| 缩略语表 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 文献回顾 | 第15-24页 |
| 第一部分MIR-1246在食管癌组织和食管癌细胞中的表达情况 | 第24-32页 |
| 1 材料 | 第24-26页 |
| 1.1 细胞系 | 第24页 |
| 1.2 组织标本 | 第24-25页 |
| 1.3 主要试剂 | 第25页 |
| 1.4 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-28页 |
| 2.1 细胞培养 | 第26页 |
| 2.2 食管癌细胞总RNA提取： | 第26-27页 |
| 2.3 食管癌组织总RNA提取 | 第27页 |
| 2.4 miR-1246和U6的反转录 | 第27页 |
| 2.5 Realtime PCR检测miR-1246的表达 | 第27-28页 |
| 2.6 统计学方法 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 第二部分MIR-1246对食管癌转移能力的影响 | 第32-40页 |
| 1 材料 | 第32-33页 |
| 1.1 细胞系 | 第32页 |
| 1.2 实验动物 | 第32页 |
| 1.3 主要试剂 | 第32-33页 |
| 1.4 慢病毒 | 第33页 |
| 1.5 PCR引物 | 第33页 |
| 1.6 主要仪器 | 第33页 |
| 2 方法 | 第33-35页 |
| 2.1 miR-1246的瞬时转染 | 第33-34页 |
| 2.2 稳定过表达miR-1246的细胞的建立 | 第34页 |
| 2.3 Transwell实验检测细胞侵袭能力 | 第34-35页 |
| 2.4 裸鼠成瘤实验 | 第35页 |
| 2.5 统计学方法 | 第35页 |
| 3 结果 | 第35-38页 |
| 3.1 体外实验证实miR-1246能够促进食管癌细胞转移 | 第35-37页 |
| 3.2 体内实验证实miR-1246能够促进食管癌转移 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 第三部分MIR-1246通过靶向GSK-Β促进食管癌转移 | 第40-49页 |
| 1 材料 | 第40-41页 |
| 1.1 细胞系 | 第40页 |
| 1.2 主要试剂 | 第40-41页 |
| 1.3 主要仪器 | 第41页 |
| 2 方法 | 第41-44页 |
| 2.1 生物信息学预测miR-1246的靶基因 | 第41页 |
| 2.2 Realtime PCR检测GSK3β的表达 | 第41-42页 |
| 2.3 过表达GSK3β报告基因载体的转染 | 第42页 |
| 2.4 Western blot检测蛋白表达 | 第42-43页 |
| 2.5 双荧光素酶报告基因实验 | 第43-44页 |
| 2.6 统计学方法 | 第44页 |
| 3 结果 | 第44-47页 |
| 3.1 GSK3β可能是miR-1246的关键靶分子 | 第44-45页 |
| 3.2 GSK3β是miR-1246的功能靶分子 | 第45页 |
| 3.3 蛋白水平验证miR-1246靶分子 | 第45-46页 |
| 3.4 miR-1246明显抑制GSK3β-wt表达，而不抑制3’-UTR突变的GSK3β-mut的表达 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 小结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-61页 |
| 个人简历和研究成果 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
