| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩写符号 | 第8-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-24页 |
| 1.1 微生物油脂 | 第13-14页 |
| 1.1.1 概述 | 第13页 |
| 1.1.2 微生物油脂的应用 | 第13-14页 |
| 1.2 产油微生物 | 第14-16页 |
| 1.2.1 产油酵母 | 第15-16页 |
| 1.2.2 产油霉菌 | 第16页 |
| 1.2.3 产油藻类 | 第16页 |
| 1.2.4 产油细菌 | 第16页 |
| 1.3 产油真菌的脂质积累机制 | 第16-20页 |
| 1.3.1 产油真菌的脂肪酸合成途径 | 第16-17页 |
| 1.3.2 脂肪酸合成底物的供应 | 第17-18页 |
| 1.3.3 脂肪酸合成还原力的来源 | 第18-19页 |
| 1.3.4 甘油三酯的合成途径 | 第19-20页 |
| 1.4 微生物脂质积累差异的分子机制 | 第20页 |
| 1.5 卷枝毛霉简介 | 第20-21页 |
| 1.6 卷枝毛霉脂质积累的研究现状 | 第21-22页 |
| 1.7 论文立题背景及意义 | 第22-23页 |
| 1.8 论文的主要研究内容 | 第23-24页 |
| 第二章 卷枝毛霉的基因组测序及比较基因组分析 | 第24-38页 |
| 2.1 前言 | 第24-25页 |
| 2.2 材料与设备 | 第25-26页 |
| 2.2.1 实验材料与试剂 | 第25页 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-28页 |
| 2.3.1 卷枝毛霉的发酵培养 | 第26页 |
| 2.3.2 生物量的测定 | 第26页 |
| 2.3.3 培养上清液中葡萄糖和NH_4~+的测定 | 第26页 |
| 2.3.4 脂肪酸含量的测定和组分分析 | 第26-27页 |
| 2.3.5 基因组的提取 | 第27页 |
| 2.3.6 基因组测序和拼接 | 第27-28页 |
| 2.3.7 基因预测和注释 | 第28页 |
| 2.3.8 比较基因组分析 | 第28页 |
| 2.3.9 数据分析 | 第28页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第28-37页 |
| 2.4.1 卷枝毛霉WJ11和CBS 277.49的细胞生长和脂质积累分析 | 第28-31页 |
| 2.4.2 卷枝毛霉WJ11基因组的测序结果 | 第31页 |
| 2.4.3 卷枝毛霉WJ11和CBS 277.49基因组的比较 | 第31-32页 |
| 2.4.4 卷枝毛霉中心碳代谢和脂代谢网络的构建 | 第32-35页 |
| 2.4.5 卷枝毛霉WJ11和CBS 277.49中的特异基因分析 | 第35-37页 |
| 2.5 本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 卷枝毛霉的蛋白质组学研究 | 第38-60页 |
| 3.1 前言 | 第38页 |
| 3.2 材料与设备 | 第38-39页 |
| 3.2.1 实验材料与试剂 | 第38页 |
| 3.2.2 实验仪器与设备 | 第38-39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-42页 |
| 3.3.1 卷枝毛霉的发酵培养 | 第39页 |
| 3.3.2 二维电泳蛋白样品的制备 | 第39页 |
| 3.3.3 二维电泳 | 第39-40页 |
| 3.3.4 图像分析 | 第40-41页 |
| 3.3.5 差异蛋白点的鉴定 | 第41页 |
| 3.3.6 数据分析 | 第41-42页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第42-59页 |
| 3.4.1 卷枝毛霉蛋白组二维电泳凝胶图分析 | 第42-43页 |
| 3.4.2 卷枝毛霉WJ11氮缺乏时蛋白表达差异 | 第43-52页 |
| 3.4.3 卷枝毛霉WJ11和CBS 277.49在脂质快速积累期的蛋白表达差异 | 第52-59页 |
| 3.5 本章小结 | 第59-60页 |
| 第四章 卷枝毛霉脂质积累的生化分析及关键基因的转录研究 | 第60-80页 |
| 4.1 前言 | 第60页 |
| 4.2 材料与设备 | 第60-61页 |
| 4.2.1 实验材料与试剂 | 第60-61页 |
| 4.2.2 实验仪器与设备 | 第61页 |
