| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| 1.1 研究背景 | 第12-13页 |
| 1.2 小麦遗传转化方法 | 第13-17页 |
| 1.2.1 基因枪法 | 第13-14页 |
| 1.2.2 影响基因枪转化的因素 | 第14-15页 |
| 1.2.3 农杆菌介导法 | 第15-17页 |
| 1.3 筛选标记基因 | 第17-19页 |
| 1.3.1 草丁膦N-乙酰转移酶基因(Bar)在小麦遗传转化中的应用 | 第17-18页 |
| 1.3.2 磷酸甘露糖异构酶基因(Pmi)及其在小麦遗传转化中的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 赤霉病抗性相关基因的研究 | 第19-20页 |
| 1.5 RNA干扰技术在小麦抗赤霉病育种中的应用 | 第20-22页 |
| 1.5.1 RNA干扰技术的发展及其作用机制 | 第20-21页 |
| 1.5.2 本研究RNAi表达载体中涉及的基因 | 第21-22页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 实验材料与方法 | 第23-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 质粒及菌株 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株扩大培养所用培养基 | 第23页 |
| 2.1.3 质粒DNA提取试剂 | 第23页 |
| 2.1.4 试剂盒和限制性内切酶 | 第23-24页 |
| 2.1.5 转化受体 | 第24页 |
| 2.1.6 小麦基因组DNA和RNA提取试剂 | 第24页 |
| 2.1.7 PCR及RT-PCR试剂 | 第24页 |
| 2.1.8 赤霉病菌接种和鉴定相关培养基配制 | 第24-25页 |
| 2.1.9 引物 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-34页 |
| 2.2.1 最小表达框的制备 | 第26-28页 |
| 2.2.2 转化受体的前处理 | 第28-29页 |
| 2.2.3 基因枪轰击 | 第29-30页 |
| 2.2.4 愈伤组织的后期培养 | 第30页 |
| 2.2.5 小麦叶片基因组DNA的粗提取 | 第30-31页 |
| 2.2.6 转基因小麦的PCR鉴定 | 第31页 |
| 2.2.7 转基因小麦的RT-PCR鉴定 | 第31-32页 |
| 2.2.8 加代种子的萌发与春化 | 第32-33页 |
| 2.2.9 赤霉病抗性鉴定 | 第33-34页 |
| 3 实验结果与分析 | 第34-56页 |
| 3.1 最小表达框的制备 | 第34-35页 |
| 3.2 Pmi/甘露糖筛选体系下小麦幼胚的基因枪转化 | 第35-56页 |
| 3.2.1 小麦幼胚转化和转基因植株的获得 | 第35-36页 |
| 3.2.2 扬麦158转Lem2-pkcAs3-chs7As4、Ubi-chs7As3-chs7As4基因小麦的鉴定 | 第36-41页 |
| 3.2.3 襄麦76转pkcAs3-chs7As4基因小麦的鉴定 | 第41-44页 |
| 3.2.4 襄麦76转chs3bAs5As1、glsAs6-chs3bAs1、CYP51BAC-DNOS基因小麦的PCR鉴定 | 第44-45页 |
| 3.2.5 襄麦76转Dubi-ubi-gls3-gls6、Dubi-ubi-gls2-gls6基因小麦的PCR鉴定 | 第45-46页 |
| 3.2.6 襄麦76转CYP51BAC-DNOS、chs3bAs5As1、chs3bAs2As3基因小麦的PCR鉴定 | 第46-48页 |
| 3.2.7 襄麦76转gls3-gls6、chs3bAs5As1、chs3bAs2As3基因小麦的PCR鉴定 | 第48-49页 |
| 3.2.8 襄麦76转glsAs6-chs3bAs1、chs3bAs5As1、chs3bAs2As3基因小麦的PCR鉴定 | 第49-51页 |
| 3.2.9 襄麦76转Ubi-blf、Lem2-hvchi、Bar基因小麦的PCR鉴定 | 第51-53页 |
| 3.2.10 襄麦76转Ubi-blf、Lem2-hvchi、Pmi基因小麦的鉴定 | 第53-54页 |
| 3.2.11 襄麦76转基因植株田间单花接种鉴定 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| 4.1 影响小麦基因枪转化的因素 | 第56-57页 |
| 4.2 基因枪介导的最小表达框法转化小麦的遗传规律 | 第57页 |
| 4.3 转RNAi片段小麦的抗赤霉病性鉴定分析 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
