摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略语 | 第9-10页 |
第1章 综述 | 第10-22页 |
1.1 致病真菌 | 第10-11页 |
1.2 新生隐球菌概述 | 第11-14页 |
1.2.1 隐球菌病 | 第11-12页 |
1.2.2 隐球菌分类 | 第12-13页 |
1.2.3 隐球菌的致病力 | 第13页 |
1.2.4 隐球菌感染的临床治疗 | 第13-14页 |
1.3 新生隐球菌的有性生殖与形态转换 | 第14-16页 |
1.4 真菌细胞壁组分N-乙酰葡萄糖胺简介 | 第16-21页 |
1.4.1 细胞壁组分N-乙酰葡萄糖胺介导细胞信号传导 | 第16-19页 |
1.4.2 N-乙酰葡萄糖胺代谢研究进展 | 第19-21页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第21-22页 |
第2章 材料与方法 | 第22-40页 |
2.1 实验材料 | 第22-27页 |
2.1.1 菌株、质粒和引物 | 第22页 |
2.1.2 培养基 | 第22-24页 |
2.1.3 缓冲液及试剂 | 第24-25页 |
2.1.4 抗生素 | 第25页 |
2.1.5 实验仪器及常用耗材 | 第25-26页 |
2.1.6 生物分析软件及网站 | 第26-27页 |
2.2 实验方法 | 第27-40页 |
2.2.1 菌株培养与保藏方法 | 第27页 |
2.2.2 大肠杆菌质粒的提取和DNA片段纯化 | 第27页 |
2.2.3 质粒的构建 | 第27-29页 |
2.2.4 新生隐球菌基因组提取 | 第29页 |
2.2.5 新生隐球菌转化 | 第29-31页 |
2.2.6 新生隐球菌目的基因敲除、回补和过表达 | 第31-33页 |
2.2.7 转录水平上基因表达分析 | 第33-35页 |
2.2.8 RNAseq | 第35-38页 |
2.2.9 新生隐球菌同性生殖表型鉴定 | 第38页 |
2.2.10 新生隐球菌异性生殖表型鉴定 | 第38页 |
2.2.11 新生隐球菌细胞融合效率检测 | 第38-40页 |
第3章 实验结果与分析 | 第40-62页 |
3.1 新生隐球菌N-乙酰葡萄糖胺降解代谢通路的鉴定 | 第40-48页 |
3.1.1 新生隐球菌利用细胞壁组分N-乙酰葡萄糖胺进行生长 | 第40-41页 |
3.1.2 参与N-乙酰葡萄糖胺降解代谢关键基因的鉴定 | 第41-43页 |
3.1.3 新生隐球菌中N-乙酰葡萄糖胺激酶的鉴定 | 第43-46页 |
3.1.4 N-乙酰葡萄糖胺代谢过程中关键调控蛋白鉴定 | 第46-48页 |
3.2 细胞壁成分N-乙酰葡萄糖胺对隐球菌有性生殖的影响 | 第48-52页 |
3.2.1 细胞壁组分N-乙酰葡萄糖胺对新生隐球菌同性生殖的影响 | 第48-49页 |
3.2.2 细胞壁组分N-乙酰葡萄糖胺对新生隐球菌异性生殖的影响 | 第49-51页 |
3.2.3 新生隐球菌中N-乙酰葡萄糖胺的代谢与其促进同性生殖间的关系 | 第51-52页 |
3.3 N-乙酰葡萄糖胺促进新生隐球菌同性生殖过程转录组分析 | 第52-54页 |
3.4 产孢特异性基因SPO5的功能研究 | 第54-62页 |
3.4.1 新生隐球菌中产孢特异性蛋白的鉴定 | 第54-55页 |
3.4.2 SPO5是控制新生隐球菌孢子产生的关键蛋白 | 第55-56页 |
3.4.3 SPO5下游调控网络分析 | 第56-62页 |
第4章 讨论 | 第62-66页 |
4.1 新生隐球菌中细胞壁组分GlcNAc代谢基因簇鉴定 | 第62-63页 |
4.2 细胞壁组分N-乙酰葡萄糖胺促进新生隐球菌有性生殖 | 第63页 |
4.3 转录水平分析N-乙酰葡萄糖胺诱导表达的差异基因 | 第63-64页 |
4.4 产孢特异性基因SPO5及其下游调控网络 | 第64-66页 |
第5章 总结与展望 | 第66-68页 |
5.1 总结 | 第66页 |
5.2 展望 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-72页 |
附录 | 第72-78页 |
致谢 | 第78-80页 |
硕士期间发表的论文 | 第80页 |