摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩略语 | 第9-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-20页 |
1 水稻稻瘟病的危害 | 第10页 |
2 稻瘟病菌生长周期 | 第10-11页 |
3 稻瘟病抗性及其致病机理的研究进展 | 第11-17页 |
3.1 稻瘟病的抗性类型与遗传方式 | 第11-12页 |
3.2 稻瘟病抗性及相关机理的研究 | 第12-14页 |
3.2.1 基因对基因假说 | 第12页 |
3.2.2 防卫假说 | 第12-13页 |
3.2.3 保卫假说 | 第13页 |
3.2.4 诱饵模型假说 | 第13-14页 |
3.3 抗病相关蛋白在植物体内的功能 | 第14-17页 |
3.3.1 参与能量代谢 | 第15页 |
3.3.2 参与物质合成与分解 | 第15页 |
3.3.3 参与抗氧化系统 | 第15-16页 |
3.3.4 参与信号转导 | 第16-17页 |
4 植物膜蛋白研究进展及意义 | 第17-20页 |
4.1 植物膜蛋白研究进展 | 第17页 |
4.2 研究膜蛋白的意义 | 第17-20页 |
第二部分 研究报告 | 第20-58页 |
1 材料与方法 | 第20-32页 |
1.1 植物材料及处理 | 第20-21页 |
1.2 菌株、载体、试剂盒 | 第21页 |
1.3 生物信息学分析网站和软件 | 第21-22页 |
1.4 水稻幼苗总RNA的提取及cDNA的合成 | 第22-23页 |
1.4.1 水稻幼苗总RNA的提取 | 第22-23页 |
1.4.2 cDNA第一链的合成 | 第23页 |
1.5 OsMP1的克隆和转化 | 第23-24页 |
1.5.1 OsMP1的克隆 | 第23-24页 |
1.5.2 大肠杆菌的转化 | 第24页 |
1.5.3 农杆菌的转化 | 第24页 |
1.6 亚细胞定位分析 | 第24-26页 |
1.6.1 亚细胞定位载体的构建 | 第24-25页 |
1.6.2 水稻原生质体转化 | 第25-26页 |
1.7 Quantitative Real-time PCR分析 | 第26页 |
1.8 Southern杂交 | 第26-27页 |
1.9 酵母双杂交筛选互作蛋白 | 第27-32页 |
1.9.1 cDNA文库的构建 | 第27页 |
1.9.2 pBT3-N-OsMP1诱饵载体的构建 | 第27-28页 |
1.9.3 酵母感受态的制备和转化 | 第28页 |
1.9.4 转录自激活活性检测 | 第28页 |
1.9.5 阳性克隆的初步筛选 | 第28-31页 |
1.9.6 回转验证 | 第31-32页 |
1.9.7 阳性克隆的序列分析 | 第32页 |
2 结果与分析 | 第32-55页 |
2.1 OsMP1基因的克隆 | 第32-33页 |
2.2 OsMP1蛋白的初步生物信息学分析 | 第33-43页 |
2.2.1 OsMP1蛋白序列分析 | 第33-36页 |
2.2.2 OsMP1蛋白理化性质分析 | 第36-37页 |
2.2.3 OsMP1跨膜结构域预测分析 | 第37-38页 |
2.2.4 OsMP1信号肽及磷酸化位点分析 | 第38-40页 |
2.2.5 OsMP1的亚细胞定位预测 | 第40页 |
2.2.6 OsMP1的表达模式分析 | 第40-42页 |
2.2.7 OsMP1的共表达基因分析 | 第42-43页 |
2.3 OsMP1蛋白亚细胞定位分析 | 第43页 |
2.4 OsMP1在不同水稻组织中组成型表达 | 第43-44页 |
2.5 OsMP1在两个抗稻瘟病性不同的水稻品种中的表达特性 | 第44-45页 |
2.6 OsMP1在野生型黑壳子粳中的拷贝数 | 第45-46页 |
2.7 酵母双杂交筛选OsMP1互作蛋白 | 第46-51页 |
2.7.1 利用DUALmembrane系统筛选OsMP1的互作子 | 第46-47页 |
2.7.2 诱饵蛋白的转录活性验证 | 第47-48页 |
2.7.3 初步筛选互作蛋白 | 第48-49页 |
2.7.4 一对一阳性验证(回转验证) | 第49-50页 |
2.7.5 OsMP1互作蛋白MP-P1和MP-P2的序列分析 | 第50-51页 |
2.8 转基因表达载体的构建 | 第51-55页 |
2.8.1 OsMP1过表达载体的构建 | 第51-52页 |
2.8.2 OsMP1定点突变载体的构建 | 第52-53页 |
2.8.3 OsMP1荧光表达载体的构建 | 第53-55页 |
3 讨论 | 第55-58页 |
3.1 OsMP1的生物信息学分析 | 第55页 |
3.2 OsMP1的亚细胞定位和表达特性 | 第55-56页 |
3.3 OsMP1的酵母双杂交结果分析 | 第56-58页 |
全文结论 | 第58-60页 |
附录 | 第60-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第74-76页 |
致谢 | 第76页 |