| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-26页 |
| 1.1 背景概况 | 第12-13页 |
| 1.2 青蒿概况 | 第13页 |
| 1.3 青蒿素及其衍生物 | 第13-18页 |
| 1.3.1 青蒿素的结构及性质 | 第13-14页 |
| 1.3.2 青蒿素类药物的药理作用研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3.3 青蒿素的分布与储存部位 | 第15-17页 |
| 1.3.4 影响青蒿中青蒿素含量的因素 | 第17-18页 |
| 1.4 青蒿素的生物合成途径及关键酶 | 第18-23页 |
| 1.4.1 青蒿素生物合成上游途径 | 第18-21页 |
| 1.4.2 青蒿素生物合成下游途径 | 第21-23页 |
| 1.5 应用生物技术生产青蒿素 | 第23-26页 |
| 1.5.1 植物细胞与组织培养生产青蒿素 | 第23页 |
| 1.5.2 微生物生产青蒿素 | 第23-24页 |
| 1.5.3 遗传工程技术提高青蒿中青蒿素的含量 | 第24-26页 |
| 第2章 绪论 | 第26-28页 |
| 2.1 研究目的与意义 | 第26页 |
| 2.2 研究范围和内容 | 第26-27页 |
| 2.3 技术路线 | 第27-28页 |
| 第3章 实验材料与试剂 | 第28-32页 |
| 3.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.2 质粒和菌株 | 第28页 |
| 3.3 仪器和设备 | 第28页 |
| 3.4 试剂盒及试剂 | 第28-29页 |
| 3.5 自配试剂 | 第29-30页 |
| 3.6 本实验室常用抗生素的配置 | 第30-32页 |
| 第4章 方法与步骤 | 第32-40页 |
| 4.1 常规方法介绍 | 第32-35页 |
| 4.1.1 青蒿RNA的提取 | 第32页 |
| 4.1.2 荧光定量cDNA合成 | 第32-33页 |
| 4.1.3 引物设计 | 第33页 |
| 4.1.4 荧光定量引物最适退火温度筛选 | 第33页 |
| 4.1.5 标准曲线的制作及扩增效率的检测 | 第33-34页 |
| 4.1.6 qPCR扩增体系及反应条件 | 第34页 |
| 4.1.7 农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第34-35页 |
| 4.2 SDS法小量抽提青蒿基因组DNA | 第35页 |
| 4.3 青蒿再生体系的建立 | 第35页 |
| 4.4 青蒿的遗传转化 | 第35-36页 |
| 4.4.1 工程菌的活化 | 第35-36页 |
| 4.4.2 工程菌LBA4404-p1304-ADS对青蒿的叶盘法转化 | 第36页 |
| 4.5 抗性植株的检测 | 第36-38页 |
| 4.6 青蒿素提取与HPLC检测 | 第38-40页 |
| 第5章 结果与分析 | 第40-50页 |
| 5.0 各基因的标准曲线 | 第40-41页 |
| 5.1 基因在不同组织中的表达 | 第41-43页 |
| 5.2 青蒿的遗传转化、炼苗及田间实验 | 第43-44页 |
| 5.3 转基因青蒿的检测 | 第44-45页 |
| 5.4 青蒿素含量的测定 | 第45-49页 |
| 5.4.1 青蒿素的HPLC-ELSD标准曲线 | 第45-46页 |
| 5.4.2 青蒿素的标准品和样品的HPLC图谱 | 第46-47页 |
| 5.4.3 青蒿素含量检测 | 第47-49页 |
| 5.5 结论与分析 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-60页 |
| 在校期间发表的文章 | 第60页 |
| 参加项目 | 第60页 |