| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 动物性别决定和分化 | 第12-15页 |
| 1.1.1 遗传物质性别决定 | 第12-13页 |
| 1.1.2 环境因素性别决定 | 第13-14页 |
| 1.1.3 动物的性别分化和性腺发育 | 第14-15页 |
| 1.2 鱼类性别决定和分化的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2.1 鱼类的性别决定类型 | 第15-16页 |
| 1.2.2 鱼类生殖发育的过程 | 第16页 |
| 1.2.3 鱼类性别发育相关基因和信号通路的研究现状 | 第16-18页 |
| 1.3 Wnt4基因与Wnt通路研究概述 | 第18-23页 |
| 1.3.1 Wnt基因的发现和特征 | 第18-19页 |
| 1.3.2 Wnt4基因的研究现状 | 第19-20页 |
| 1.3.3 Wnt信号通路 | 第20-23页 |
| 1.4 转录物组测序技术 | 第23页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-45页 |
| 2.1 材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第25页 |
| 2.1.2 宿主菌株和载体 | 第25页 |
| 2.1.3 主要试剂及仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.1.4 溶液和培养基的配制 | 第26-27页 |
| 2.1.5 克隆用引物 | 第27-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-45页 |
| 2.2.1 总RNA的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.2 反转录反应 | 第29-31页 |
| 2.2.3 黄河鲤Wnt4基因保守区序列的克隆、测序及分析 | 第31-33页 |
| 2.2.4 黄河鲤Wnt4基因非保守区的克隆、测序 | 第33-36页 |
| 2.2.5 黄河鲤Wnt4基因的cDNA全序列拼接 | 第36页 |
| 2.2.6 黄河鲤Wnt4基因序列分析和进化树的构建 | 第36页 |
| 2.2.7 黄河鲤Wnt4基因时空特异性表达模式分析 | 第36-37页 |
| 2.2.8 黄河鲤Wnt4基因的原位杂交 | 第37-42页 |
| 2.2.9 Wnt通路对黄河鲤性腺发育影响的研究 | 第42-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-69页 |
| 3.1 黄河鲤Wnt4基因全长的克隆 | 第45-48页 |
| 3.1.1 黄河鲤卵巢总RNA的提取 | 第45页 |
| 3.1.2 黄河鲤Wnt4保守区域的克隆 | 第45-46页 |
| 3.1.3 黄河鲤Wnt4基因的非翻译区 | 第46-48页 |
| 3.2 黄河鲤中Wnt4基因的生物信息学分析 | 第48-55页 |
| 3.2.1 黄河鲤Wnt4基因的序列分析 | 第48-50页 |
| 3.2.2 黄河鲤Wnt4基因聚类分析 | 第50-54页 |
| 3.2.3 黄河鲤WNT4氨基酸的跨膜特性 | 第54-55页 |
| 3.2.4 黄河鲤WNT4蛋白质结构分析 | 第55页 |
| 3.3 黄河鲤Wnt4基因的表达模式分析 | 第55-58页 |
| 3.3.1 黄河鲤Wnt4基因在发育中个体组织中的表达模式分析 | 第56页 |
| 3.3.2 黄河鲤Wnt4基因在性成熟个体组织中的表达模式分析 | 第56-57页 |
| 3.3.3 黄河鲤Wnt4基因在胚胎和发育早期的表达模式分析 | 第57-58页 |
| 3.4 黄河鲤Wnt4基因的原位杂交结果与分析 | 第58-62页 |
| 3.4.1 黄河鲤Wnt4基因RNA探针的制备 | 第58-60页 |
| 3.4.2 黄河鲤Wnt4基因在性腺组织中的原位杂交结果 | 第60-61页 |
| 3.4.3 黄河鲤Wnt4基因在胚胎和刚孵化时期的原位杂交结果 | 第61-62页 |
| 3.5 黄河鲤经典Wnt信号通路对性别发育的作用研究 | 第62-69页 |
| 3.5.1 经典Wnt信号通路中基因在性腺发育中的表达模式分析 | 第62-64页 |
| 3.5.2 药物抑制后经典Wnt信号通路中基因的表达分析 | 第64-65页 |
| 3.5.3 药物抑制后性别标志基因的表达分析 | 第65-69页 |
| 4 讨论 | 第69-75页 |
| 4.1 黄河鲤Wnt4基因的序列结构和保守性分析 | 第69-70页 |
| 4.2 黄河鲤Wnt4基因的表达模式分析及功能预测 | 第70-71页 |
| 4.3 经典Wnt信号通路对黄河鲤性别分化的作用初探 | 第71-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第85-86页 |
