摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
英文缩写说明 | 第16-17页 |
第1章 绪论 | 第17-30页 |
1.1 miRNAs的研究进展 | 第17-19页 |
1.2 家蚕miRNAs的研究进展 | 第19-26页 |
1.2.1 家蚕mi RNAs的识别与发现 | 第19-20页 |
1.2.2 家蚕mi RNAs的表达和鉴定 | 第20-22页 |
1.2.3 家蚕mi RNAs的靶基因研究 | 第22-25页 |
1.2.4 家蚕mi RNAs的功能研究 | 第25-26页 |
1.3 蚕丝蛋白合成及其基因表达调控的研究进展 | 第26-27页 |
1.4 转录调控因子与miRNAs的共调控网络 | 第27-28页 |
1.5 主要研究内容 | 第28-30页 |
1.5.1 问题的提出 | 第28-29页 |
1.5.2 研究内容和方法 | 第29-30页 |
1.5.3 研究意义 | 第30页 |
第2章 调控家蚕SGF-1 和FMBP-1 的候选miRNA的生物信息学预测 | 第30-46页 |
2.1 材料与方法 | 第30-31页 |
2.1.1 生物信息学预测 | 第30-31页 |
2.1.2 已获得高通量测序结果 | 第31页 |
2.2 结果与分析 | 第31-42页 |
2.2.1 调控BmSGF-1 的候选bmo-miRNAs | 第31-36页 |
2.2.2 候选bmo-miRNAs序列的特征分析 | 第36-37页 |
2.2.3 调控BmFMBP-1 的候选bmo-miRNAs | 第37-42页 |
2.3 讨论 | 第42-45页 |
2.4 本章小结 | 第45-46页 |
第3章 调控BmSGF-1 和BmFMBP-1 的候选bmo-miRNAs的克隆及表达分析 | 第46-64页 |
3.1 材料与方法 | 第46-55页 |
3.1.1 实验材料 | 第46页 |
3.1.2 主要试剂 | 第46-48页 |
3.1.3 实验方法 | 第48-55页 |
3.2 结果与分析 | 第55-62页 |
3.2.1 不同时相家蚕丝腺组织总RNA的提取 | 第55页 |
3.2.2 bmo-mi RNAs成熟体序列的扩增 | 第55页 |
3.2.3 重组质粒pMD18-T-miRNAs的酶切鉴定 | 第55-57页 |
3.2.4 候选bmo-miRNAs的测序结果与序列分析 | 第57页 |
3.2.5 bmo-miR23711(-2)和bmo-miR-2775a的半定量表达分析 | 第57-59页 |
3.2.6 bmo-miR-305*和bmo-miR-1a的定量表达分析 | 第59页 |
3.2.7 bmo-miR-2758和FMBP-1 基因在不同时期不同丝腺组织的表达分析 .. 543.3 讨论 | 第59-62页 |
3.3 讨论 | 第62-63页 |
3.4 本章小结 | 第63-64页 |
第4章 Bmo-miR-305*和bmo-miR-3327*对BmSGF-1 基因转录后调控研究 | 第64-76页 |
4.1 材料与方法 | 第64-67页 |
4.1.1 实验材料 | 第64页 |
4.1.2 主要试剂 | 第64页 |
4.1.3 实验方法 | 第64-67页 |
4.2 结果与分析 | 第67-74页 |
4.2.1 候选bmo-miRNAs重组质粒的构建 | 第67-68页 |
4.2.2 BmSGF-13′UTR重组质粒的构建 | 第68-70页 |
4.2.3 重组质粒pcDNA3.0 [ie1-egfp-pri-miRNAs-SV40]转染家蚕BmN细胞 · 654.2.4 重组质粒共转染家蚕BmN细胞 | 第70-71页 |
4.2.4 重组质粒共转染家蚕BmN细胞 | 第71-72页 |
4.2.5 bmo-miR-305*和bmo-miR-3327*对BmSGF-1 基因表达的调控作用 | 第72-74页 |
4.3 讨论 | 第74页 |
4.4 本章小结 | 第74-76页 |
第5章 Bmo-miR-2758对BmFMBP-1 基因的转录后调控研究 | 第76-84页 |
5.1 材料与方法 | 第76-77页 |
5.1.1 实验材料 | 第76页 |
5.1.2 主要试剂 | 第76页 |
5.1.3 实验方法 | 第76-77页 |
5.2 结果与分析 | 第77-82页 |
5.2.1 bmo-miR-2758重组质粒的构建 | 第77-79页 |
5.2.2 BmFMBP-13′UTR重组质粒的构建 | 第79-81页 |
5.2.3 重组质粒共转染家蚕BmN细胞 | 第81页 |
5.2.4 bmo-miR-2758对BmFMBP-1 基因表达的调控作用 | 第81-82页 |
5.3 讨论 | 第82-83页 |
5.4 本章小结 | 第83-84页 |
第6章 家蚕miR-34对BmE74基因转录后调控的研究 | 第84-92页 |
6.1 材料与方法 | 第85-86页 |
6.1.1 实验材料 | 第85页 |
6.1.2 主要试剂 | 第85页 |
6.1.3 实验方法 | 第85-86页 |
6.2 结果与分析 | 第86-88页 |
6.2.1 bmo-miR-34与BmE743′UTR结合位点的预测 | 第86-87页 |
6.2.2 bmo-miR-34的克隆鉴定 | 第87页 |
6.2.3 重组质粒共转染家蚕BmN细胞 | 第87页 |
6.2.4 bmo-miR-34对BmE74基因表达的调控作用 | 第87-88页 |
6.3 讨论 | 第88-89页 |
6.4 本章小结 | 第89-92页 |
结论 | 第92-94页 |
参考文献 | 第94-104页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第104-106页 |
致谢 | 第106页 |