| 摘要 | 第3-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 第一章 新型纳米材料提取肝癌细胞外泌体方法的建立与比较 | 第15-31页 |
| 1 材料 | 第16-18页 |
| 1.1 细胞系 | 第16页 |
| 1.2 抗体 | 第16页 |
| 1.3 主要试剂与耗材 | 第16-17页 |
| 1.4 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2 方法 | 第18-21页 |
| 2.1 细胞培养 | 第18页 |
| 2.2 培养上清的收集与浓缩 | 第18页 |
| 2.3 外泌体的提取 | 第18-19页 |
| 2.4 外泌体的电镜观察 | 第19页 |
| 2.5 外泌体蛋白的提取 | 第19页 |
| 2.6 外泌体蛋白定量 | 第19页 |
| 2.7 Western blotting | 第19-21页 |
| 3 结果 | 第21-23页 |
| 3.1 外泌体的形态学观察 | 第21页 |
| 3.2 比较两种方法提取外泌体的蛋白量 | 第21-22页 |
| 3.3 外泌体的生物分子和肝癌相关蛋白检测 | 第22-23页 |
| 4 讨论 | 第23-27页 |
| 小结 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-31页 |
| 第二章 结肠癌TP53相关外泌体的定量蛋白质组研究 | 第31-82页 |
| 1 材料 | 第33-36页 |
| 1.1 细胞系 | 第33页 |
| 1.2 抗体 | 第33页 |
| 1.3 菌株与质粒 | 第33页 |
| 1.4 引物 | 第33页 |
| 1.5 临床样本 | 第33-34页 |
| 1.6 主要试剂和耗材 | 第34-35页 |
| 1.7 主要仪器 | 第35-36页 |
| 2 方法 | 第36-51页 |
| 2.1 质粒的扩增和提取 | 第36-38页 |
| 2.2 稳定转染 | 第38-40页 |
| 2.3 稳定克隆的筛选 | 第40页 |
| 2.4 细胞培养 | 第40页 |
| 2.5 培养上清的收集与浓缩 | 第40-41页 |
| 2.6 外泌体的提取 | 第41页 |
| 2.7 外泌体的电镜观察 | 第41页 |
| 2.8 外泌体蛋白的提取 | 第41页 |
| 2.9 外泌体蛋白定量 | 第41-42页 |
| 2.10 Western blotting | 第42-43页 |
| 2.11 质谱分析 | 第43-46页 |
| 2.12 ELISA | 第46-48页 |
| 2.13 实时荧光定量PCR | 第48-50页 |
| 2.14 生长曲线 | 第50-51页 |
| 2.15 划痕实验 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-66页 |
| 3.1 HCT116-p53(R273H)细胞系的建立 | 第51-52页 |
| 3.2 三种细胞系来源的外泌体的鉴定 | 第52-55页 |
| 3.3 肝细胞生长因子调控酪氨酸激酶亚基的检测 | 第55-57页 |
| 3.4 TP53突变促进细胞生长和迁移 | 第57-58页 |
| 3.5 三种细胞系的外泌体差异蛋白分析 | 第58-65页 |
| 3.6 差异蛋白RB1的血清学验证 | 第65-66页 |
| 4 讨论 | 第66-74页 |
| 小结 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 附录 | 第82-106页 |
| 缩略词简表 | 第106-108页 |
| 文献综述 | 第108-125页 |
| 参考文献 | 第119-125页 |
| 朱琳个人简介 | 第125-127页 |
| 致谢 | 第127-130页 |
| 附件 | 第130-139页 |
