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利用IETD连接TRAIL和Smac的靶向性双基因溶瘤腺病毒治疗癌症的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
缩略词第11-12页
   ·引言第12-19页
     ·癌症治疗的研究现状第12-13页
     ·ZD55 概述第13页
     ·关于靶向性双基因-病毒治疗的提出第13-14页
     ·TRAIL 基因概述第14-16页
     ·Smac 基因概述第16-17页
     ·双基因连接工具IETD 的作用第17-18页
     ·实验目的和意义第18页
     ·创新点第18-19页
   ·实验材料第19-24页
     ·生化试剂第19页
     ·主要质粒及菌株第19页
     ·抗体第19页
     ·腺病毒第19页
     ·细胞株第19-20页
     ·主要实验仪器第20-22页
     ·主要溶液配制第22-23页
     ·引物的设计与合成第23-24页
   ·实验方法第24-35页
     ·靶向性双基因-病毒的鉴定、大量扩增及病毒滴度的测定第24-29页
     ·Western blotting 测定TRAIL 和Smac 及相关蛋白的表达第29-32页
     ·MTT 法检测细胞存活率第32页
     ·细胞病变效应(CPE)实验第32-33页
     ·Hochst 33342 染色检测细胞的凋亡第33页
     ·肺癌H460 细胞株的荷瘤裸鼠模型的建立实验及瘤内注射重组腺病毒实验第33页
     ·肿瘤抑制曲线的绘制第33页
     ·免疫组化检测TRAIL 和Smac 的表达第33-34页
     ·原位末端标记染色方法(TUNEL)第34-35页
     ·统计学分析第35页
   ·实验结果第35-51页
     ·ZD55-TRAIL-(IETD)-Smac 及各对照病毒的分子结构概略图第35-36页
     ·ZD55-TRAIL-(IETD)-Smac 及其它对照病毒组的凝胶电泳检测第36-37页
     ·Western blot 鉴定病毒基因表达及其对正常细胞的安全性第37-39页
     ·MTT 实验检测各病毒处理后细胞的存活率第39-43页
     ·细胞病变效应(CPE)实验进一步检测病毒的抑瘤效果和毒副作用第43-45页
     ·ZD55-TRAIL-(IETD)-Smac 诱导肿瘤细胞凋亡实验第45-46页
     ·Western blot 实验检测信号通路关键蛋白的表达第46-47页
     ·抑瘤曲线表明ZD55-TRAIL-(IETD)-Smac 显著抑制荷瘤小鼠肿瘤生长第47-49页
     ·免疫组化分析肿瘤组织中TRAIL 和Smac 的表达第49-50页
     ·TUNEL 染色分析 ZD55-TRAIL-(IETD)-Smac 诱导裸鼠肿瘤细胞的凋亡第50-51页
   ·讨论第51-54页
参考文献第54-57页
致谢第57页

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