 第57-58页 |
| 5 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66页 |