| 摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 引言 | 第16-17页 |
| 第一部分 文献综述 | 第17-63页 |
| 第一章 反刍动物瘤胃亚急性酸中毒和脂多糖 | 第17-33页 |
| 1 SARA的产生机制 | 第17-18页 |
| 2 SARA的发病率、影响和治疗 | 第18-22页 |
| 2.1 干物质采食量下降 | 第18-19页 |
| 2.2 乳成分变化 | 第19-20页 |
| 2.3 系统性疾病 | 第20页 |
| 2.4 瘤胃微生物和细菌免疫原 | 第20-21页 |
| 2.5 SARA的治疗和预防 | 第21-22页 |
| 3 SARA状态下LPS引起的天然免疫反应 | 第22-26页 |
| 3.1 SARA状态下LPS的产生及转移机制 | 第22-24页 |
| 3.2 SARA状态下LPS引起的免疫反应 | 第24页 |
| 3.3 SARA状态下LPS对代谢的影响 | 第24-26页 |
| 参考文献 | 第26-33页 |
| 第二章 LPS对乳腺天然免疫和泌乳功能的影响 | 第33-53页 |
| 1 LPS的结构与理化性质 | 第33-36页 |
| 1.1 LPS的主要结构 | 第34-35页 |
| 1.2 LPS的理化性质 | 第35-36页 |
| 2 LPS相关的天然免疫信号通路 | 第36-40页 |
| 2.1 LPS的识别受体 | 第37-38页 |
| 2.2 TLRs相关的信号通路 | 第38-40页 |
| 3 LPS对乳蛋白合成的影响 | 第40-46页 |
| 3.1 乳蛋白合成的相关信号通路 | 第40-45页 |
| 3.1.1 JAK2-STAT5信号通路 | 第40-42页 |
| 3.1.2 AKT-mTOR信号通路 | 第42-44页 |
| 3.1.3 JAK2-STAT5和AKT-mTOR信号通路的相互作用 | 第44-45页 |
| 3.2 LPS对乳腺泌乳功能的影响 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 第三章 丁酸钠对LPS引起的天然免疫反应的影响 | 第53-63页 |
| 1 丁酸钠的主要作用 | 第53-54页 |
| 1.1 丁酸的理化性质和吸收代谢 | 第53页 |
| 1.1.1 丁酸钠的理化性质 | 第53页 |
| 1.1.2 丁酸钠的吸收与代谢 | 第53页 |
| 1.2 丁酸的生物学效应 | 第53-54页 |
| 1.2.1 丁酸钠对动物胃肠道的作用 | 第53-54页 |
| 1.2.2 丁酸钠对动物生产性能的影响 | 第54页 |
| 1.2.3 丁酸钠对动物免疫功能的影响 | 第54页 |
| 2 丁酸钠与表观遗传学机制 | 第54-59页 |
| 2.1 表观遗传学机制与炎症 | 第54-58页 |
| 2.1.1 组蛋白甲基化 | 第54-55页 |
| 2.1.2 组蛋白乙酰化 | 第55-56页 |
| 2.1.3 DNA甲基化 | 第56页 |
| 2.1.4 Micro RNA | 第56-58页 |
| 2.2 丁酸钠抗炎的表观遗传学机制 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 第二部分 试验研究 | 第63-133页 |
| 第四章 消化道产生的LPS对奶牛乳腺免疫功能和乳蛋白合成功能的影响 | 第63-93页 |
| 1 材料和方法 | 第64-78页 |
| 1.1 主要仪器与试剂 | 第64-65页 |
| 1.1.1 主要仪器 | 第64页 |
| 1.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第64-65页 |
| 1.2 试验动物和试验设计 | 第65-67页 |
| 1.2.1 试验设计 | 第65-66页 |
| 1.2.2 瘤胃瘘管安装 | 第66-67页 |
| 1.3 样品采集 | 第67页 |
| 1.4 样品检测 | 第67-68页 |
| 1.5 RNA提取与定量 | 第68-75页 |
| 1.5.1 RNA提取及质量检测 | 第68-69页 |
| 1.5.2 反转录和RT-PCR | 第69-70页 |
| 1.5.3 质粒克隆及标准曲线的建立 | 第70-75页 |
| 1.6 转录组芯片的信号通路分析 | 第75页 |
| 1.7 蛋白提取与定量 | 第75-78页 |
| 1.8 统计 | 第78页 |
| 2 结果与分析 | 第78-85页 |
| 2.1 瘤胃pH值,瘤胃液和血浆中的LPS,血浆中的细胞因子 | 第78-79页 |
| 2.2 乳蛋白和体细胞数变化规律 | 第79-80页 |
| 2.3 转录组芯片技术及信号通路分析 | 第80-82页 |
| 2.4 免疫相关基因在乳腺中的表达 | 第82-83页 |
| 2.5 酪蛋白及其合成相关基因在乳腺中的表达 | 第83-84页 |
| 2.6 免疫相关基因的蛋白在乳腺中的表达 | 第84页 |
| 2.7 酪蛋白相关基因的蛋白在乳腺中的表达 | 第84-85页 |
| 3 讨论 | 第85-87页 |
| 4 小结 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-93页 |
| 第五章 丁酸钠对高精料日粮模式下奶山羊乳腺免疫功能和酪蛋白合成功能的影响 | 第93-107页 |
