摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
缩略词 | 第11-12页 |
·引言 | 第12-19页 |
·癌症治疗的研究现状 | 第12-13页 |
·ZD55 概述 | 第13页 |
·关于靶向性双基因-病毒治疗的提出 | 第13-14页 |
·TRAIL 基因概述 | 第14-16页 |
·Smac 基因概述 | 第16-17页 |
·双基因连接工具IETD 的作用 | 第17-18页 |
·实验目的和意义 | 第18页 |
·创新点 | 第18-19页 |
·实验材料 | 第19-24页 |
·生化试剂 | 第19页 |
·主要质粒及菌株 | 第19页 |
·抗体 | 第19页 |
·腺病毒 | 第19页 |
·细胞株 | 第19-20页 |
·主要实验仪器 | 第20-22页 |
·主要溶液配制 | 第22-23页 |
·引物的设计与合成 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-35页 |
·靶向性双基因-病毒的鉴定、大量扩增及病毒滴度的测定 | 第24-29页 |
·Western blotting 测定TRAIL 和Smac 及相关蛋白的表达 | 第29-32页 |
·MTT 法检测细胞存活率 | 第32页 |
·细胞病变效应(CPE)实验 | 第32-33页 |
·Hochst 33342 染色检测细胞的凋亡 | 第33页 |
·肺癌H460 细胞株的荷瘤裸鼠模型的建立实验及瘤内注射重组腺病毒实验 | 第33页 |
·肿瘤抑制曲线的绘制 | 第33页 |
·免疫组化检测TRAIL 和Smac 的表达 | 第33-34页 |
·原位末端标记染色方法(TUNEL) | 第34-35页 |
·统计学分析 | 第35页 |
·实验结果 | 第35-51页 |
·ZD55-TRAIL-(IETD)-Smac 及各对照病毒的分子结构概略图 | 第35-36页 |
·ZD55-TRAIL-(IETD)-Smac 及其它对照病毒组的凝胶电泳检测 | 第36-37页 |
·Western blot 鉴定病毒基因表达及其对正常细胞的安全性 | 第37-39页 |
·MTT 实验检测各病毒处理后细胞的存活率 | 第39-43页 |
·细胞病变效应(CPE)实验进一步检测病毒的抑瘤效果和毒副作用 | 第43-45页 |
·ZD55-TRAIL-(IETD)-Smac 诱导肿瘤细胞凋亡实验 | 第45-46页 |
·Western blot 实验检测信号通路关键蛋白的表达 | 第46-47页 |
·抑瘤曲线表明ZD55-TRAIL-(IETD)-Smac 显著抑制荷瘤小鼠肿瘤生长 | 第47-49页 |
·免疫组化分析肿瘤组织中TRAIL 和Smac 的表达 | 第49-50页 |
·TUNEL 染色分析 ZD55-TRAIL-(IETD)-Smac 诱导裸鼠肿瘤细胞的凋亡 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-54页 |
参考文献 | 第54-57页 |
致谢 | 第57页 |