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水稻抗稻瘟病相关基因OsMP1的克隆和初步功能分析

摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
缩略语第9-10页
第一部分 文献综述第10-20页
    1 水稻稻瘟病的危害第10页
    2 稻瘟病菌生长周期第10-11页
    3 稻瘟病抗性及其致病机理的研究进展第11-17页
        3.1 稻瘟病的抗性类型与遗传方式第11-12页
        3.2 稻瘟病抗性及相关机理的研究第12-14页
            3.2.1 基因对基因假说第12页
            3.2.2 防卫假说第12-13页
            3.2.3 保卫假说第13页
            3.2.4 诱饵模型假说第13-14页
        3.3 抗病相关蛋白在植物体内的功能第14-17页
            3.3.1 参与能量代谢第15页
            3.3.2 参与物质合成与分解第15页
            3.3.3 参与抗氧化系统第15-16页
            3.3.4 参与信号转导第16-17页
    4 植物膜蛋白研究进展及意义第17-20页
        4.1 植物膜蛋白研究进展第17页
        4.2 研究膜蛋白的意义第17-20页
第二部分 研究报告第20-58页
    1 材料与方法第20-32页
        1.1 植物材料及处理第20-21页
        1.2 菌株、载体、试剂盒第21页
        1.3 生物信息学分析网站和软件第21-22页
        1.4 水稻幼苗总RNA的提取及cDNA的合成第22-23页
            1.4.1 水稻幼苗总RNA的提取第22-23页
            1.4.2 cDNA第一链的合成第23页
        1.5 OsMP1的克隆和转化第23-24页
            1.5.1 OsMP1的克隆第23-24页
            1.5.2 大肠杆菌的转化第24页
            1.5.3 农杆菌的转化第24页
        1.6 亚细胞定位分析第24-26页
            1.6.1 亚细胞定位载体的构建第24-25页
            1.6.2 水稻原生质体转化第25-26页
        1.7 Quantitative Real-time PCR分析第26页
        1.8 Southern杂交第26-27页
        1.9 酵母双杂交筛选互作蛋白第27-32页
            1.9.1 cDNA文库的构建第27页
            1.9.2 pBT3-N-OsMP1诱饵载体的构建第27-28页
            1.9.3 酵母感受态的制备和转化第28页
            1.9.4 转录自激活活性检测第28页
            1.9.5 阳性克隆的初步筛选第28-31页
            1.9.6 回转验证第31-32页
            1.9.7 阳性克隆的序列分析第32页
    2 结果与分析第32-55页
        2.1 OsMP1基因的克隆第32-33页
        2.2 OsMP1蛋白的初步生物信息学分析第33-43页
            2.2.1 OsMP1蛋白序列分析第33-36页
            2.2.2 OsMP1蛋白理化性质分析第36-37页
            2.2.3 OsMP1跨膜结构域预测分析第37-38页
            2.2.4 OsMP1信号肽及磷酸化位点分析第38-40页
            2.2.5 OsMP1的亚细胞定位预测第40页
            2.2.6 OsMP1的表达模式分析第40-42页
            2.2.7 OsMP1的共表达基因分析第42-43页
        2.3 OsMP1蛋白亚细胞定位分析第43页
        2.4 OsMP1在不同水稻组织中组成型表达第43-44页
        2.5 OsMP1在两个抗稻瘟病性不同的水稻品种中的表达特性第44-45页
        2.6 OsMP1在野生型黑壳子粳中的拷贝数第45-46页
        2.7 酵母双杂交筛选OsMP1互作蛋白第46-51页
            2.7.1 利用DUALmembrane系统筛选OsMP1的互作子第46-47页
            2.7.2 诱饵蛋白的转录活性验证第47-48页
            2.7.3 初步筛选互作蛋白第48-49页
            2.7.4 一对一阳性验证(回转验证)第49-50页
            2.7.5 OsMP1互作蛋白MP-P1和MP-P2的序列分析第50-51页
        2.8 转基因表达载体的构建第51-55页
            2.8.1 OsMP1过表达载体的构建第51-52页
            2.8.2 OsMP1定点突变载体的构建第52-53页
            2.8.3 OsMP1荧光表达载体的构建第53-55页
    3 讨论第55-58页
        3.1 OsMP1的生物信息学分析第55页
        3.2 OsMP1的亚细胞定位和表达特性第55-56页
        3.3 OsMP1的酵母双杂交结果分析第56-58页
全文结论第58-60页
附录第60-68页
参考文献第68-74页
攻读硕士期间发表的论文第74-76页
致谢第76页

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