摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第10-22页 |
1.1 生物胺及其生理功能 | 第10-11页 |
1.2 γ-氨基丁酸及其生理功能 | 第11-12页 |
1.3 GABA的应用 | 第12-13页 |
1.4 GABA的合成 | 第13-15页 |
1.5 氨基酸脱羧酶 | 第15-19页 |
1.6 GABA的检测手段 | 第19-20页 |
1.7 本课题的发展趋势及选题意义 | 第20-21页 |
1.8 实验技术路线 | 第21-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-42页 |
2.1 主要仪器及设备 | 第22页 |
2.2 菌株和质粒 | 第22-23页 |
2.3 常用药品与酶制剂 | 第23-24页 |
2.4 抗生素的配制 | 第24页 |
2.5 培养基及溶液的配制 | 第24-26页 |
2.6 环境样品采集与处理 | 第26页 |
2.7 宏基因组文库及工程菌的构建 | 第26-33页 |
2.8 菌株保存 | 第33页 |
2.9 表达条件的优化 | 第33-34页 |
2.10 目的蛋白的纯化 | 第34-35页 |
2.11 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶的制备及电泳 | 第35-36页 |
2.12 重组谷氨酸脱羧酶的酶学性质检测 | 第36-42页 |
第三章 结果与分析 | 第42-82页 |
3.1 宏基因组DNA的提取 | 第42-44页 |
3.2 宏基因组文库的构建 | 第44-48页 |
3.3 宏基因组文库的质量评估 | 第48-52页 |
3.4 谷氨酸脱羧酶基因的活性筛选 | 第52-55页 |
3.5 gad3基因的异源表达 | 第55-64页 |
3.6 谷氨酸脱羧酶Gad3的生物信息学分析 | 第64-72页 |
3.7 Gad3蛋白的酶学性质测定 | 第72-82页 |
第四章 总结与展望 | 第82-86页 |
4.1 宏基因组文库的构建及筛选 | 第82-83页 |
4.2 gad3基因的生物信息学分析 | 第83页 |
4.3 Gad3蛋白的酶学性质测定 | 第83-85页 |
4.4 展望 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-93页 |
附录 | 第93-94页 |
致谢 | 第94-95页 |
硕士阶段发表论文情况 | 第95页 |