摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
目录 | 第7-10页 |
第1章 绪论 | 第10-15页 |
1.1 (2S,3R)-苯基缩水甘油酸甲酯是重要的天然药物合成中间体 | 第10-11页 |
1.1.1 高效的抗肿瘤药物紫杉醇的侧链合成中间体 | 第10-11页 |
1.1.2 益智药物(-)-黄皮酰胺合成中间体 | 第11页 |
1.2 (2S,3R)-MPG的合成 | 第11-13页 |
1.3 本课题研究的目的和意义 | 第13-14页 |
1.4 本课题的研究内容 | 第14-15页 |
第2章 苯基缩水甘油酸甲酯对映选择性水解微生物的筛选 | 第15-33页 |
2.1 引言 | 第15页 |
2.2 材料与方法 | 第15-21页 |
2.2.1 主要试剂 | 第15-16页 |
2.2.2 使用的仪器设备 | 第16页 |
2.2.3 消旋MPG的化学合成 | 第16页 |
2.2.4 筛选培养基 | 第16-17页 |
2.2.5 产酶微生物菌种筛选 | 第17-18页 |
2.2.6 菌种鉴定 | 第18页 |
2.2.7 肠杆菌ECU1107酯酶的发酵生产 | 第18-19页 |
2.2.8 不同温度下整细胞催化剂的稳定性 | 第19页 |
2.2.9 有机.水两相体系中有机溶剂的影响 | 第19-21页 |
2.3 结果与讨论 | 第21-32页 |
2.3.1 MPG浓度的HPLC检测标准曲线 | 第21页 |
2.3.2 MPG水解菌株的筛选、分离 | 第21-23页 |
2.3.3 微生物A07的鉴定、表征 | 第23-25页 |
2.3.4 肠杆菌ECU1107发酵产酶 | 第25-26页 |
2.3.5 肠杆菌ECU1107催化MPG水解拆分反应的条件优化 | 第26-32页 |
2.4 本章小结 | 第32-33页 |
第3章 肠杆菌酯酶的克隆、表征 | 第33-52页 |
3.1 前言 | 第33页 |
3.2 材料与方法 | 第33-36页 |
3.2.1 材料 | 第33页 |
3.2.2 基因组DNA提取 | 第33页 |
3.2.3 肠杆菌酯酶的基因克隆及酶促转化筛选 | 第33-34页 |
3.2.4 重组酯酶EnEst01的诱导表达方式及条件优化 | 第34-35页 |
3.2.5 重组酯酶EnEst01的纯化 | 第35页 |
3.2.6 酯酶EnEst01的表征 | 第35-36页 |
3.3 结果与讨论 | 第36-51页 |
3.3.1 肠杆菌ECU1107基因组的提取 | 第36-37页 |
3.3.2 肠杆菌酯酶的克隆、表达及筛选 | 第37-40页 |
3.3.3 重组酯酶EnEst01的可溶性表达 | 第40-41页 |
3.3.4 酯酶纯化 | 第41-42页 |
3.3.5 重组酯酶EnEst01的表征 | 第42-46页 |
3.3.6 重组酯酶EnEst01整细胞催化高浓度MPG的水解拆分 | 第46-47页 |
3.3.7 重组酯酶EnEst01的分子结构模拟和分析 | 第47-51页 |
3.4 本章小结 | 第51-52页 |
结论和展望 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
攻读硕士期间撰写的论文与专利 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
附录 | 第58-59页 |