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苯基缩水甘油酸甲酯水解菌株的筛选及其酯酶表征

摘要第5-6页
Abstract第6页
目录第7-10页
第1章 绪论第10-15页
    1.1 (2S,3R)-苯基缩水甘油酸甲酯是重要的天然药物合成中间体第10-11页
        1.1.1 高效的抗肿瘤药物紫杉醇的侧链合成中间体第10-11页
        1.1.2 益智药物(-)-黄皮酰胺合成中间体第11页
    1.2 (2S,3R)-MPG的合成第11-13页
    1.3 本课题研究的目的和意义第13-14页
    1.4 本课题的研究内容第14-15页
第2章 苯基缩水甘油酸甲酯对映选择性水解微生物的筛选第15-33页
    2.1 引言第15页
    2.2 材料与方法第15-21页
        2.2.1 主要试剂第15-16页
        2.2.2 使用的仪器设备第16页
        2.2.3 消旋MPG的化学合成第16页
        2.2.4 筛选培养基第16-17页
        2.2.5 产酶微生物菌种筛选第17-18页
        2.2.6 菌种鉴定第18页
        2.2.7 肠杆菌ECU1107酯酶的发酵生产第18-19页
        2.2.8 不同温度下整细胞催化剂的稳定性第19页
        2.2.9 有机.水两相体系中有机溶剂的影响第19-21页
    2.3 结果与讨论第21-32页
        2.3.1 MPG浓度的HPLC检测标准曲线第21页
        2.3.2 MPG水解菌株的筛选、分离第21-23页
        2.3.3 微生物A07的鉴定、表征第23-25页
        2.3.4 肠杆菌ECU1107发酵产酶第25-26页
        2.3.5 肠杆菌ECU1107催化MPG水解拆分反应的条件优化第26-32页
    2.4 本章小结第32-33页
第3章 肠杆菌酯酶的克隆、表征第33-52页
    3.1 前言第33页
    3.2 材料与方法第33-36页
        3.2.1 材料第33页
        3.2.2 基因组DNA提取第33页
        3.2.3 肠杆菌酯酶的基因克隆及酶促转化筛选第33-34页
        3.2.4 重组酯酶EnEst01的诱导表达方式及条件优化第34-35页
        3.2.5 重组酯酶EnEst01的纯化第35页
        3.2.6 酯酶EnEst01的表征第35-36页
    3.3 结果与讨论第36-51页
        3.3.1 肠杆菌ECU1107基因组的提取第36-37页
        3.3.2 肠杆菌酯酶的克隆、表达及筛选第37-40页
        3.3.3 重组酯酶EnEst01的可溶性表达第40-41页
        3.3.4 酯酶纯化第41-42页
        3.3.5 重组酯酶EnEst01的表征第42-46页
        3.3.6 重组酯酶EnEst01整细胞催化高浓度MPG的水解拆分第46-47页
        3.3.7 重组酯酶EnEst01的分子结构模拟和分析第47-51页
    3.4 本章小结第51-52页
结论和展望第52-53页
参考文献第53-56页
攻读硕士期间撰写的论文与专利第56-57页
致谢第57-58页
附录第58-59页

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