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MAZ介导的自噬抑制在鼻咽癌转移中的作用和分子机制研究

缩略语表第6-8页
中文摘要第8-11页
ABSTRACT第11-14页
前言第15-16页
文献回顾第16-27页
实验一 自噬与鼻咽癌转移的相关性研究第27-45页
    1 材料第27-30页
        1.1 细胞株第27页
        1.2 细胞培养试剂第27页
        1.3 qRT- PCR检测试剂第27-28页
        1.4 Western Blot试剂第28页
        1.5 细胞检测试剂及耗材第28-29页
        1.6 仪器设备第29-30页
        1.7 主要试剂配制第30页
    2 方法第30-37页
        2.1 细胞培养第30页
        2.2 细胞传代第30-31页
        2.3 细胞冻存第31页
        2.4 细胞复苏第31页
        2.5 细胞照射第31页
        2.6 CCK-8 法检测照射对细胞增殖影响第31-32页
        2.7 qRT-PCR检测细胞自噬相关基因的表达第32-33页
        2.8 免疫荧光检测细胞自噬第33-34页
        2.9 激光共聚焦显微镜检测细胞自噬第34页
        2.10 透射电镜检测自噬泡第34页
        2.11 Western Blot检测细胞自噬和转移基因相关蛋白的表达第34-36页
        2.12 细胞划痕实验第36页
        2.13 Transwell实验检测细胞侵袭能力第36-37页
        2.14 统计学方法第37页
    3 结果第37-43页
        3.1 鼻咽癌细胞模型的最佳照射剂量筛选第37-38页
        3.2 鼻咽癌细胞转移能力的验证第38-39页
        3.3 高低转移潜能鼻咽癌细胞系的自噬水平研究第39-43页
    4 讨论第43-45页
实验二 MAZ基因在鼻咽癌自噬和转移中的作用研究第45-57页
    1 材料第45页
        1.1 主要试剂同实验一第45页
        1.2 主要设备同实验一第45页
    2 方法第45-47页
        2.1 慢病毒转染细胞第45-46页
        2.2 qRT-PCR检测细胞MAZ及自噬基因mRNA表达含量第46页
        2.3 免疫荧光检测下调MAZ后细胞的自噬第46页
        2.4 激光共聚焦检测下调MAZ后细胞的自噬流第46页
        2.5 透射电镜检测下调MAZ后细胞的自噬泡第46页
        2.6 Western Blot检测下调MAZ后细胞的自噬和转移基因相关蛋白的表达第46页
        2.7 细胞划痕实验检测下调MAZ后细胞的迁移能力第46页
        2.8 Transwell实验检测下调MAZ后细胞的迁移和侵袭能力第46-47页
        2.9 CCK-8 法检测下调MAZ后细胞的增殖情况第47页
        2.10 统计学方法第47页
    3 结果第47-55页
        3.1 MAZ基因的表达水平检测第47-48页
        3.2 成功构建MAZ下调的稳定细胞株第48-49页
        3.3 MAZ的表达水平和鼻咽癌细胞自噬水平的关系研究第49-52页
        3.4 MAZ和鼻咽癌细胞转移关系的研究第52-54页
        3.5 MAZ促进鼻咽癌细胞的增殖第54-55页
    4 讨论第55-57页
实验三 AKT/MAZ/C-MYC在介导自噬抑制促进鼻咽癌转移中的作用研究第57-74页
    1 材料第57-58页
        1.1 主要试剂同实验一第57页
        1.2 主要设备同实验一第57-58页
    2 方法第58-59页
        2.1 Co-IP检测MAZ与c-Myc,MAZ与mTOR相互作用第58页
        2.2 激光共聚焦检测c-Myc及PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂对细胞自噬流的影响第58-59页
        2.3 透射电镜检测c-Myc及PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂对细胞自噬的影响第59页
        2.4 Western Blot检测c-Myc及PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂对细胞自噬和转移基因蛋白的影响第59页
        2.5 划痕实验检测c-Myc及PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂对细胞迁移能力的影响第59页
        2.6 Transwell实验检测c-Myc及PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂对细胞迁移和侵袭能力的影响第59页
        2.7 统计学方法第59页
    3 结果第59-72页
        3.1 MAZ与c-Myc相互作用抑制鼻咽癌细胞自噬第59-62页
        3.2 c-Myc和鼻咽癌细胞的转移的关系研究第62-64页
        3.3 PI3K/AKT信号对MAZ/c-Myc的调控作用第64-66页
        3.4 MAZ主要通过mTORC1途径抑制鼻咽癌细胞自噬促进其转移第66-72页
    4 讨论第72-74页
小结第74-75页
参考文献第75-86页
附录第86-87页
个人简历和研究成果第87-88页
致谢第88页

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