| 缩略语表 | 第7-8页 |
| 中文摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 文献回顾 | 第17-22页 |
| 一、结肠癌发生发展的生物学机制 | 第17-18页 |
| 二、西妥昔单抗的耐药机制 | 第18-19页 |
| 三、IRAK1分子在肿瘤发生发展中的重要作用 | 第19-22页 |
| 第一部分 结肠癌细胞对西妥昔单抗的敏感性及IRAK1分子表达水平检测 | 第22-32页 |
| 1 材料 | 第23-25页 |
| 1.1 细胞珠 | 第23页 |
| 1.2 引物 | 第23页 |
| 1.3 主要试剂和材料 | 第23-24页 |
| 1.4 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2 方法 | 第25-29页 |
| 2.1 细胞培养 | 第25页 |
| 2.2 细胞总RNA的提取及定量 | 第25页 |
| 2.3 荧光实时定量PCR | 第25-26页 |
| 2.4 细胞转染 | 第26-27页 |
| 2.5 Western blot | 第27-28页 |
| 2.6 WST-1 监测细胞增殖 | 第28页 |
| 2.7 免疫荧光 | 第28-29页 |
| 3 结果 | 第29-31页 |
| 3.1 西妥昔单抗可诱导HT-29 细胞中的IRAK1分子升高 | 第29页 |
| 3.2 IRAK1分子及p-IRAK1分子在结肠癌细胞中的定位 | 第29-30页 |
| 3.3 KRAS野生型结肠癌细胞的增殖情况及其对西妥昔单抗的敏感性 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-32页 |
| 第二部分 IRAK抑制剂对结肠癌生物学活性的影响 | 第32-42页 |
| 1. 材料 | 第33-34页 |
| 1.1 细胞珠 | 第33页 |
| 1.2 抗体 | 第33页 |
| 1.3 主要材料和试剂 | 第33-34页 |
| 1.4 主要仪器 | 第34页 |
| 2. 方法 | 第34-38页 |
| 2.1 细胞培养 | 第34-35页 |
| 2.2 Western blot实验 | 第35-36页 |
| 2.3 WST-1 检测细胞增殖 | 第36页 |
| 2.4 细胞凋亡实验 | 第36页 |
| 2.5 细胞周期实验 | 第36页 |
| 2.6 细胞高内涵实验 | 第36-37页 |
| 2.7 siRNA细胞转染 | 第37页 |
| 2.8 慢病毒细胞转染 | 第37页 |
| 2.9 平板克隆实验 | 第37-38页 |
| 3. 结果 | 第38-41页 |
| 3.1 si IRAK1及IRAK-Inh可以通过不同的方式抑制IRAK1分子的活化 | 第38-39页 |
| 3.2 IRAK-Inh通过降低西妥昔单抗引起的IRAK1表达升高进而增强其对肿瘤细胞的增殖抑制作用 | 第39-40页 |
| 3.3 IRAK-Inh及siIRAK1均可以促进耐药细胞系的凋亡及延长细胞的静止期 | 第40-41页 |
| 3.4 IRAK-Inh对非RAS野生型结肠癌细胞系的影响 | 第41页 |
| 4. 结论 | 第41-42页 |
| 第三部分 IRAK抑制剂提高西妥昔单抗抗肿瘤作用机制的探索 | 第42-53页 |
| 1. 材料 | 第42-44页 |
| 1.1 细胞珠 | 第42-43页 |
| 1.2 引物 | 第43页 |
| 1.3 抗体 | 第43页 |
| 1.4 主要试剂和材料 | 第43-44页 |
| 1.5 主要仪器 | 第44页 |
| 2. 方法 | 第44-47页 |
| 2.1 细胞培养 | 第44-45页 |
| 2.2 siIRAK1细胞转染 | 第45页 |
| 2.3 慢病毒细胞转染 | 第45页 |
| 2.4 WST-1 实验 | 第45页 |
| 2.5 Western blot实验 | 第45-46页 |
| 2.6 免疫共沉淀实验（Co-IP） | 第46-47页 |
| 3. 结果 | 第47-51页 |
| 3.1 ERK及p65可能是IRAK1的下游作用分子 | 第47-48页 |
| 3.2 细胞表面TLR4的激活引起下游IRAK1的改变 | 第48-49页 |
| 3.3 TRAF6分子可以与IRAK1分子发生相互作用 | 第49-50页 |
| 3.4 厄洛替尼在抑制EGFR磷酸化的过程中并未引起TLR4/IRAK1分子的改变 | 第50-51页 |
| 4. 结论 | 第51-53页 |
| 第四部分 IRAK1在结肠癌患者肿瘤组织中的表达及其与患者预后之间的关系 | 第53-58页 |
| 1. 材料 | 第53-55页 |
| 1.1 组织切片 | 第53页 |
| 1.2 结肠癌组织芯片 | 第53-54页 |
| 1.3 主要试剂和材料 | 第54页 |
| 1.4 主要仪器 | 第54-55页 |
| 2. 方法 | 第55页 |
| 2.1 免疫组织化学实验 | 第55页 |
| 3. 结果 | 第55-57页 |
| 3.1 IRAK1分子表达水平与患者的预后相关 | 第55-56页 |
| 3.2 IRAK1与结肠癌患者的临床病理学数据之间相关性的分析 | 第56-57页 |
| 4. 结论 | 第57-58页 |
| 第五部分 IRAK抑制剂联合西妥昔单抗对结肠癌抑制作用的体内研究 | 第58-64页 |
| 1. 材料 | 第58-61页 |
| 1.1 裸鼠 | 第58页 |
| 1.2 结肠癌组织 | 第58-59页 |
| 1.3 抗体 | 第59页 |
| 1.4 主要试剂和材料 | 第59-60页 |
| 1.5 主要仪器 | 第60-61页 |
| 2. 方法 | 第61-62页 |
| 2.1 细胞培养 | 第61页 |
| 2.2 裸鼠成瘤实验 | 第61页 |
| 2.3 Western blot实验 | 第61-62页 |
| 2.5 免疫组织化学实验 | 第62页 |
| 3. 结果 | 第62-63页 |
| 3.1 IRAK抑制剂联合西妥昔单抗可以明显抑制肿瘤组织的生长 | 第62-63页 |
| 3.2 IRAK抑制剂通过影响ERK、NF-κB分子及凋亡相关蛋白而发挥肿瘤抑制作用 | 第63页 |
| 4. 结论 | 第63-64页 |
| 小结 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 个人简历和研究成果 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
