| 中文摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第9-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 1 结核病的现状 | 第13页 |
| 2 结核疫苗的研究概况 | 第13-14页 |
| 3 抗原筛选的重要性 | 第14页 |
| 4 治疗性疫苗的研究进展 | 第14-16页 |
| 实验一、结核潜伏抗原的筛选 | 第16-41页 |
| 1.1 主要材料 | 第16页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第16-17页 |
| 1.3 受试人群 | 第17页 |
| 1.4 实验方法 | 第17-28页 |
| 1.4.1 应用生物信息学筛选抗原 | 第17页 |
| 1.4.2 单个蛋白Rv1738和Rv2007c的构建 | 第17-21页 |
| 1.4.3 单个蛋白Rv1738、Rv2007c、Rv2626c、HspX、ESAT6、CFP10和Rv3130c的表达 | 第21-22页 |
| 1.4.4 单个蛋白Rv1738、Rv2007c、Rv2626c、HspX、ESAT6、CFP10和Rv3130c的纯化 | 第22-24页 |
| 1.4.5 SDS-PAGE蛋白电泳相关试剂配制及方法 | 第24-26页 |
| 1.4.6 Bradford法测定蛋白浓度 | 第26页 |
| 1.4.7 ELISPOT技术检测人群细胞因子IFN-γ 的分泌水平 | 第26-27页 |
| 1.4.8 ELISA方法检测人群体液免疫应答 | 第27-28页 |
| 1.5 实验结果 | 第28-40页 |
| 1.5.1 抗原筛选 | 第28-29页 |
| 1.5.2 重组质粒的构建与鉴定 | 第29-33页 |
| 1.5.3 单个蛋白的表达 | 第33-34页 |
| 1.5.4 单个蛋白的纯化 | 第34-35页 |
| 1.5.5 单个蛋白的浓度检测 | 第35-36页 |
| 1.5.6 人外周血单个核细胞分泌IFN-γ 的水平 | 第36-40页 |
| 1.6 实验小结 | 第40-41页 |
| 实验二、融合蛋白疫苗LT28和LT40的构建 | 第41-56页 |
| 2.1 主要材料 | 第41页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第41-42页 |
| 2.3 实验方法 | 第42-47页 |
| 2.3.1 重组质粒pET30a-ESAT6-Rv1738-Rv2626c (+)(LT40)的构建 | 第42-44页 |
| 2.3.2 重组质粒pET30a-CFP10-HspX (+)(LT28)的构建 | 第44-46页 |
| 2.3.3 重组质粒LT40和LT28的蛋白表达及纯化 | 第46-47页 |
| 2.4 实验结果 | 第47-55页 |
| 2.4.1 重组质粒pET30a-ESAT6-Rv1738-Rv2626c (+)(LT40)的构建 | 第47-48页 |
| 2.4.2 重组质粒pET30a-CFP10-HspX (LT28)的构建 | 第48-50页 |
| 2.4.3 重组质粒LT40和LT28的测序验证 | 第50-54页 |
| 2.4.4 重组质粒LT40和LT28的蛋白表达及纯化 | 第54-55页 |
| 2.5 实验小结 | 第55-56页 |
| 实验三、融合蛋白LT40的免疫原性检测 | 第56-65页 |
| 3.1 主要材料 | 第56页 |
| 3.2 主要仪器设备 | 第56页 |
| 3.3 实验动物 | 第56-57页 |
| 3.4 实验方法 | 第57-59页 |
| 3.4.1 疫苗免疫小鼠程序 | 第57页 |
| 3.4.2 ELISPOT方法检测小鼠脾淋巴细胞分泌IFN-γ 的情况 | 第57-58页 |
| 3.4.3 ELISA技术检测小鼠血清抗体滴度 | 第58-59页 |
| 3.5 实验结果 | 第59-64页 |
| 3.5.1 结核亚单位疫苗LT40的细胞免疫原性检测结果 | 第59-60页 |
| 3.5.2 结核亚单位疫苗LT40的体液免疫检测结果 | 第60-64页 |
| 3.6 实验小结 | 第64-65页 |
| 实验四、小鼠肺部BCG潜伏感染模型的建立及蛋白疫苗的治疗作用评价 | 第65-70页 |
| 4.1 主要材料 | 第65页 |
| 4.2 主要仪器设备 | 第65-66页 |
| 4.3 实验方法 | 第66-68页 |
| 4.3.1 小鼠解剖实验流程 | 第66页 |
| 4.3.2 肺部菌落计数 | 第66-67页 |
| 4.3.3 疫苗与佐剂的制备 | 第67页 |
| 4.3.4 实验流程 | 第67-68页 |
| 4.3.5 实验分组 | 第68页 |
| 4.3.6 统计学分析方法 | 第68页 |
| 4.4 实验结果 | 第68-70页 |
| 4.4.1 小鼠肺部BCG潜伏感染模型的建立 | 第68-69页 |
| 4.4.2 用此模型来评价蛋白疫苗的治疗性作用 | 第69-70页 |
| 4.5 实验小结 | 第70页 |
| 讨论 | 第70-74页 |
| 1 抗原筛选 | 第70-71页 |
| 2 融合蛋白的构建 | 第71-72页 |
| 3 疫苗评价的动物模型 | 第72页 |
| 4 治疗性疫苗 | 第72-74页 |
| 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-79页 |
| 在学期间的研究成果与参与课题 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