| 4.3 实验方法 | 第61-65页 |
| 4.3.1 卷枝毛霉的发酵培养 | 第61页 |
| 4.3.2 卷枝毛霉发酵过程中蛋白的提取 | 第61页 |
| 4.3.3 脂质积累相关酶的活力测定 | 第61-63页 |
| 4.3.4 培养上清液中有机酸的测定 | 第63页 |
| 4.3.5 培养上清液中乙醇的测定 | 第63页 |
| 4.3.6 卷枝毛霉的转录分析 | 第63-65页 |
| 4.3.7 系统进化树分析 | 第65页 |
| 4.3.8 数据分析 | 第65页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第65-79页 |
| 4.4.1 卷枝毛霉WJ11和CBS 277.49脂质积累相关酶活的分析 | 第65-71页 |
| 4.4.2 卷枝毛霉WJ11和CBS 277.49上清液中有机酸和乙醇的分析 | 第71-72页 |
| 4.4.3 卷枝毛霉WJ11和CBS 277.49脂质积累关键基因的转录分析 | 第72-79页 |
| 4.5 本章小结 | 第79-80页 |
| 第五章 卷枝毛霉中g6pdh和leu B对脂质积累的影响 | 第80-93页 |
| 5.1 前言 | 第80页 |
| 5.2 材料与设备 | 第80-81页 |
| 5.2.1 实验材料与试剂 | 第80-81页 |
| 5.2.2 实验仪器与设备 | 第81页 |
| 5.3 实验方法 | 第81-87页 |
| 5.3.1 卷枝毛霉WJ11中g6pdh1、g6pdh2和leu B表达载体的构建 | 第81-85页 |
| 5.3.2 卷枝毛霉的转化 | 第85-86页 |
| 5.3.3 卷枝毛霉重组菌株的培养 | 第86页 |
| 5.3.4 重组菌株相关基因的转录分析 | 第86页 |
| 5.3.5 重组菌株生物量测定 | 第86页 |
| 5.3.6 重组菌株培养上清液中葡萄糖测定 | 第86-87页 |
| 5.3.7 重组菌株脂肪酸含量的测定和组分分析 | 第87页 |
| 5.3.8 统计分析 | 第87页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第87-92页 |
| 5.4.1 卷枝毛霉WJ11中g6pdh1、g6pdh2和leu B表达载体的构建 | 第87-88页 |
| 5.4.2 卷枝毛霉的转化及重组菌株的验证 | 第88-89页 |
| 5.4.3 重组菌株相关基因的转录分析 | 第89-90页 |
| 5.4.4 重组菌株的生长和脂质积累分析 | 第90-92页 |
| 5.5 本章小结 | 第92-93页 |
| 第六章 氨基酸对卷枝毛霉脂质积累及 γ-亚麻酸产量的影响 | 第93-104页 |
| 6.1 前言 | 第93页 |
| 6.2 材料与设备 | 第93-94页 |
| 6.2.1 实验材料与试剂 | 第93-94页 |
| 6.2.2 实验仪器与设备 | 第94页 |
| 6.3 实验方法 | 第94-95页 |
| 6.3.1 卷枝毛霉的培养 | 第94页 |
| 6.3.2 生物量测定 | 第94页 |
| 6.3.3 培养上清液中葡萄糖测定 | 第94页 |
| 6.3.4 培养上清液中有机酸测定 | 第94页 |
| 6.3.5 培养上清液中乙醇测定 | 第94页 |
| 6.3.6 脂肪酸含量的测定和组分分析 | 第94页 |
| 6.3.7 脂肪酸积累相关酶的活力测定 | 第94-95页 |
| 6.3.8 数据分析 | 第95页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第95-103页 |
| 6.4.1 三株卷枝毛霉脂肪酸含量和GLA产量的比较 | 第95-96页 |
| 6.4.2 二十种氨基酸对卷枝毛霉生长的影响 | 第96-98页 |
| 6.4.3 二十种氨基酸对卷枝毛霉脂质积累的影响 | 第98-102页 |
| 6.4.4 酪氨酸对卷枝毛霉脂质积累相关酶活力的影响 | 第102-103页 |
| 6.5 本章小结 | 第103-104页 |
| 主要结论与展望 | 第104-107页 |
| 论文创新点 | 第107-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-121页 |
| 附录I：卷枝毛霉WJ11的特异基因 | 第121-126页 |
| 附录II：卷枝毛霉CBS 277.49的特异基因 | 第126-132页 |
| 附录III：RT-q PCR引物设计 | 第132-135页 |
| 附录IV：作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第135页 |