| 1 材料和方法 | 第94-97页 |
| 1.1 主要仪器与试剂 | 第94页 |
| 1.1.1 主要仪器 | 第94页 |
| 1.1.2 试剂 | 第94页 |
| 1.2 试验动物和试验设计 | 第94-95页 |
| 1.3 样品采集 | 第95-96页 |
| 1.4 样品检测 | 第96页 |
| 1.5 RNA的提取、反转与定量 | 第96页 |
| 1.6 总蛋白的提取与定量 | 第96-97页 |
| 1.7 数据统计 | 第97页 |
| 2 结果与分析 | 第97-101页 |
| 2.1 丁酸钠对奶山羊瘤胃液pH值的影响 | 第97页 |
| 2.2 丁酸钠对奶山羊奶产量和乳成分的影响 | 第97-98页 |
| 2.3 丁酸钠对奶山羊外周血中LPS含量的影响 | 第98-99页 |
| 2.4 丁酸钠对奶山羊外周血中炎性因子含量的影响 | 第99页 |
| 2.5 丁酸钠对奶山羊乳腺组织中炎性基因的表达 | 第99页 |
| 2.6 丁酸钠对奶山羊乳腺组织中酪蛋白合成相关基因的表达 | 第99-100页 |
| 2.7 丁酸钠对奶山羊乳腺组织中炎性基因蛋白的表达 | 第100-101页 |
| 2.8 丁酸钠对奶山羊乳腺组织中β-casein蛋白的表达 | 第101页 |
| 3 讨论 | 第101-103页 |
| 4 小结 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-107页 |
| 第六章 肠系膜静脉灌注LPS对奶山羊乳腺天然免疫功能和泌乳功能的影响 | 第107-121页 |
| 1 材料和方法 | 第108-114页 |
| 1.1 主要仪器与试剂 | 第108页 |
| 1.1.1 主要仪器 | 第108页 |
| 1.1.2 试剂 | 第108页 |
| 1.2 试验动物和试验设计 | 第108-109页 |
| 1.3 肠系膜静脉插管手术 | 第109-110页 |
| 1.3.1 术前准备 | 第109-110页 |
| 1.3.2 术式 | 第110页 |
| 1.3.3 术后护理 | 第110页 |
| 1.4 样品采集 | 第110-111页 |
| 1.5 样品检测 | 第111页 |
| 1.6 RNA的提取、反转与定量 | 第111页 |
| 1.7 染色质提取和CHART-PCR | 第111-112页 |
| 1.8 基因组DNA的提取以及甲基化状态的检测 | 第112-114页 |
| 1.8.1 基因组DNA的提取 | 第112-113页 |
| 1.8.2 甲基化检测 | 第113-114页 |
| 1.9 数据统计 | 第114页 |
| 2 结果与分析 | 第114-116页 |
| 2.1 肠系膜灌注LPS对奶山羊乳腺动静脉中LPS含量的影响 | 第114-115页 |
| 2.2 肠系膜灌注LPS对奶山羊乳腺炎症基因表达的影响 | 第115页 |
| 2.3 肠系膜灌注LPS对奶山羊乳腺蛋白合成相关基因表达的影响 | 第115-116页 |
| 2.4 肠系膜灌注LPS对乳腺中TLR4启动子区域染色质结构和DNA甲基化的影响 | 第116页 |
| 3 讨论 | 第116-117页 |
| 4 小结 | 第117-118页 |
| 参考文献 | 第118-121页 |
| 第七章 LPS在MAC-T细胞上通过NF-κB信号通路调节炎症基因的表达 | 第121-133页 |
| 1 材料和方法 | 第122-126页 |
| 1.1 主要仪器与试剂 | 第122页 |
| 1.1.1 主要仪器 | 第122页 |
| 1.1.2 试剂 | 第122页 |
| 1.2 试验设计 | 第122页 |
| 1.3 细胞培养 | 第122-124页 |
| 1.3.1 细胞培养液配置 | 第122-123页 |
| 1.3.2 细胞复苏 | 第123页 |
| 1.3.3 细胞传代培养 | 第123-124页 |
| 1.3.4 细胞的冻存 | 第124页 |
| 1.4 RNA的提取、反转与定量 | 第124页 |
| 1.5 总蛋白的提取与定量 | 第124页 |
| 1.6 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第124-125页 |
| 1.6.1 细胞凋亡检测原理 | 第124-125页 |
| 1.6.2 细胞凋亡检测步骤 | 第125页 |
| 1.7 质粒构建和细胞转染 | 第125-126页 |
| 1.7.1 质粒构建 | 第125页 |
| 1.7.2 细胞转染 | 第125-126页 |
| 2 结果与分析 | 第126-128页 |
| 2.1 LPS浓度对TLR4表达的影响 | 第126页 |
| 2.2 LPS浓度对细胞凋亡的影响 | 第126-127页 |
| 2.3 NF-κB过表达和NF-κB抑制剂对MAC-T细胞炎性基因表达的影响 | 第127-128页 |
| 2.4 NF-κB过表达和NF-κB抑制剂对MAC-T细胞NF-κB蛋白表达的影响 | 第128页 |
| 3 讨论 | 第128-129页 |
| 4 小结 | 第129-130页 |
| 参考文献 | 第130-133页 |
| 全文总结 | 第133-135页 |
| 本论文创新点 | 第135-137页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第137-139页 |
| 致谢 | 第139页 |
