十字花科黑腐病菌XC3605基因功能鉴定
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 植物病原细菌 | 第11-12页 |
| 1.1.1 黄单胞菌属 | 第12页 |
| 1.2 十字花科黑腐病菌 | 第12-13页 |
| 1.3 十字花科黑腐病菌致病相关因子 | 第13-18页 |
| 1.3.1 胞外酶 | 第14页 |
| 1.3.2 胞外多糖 | 第14-15页 |
| 1.3.3 脂多糖 | 第15-16页 |
| 1.3.4 Ⅲ型效应物 | 第16-17页 |
| 1.3.5 植物毒素 | 第17页 |
| 1.3.6 病原菌与植物的互作模式 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-42页 |
| 2.1 菌株和质粒 | 第19-21页 |
| 2.2 引物 | 第21-24页 |
| 2.3 培养基及培养条件 | 第24-25页 |
| 2.3.1 大肠杆菌(E.coli) | 第24页 |
| 2.3.2 黄单胞菌(Xcc) | 第24-25页 |
| 2.4 菌种保藏 | 第25页 |
| 2.5 常用抗生素及试剂 | 第25-26页 |
| 2.6 常用溶液和缓冲液 | 第26-27页 |
| 2.7 DNA分子操作 | 第27-34页 |
| 2.7.1 Xcc总DNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.7.2 E.coli质粒的提取 | 第28-29页 |
| 2.7.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
| 2.7.4 PCR扩增 | 第29-30页 |
| 2.7.5 DNA纯化及胶回收 | 第30-31页 |
| 2.7.6 DNA酶切 | 第31页 |
| 2.7.7 DNA连接 | 第31-32页 |
| 2.7.8 转化 | 第32-34页 |
| 2.7.9 转化子的验证 | 第34页 |
| 2.8 LPS | 第34-37页 |
| 2.8.1 LPS的提取 | 第34-35页 |
| 2.8.2 LPS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35-36页 |
| 2.8.3 LPS银染 | 第36-37页 |
| 2.9 三亲本接合及筛选 | 第37-38页 |
| 2.10 表型检测 | 第38-42页 |
| 2.10.1 致病性检测 | 第38页 |
| 2.10.2 过敏反应(HR)检测 | 第38页 |
| 2.10.3 胞外多糖(EPS)检测 | 第38-39页 |
| 2.10.4 胞外酶检测 | 第39-40页 |
| 2.10.5 游动性检测 | 第40页 |
| 2.10.6 生物膜检测 | 第40-41页 |
| 2.10.7 生长曲线的测定 | 第41-42页 |
| 第三章 结果与分析 | 第42-65页 |
| 3.1 缺失突变体构建策略 | 第42-44页 |
| 3.1.1 缺失突变体引物的设计 | 第42-43页 |
| 3.1.2 pK18mobsacB载体信息 | 第43页 |
| 3.1.3 同源双交换 | 第43-44页 |
| 3.2 16个假定蛋白基因缺失突变体的构建 | 第44-58页 |
| 3.2.1 XC3605缺失突变体的构建 | 第44-48页 |
| 3.2.2 其余15个突变体的构建 | 第48-51页 |
| 3.2.3 缺失突变体表型检测 | 第51-54页 |
| 3.2.4 缺失突变体致病性检测 | 第54-55页 |
| 3.2.5 XC3605基因功能分析 | 第55-58页 |
| 3.3 反式功能互补菌株的构建 | 第58-59页 |
| 3.4 突变体及互补菌株的检测 | 第59-64页 |
| 3.4.1 生长曲线的测定 | 第59页 |
| 3.4.2 致病性检测 | 第59-60页 |
| 3.4.3 过敏反应检测 | 第60-61页 |
| 3.4.4 表型检测 | 第61-64页 |
| 3.5 脂多糖(LPS)检测 | 第64-65页 |
| 第四章 讨论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 攻读硕士学位期间完成的研究论文 | 第77页 |
