| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-32页 |
| 1 研究背景 | 第13-15页 |
| 2 植物启动子研究现状 | 第15-26页 |
| 2.1 启动子的基本特征 | 第15-17页 |
| 2.2 启动子的分类 | 第17-23页 |
| 2.2.1 组成型启动子 | 第17-18页 |
| 2.2.2 诱导型启动子 | 第18-21页 |
| 2.2.3 组织器官特异启动子 | 第21-23页 |
| 2.3 启动子的应用 | 第23-26页 |
| 2.3.1 构建植物遗传转化载体 | 第24页 |
| 2.3.2 构建特殊系统 | 第24-26页 |
| 3 启动子的研究方法 | 第26-30页 |
| 3.1 启动子序列生物信息学分析 | 第27页 |
| 3.2 启动子分离克隆 | 第27-28页 |
| 3.3 表达模式及强度分析 | 第28页 |
| 3.4 顺式作用元件及其反式作用因子的研究 | 第28-30页 |
| 3.4.1 系列缺失分析 | 第28-29页 |
| 3.4.2 凝胶阻滞试验 | 第29页 |
| 3.4.3 定点突变分析 | 第29页 |
| 3.4.4 酵母单杂交技术 | 第29-30页 |
| 4 研究目的及意义 | 第30页 |
| 5 研究内容 | 第30-32页 |
| 第二章 柳枝稷高效再生体系的建立与优化 | 第32-41页 |
| 1 前言 | 第32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-34页 |
| 2.1 试验材料及处理 | 第32页 |
| 2.2 试验方法 | 第32-34页 |
| 2.2.1 种子灭菌 | 第32-33页 |
| 2.2.2 培养基配置 | 第33页 |
| 2.2.3 愈伤组织诱导 | 第33页 |
| 2.2.4 继代培养 | 第33-34页 |
| 2.2.5 分化培养 | 第34页 |
| 2.3 数据分析 | 第34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-38页 |
| 3.1 种子灭菌效果 | 第34-35页 |
| 3.2 愈伤组织诱导 | 第35-36页 |
| 3.3 继代培养 | 第36-37页 |
| 3.4 分化培养 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 4.1 HgCl_2对种子活力的影响 | 第38页 |
| 4.2 激素对愈伤组织诱导的影响 | 第38-39页 |
| 4.3 愈伤组织分化的影响因素 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 第三章 柳枝稷根特异性启动子的分离鉴定 | 第41-74页 |
| 1 前言 | 第41-42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-54页 |
| 2.1 试验材料及生长条件 | 第42页 |
| 2.2 试验方法 | 第42-54页 |
| 2.2.1 候选基因序列分析 | 第42页 |
| 2.2.2 候选基因表达模式的分析及验证 | 第42-45页 |
| 2.2.3 候选基因启动子克隆及染色体步移 | 第45-48页 |
| 2.2.4 表达载体的构建 | 第48-50页 |
| 2.2.5 候选基因启动子序列分析 | 第50页 |
| 2.2.6 启动子系列缺失体系的构建 | 第50页 |
| 2.2.7 转化农杆菌 | 第50-51页 |
| 2.2.8 水稻遗传转化 | 第51-53页 |
| 2.2.9 柳枝稷遗传转化 | 第53页 |
| 2.2.10 组织化学染色 | 第53-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-70页 |
| 3.1 候选基因序列分析 | 第54-57页 |
| 3.2 候选基因EST表达模式 | 第57-58页 |
| 3.3 候选基因表达模式验证 | 第58-62页 |
| 3.4 启动子克隆及载体构建 | 第62-63页 |
| 3.5 启动子序列分析及5'系列缺失载体构建 | 第63-68页 |
| 3.6 PvRCc3.2p及PvRCc3.3p驱动GUS在转基因水稻中的表达 | 第68-69页 |
| 3.7 PvRCc3.3系列缺失启动子驱动GUS在转基因水稻中的表达 | 第69-70页 |
| 3.8 PvRCc3.3p驱动GUS在转基因柳枝稷中的表达 | 第70页 |
| 4 讨论 | 第70-73页 |
| 4.1 根特异性启动子的研究方法 | 第70-71页 |
| 4.2 潮霉素B筛选抗性愈伤的有效性 | 第71-73页 |
| 5 结论 | 第73-74页 |
| 第四章 柳枝稷维管束特异性启动子PvPfn2的分离鉴定 | 第74-93页 |
| 1 前言 | 第74-75页 |
| 2 材料与方法 | 第75页 |
| 3 结果与分析 | 第75-90页 |
| 3.1 候选基因序列分析 | 第75-79页 |
| 3.2 柳枝稷Profilin基因的EST表达模式 | 第79-80页 |
| 3.3 PvPfn2表达模式验证 | 第80-81页 |
| 3.4 PvPfn2启动子克隆及载体构建 | 第81-82页 |
| 3.5 PvPfn2启动子序列分析及5'系列缺失载体构建 | 第82-85页 |
| 3.6 PvPfn2p驱动GUS在转基因水稻中的表达 | 第85-89页 |
| 3.7 PvPfn2系列缺失启动子驱动GUS在转基因水稻中的表达 | 第89-90页 |
| 4 讨论 | 第90-92页 |
| 4.1 维管束特异表达元件 | 第90-91页 |
| 4.2 以维管束为标靶的植物遗传改良 | 第91-92页 |
| 5 结论 | 第92-93页 |
| 第五章 小结与展望 | 第93-96页 |
| 1 主要结论 | 第93-94页 |
| 1.1 柳枝稷高效再生体系 | 第93页 |
| 1.2 柳枝稷根特异性基因家族PvRCc3 | 第93页 |
| 1.3 柳枝稷维管束特异性PvPfn2启动子 | 第93-94页 |
| 2 论文创新点 | 第94页 |
| 3 研究展望 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-110页 |
| 致谢 | 第110-112页 |
| 附录一 | 第112-118页 |
| 1 附表1.PvRCc3.2基因序列 | 第112页 |
| 2 附表2.PvRCc3.3基因序列 | 第112-113页 |
| 3 附表3.PvPfn2基因序列 | 第113-114页 |
| 4 附表4.pMDC162载体图 | 第114-115页 |
| 5 附表5.转基因水稻生根培养 | 第115-116页 |
| 6 附表6.转基因水稻分化成苗一个月 | 第116-117页 |
| 7 附表7.转基因水稻结实期 | 第117-118页 |
| 附录二 作者简介 | 第118-119页 |
