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污染湖泊宏基因组文库中谷氨酸脱羧酶基因的克隆及功能研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 前言第10-22页
    1.1 生物胺及其生理功能第10-11页
    1.2 γ-氨基丁酸及其生理功能第11-12页
    1.3 GABA的应用第12-13页
    1.4 GABA的合成第13-15页
    1.5 氨基酸脱羧酶第15-19页
    1.6 GABA的检测手段第19-20页
    1.7 本课题的发展趋势及选题意义第20-21页
    1.8 实验技术路线第21-22页
第二章 材料与方法第22-42页
    2.1 主要仪器及设备第22页
    2.2 菌株和质粒第22-23页
    2.3 常用药品与酶制剂第23-24页
    2.4 抗生素的配制第24页
    2.5 培养基及溶液的配制第24-26页
    2.6 环境样品采集与处理第26页
    2.7 宏基因组文库及工程菌的构建第26-33页
    2.8 菌株保存第33页
    2.9 表达条件的优化第33-34页
    2.10 目的蛋白的纯化第34-35页
    2.11 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶的制备及电泳第35-36页
    2.12 重组谷氨酸脱羧酶的酶学性质检测第36-42页
第三章 结果与分析第42-82页
    3.1 宏基因组DNA的提取第42-44页
    3.2 宏基因组文库的构建第44-48页
    3.3 宏基因组文库的质量评估第48-52页
    3.4 谷氨酸脱羧酶基因的活性筛选第52-55页
    3.5 gad3基因的异源表达第55-64页
    3.6 谷氨酸脱羧酶Gad3的生物信息学分析第64-72页
    3.7 Gad3蛋白的酶学性质测定第72-82页
第四章 总结与展望第82-86页
    4.1 宏基因组文库的构建及筛选第82-83页
    4.2 gad3基因的生物信息学分析第83页
    4.3 Gad3蛋白的酶学性质测定第83-85页
    4.4 展望第85-86页
参考文献第86-93页
附录第93-94页
致谢第94-95页
硕士阶段发表论文情况第95页

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