| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1.1 MIRNAS的生物学特征 | 第13-16页 |
| 1.1.1 MiRNAs的生物合成 | 第13页 |
| 1.1.2 MiRNAs的作用机制 | 第13-16页 |
| 1.2 MIRNAS的检测及鉴定技术 | 第16-20页 |
| 1.2.1 传统的cDNA克隆测序 | 第16-17页 |
| 1.2.2 Northern blot | 第17页 |
| 1.2.3 Real-time PCR | 第17页 |
| 1.2.4 基因芯片技术 | 第17页 |
| 1.2.5 生物信息学预测 | 第17-19页 |
| 1.2.6 高通量测序 | 第19-20页 |
| 1.3 MIRNAS在动物中的功能研究 | 第20-23页 |
| 1.3.1 MiRNAs对乳腺发育及泌乳功能的研究 | 第20-21页 |
| 1.3.2 MiRNAs对脂质代谢的调控作用 | 第21-23页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| 第二章 山羊MIRNA转录组的鉴定与特征分析 | 第24-39页 |
| 2.1 材料与方法 | 第24-28页 |
| 2.1.1 主要试剂和仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.2 试验材料 | 第25页 |
| 2.1.3 主要的数据库及软件 | 第25页 |
| 2.1.4 solexa测序 | 第25-26页 |
| 2.1.5 山羊miRNA转录组的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.1.6 山羊miRNA转录组的特征分析 | 第27-28页 |
| 2.2 结果与分析 | 第28-36页 |
| 2.2.1 solexa测序结果的初步探究 | 第28-29页 |
| 2.2.2 山羊泌乳期miRNA转录组的鉴定和基本分析 | 第29-32页 |
| 2.2.3 山羊miRNA转录组的特征 | 第32-36页 |
| 2.3 讨论 | 第36-38页 |
| 2.3.1 Solexa测序的数据分析 | 第36页 |
| 2.3.2 山羊miRNAs转录组的初步分析 | 第36-37页 |
| 2.3.3 山羊miRNA转录组进阶分析 | 第37-38页 |
| 2.4 小结 | 第38-39页 |
| 第三章 不同泌乳时期差异表达MIRNAS的筛选及功能的初步验证 | 第39-52页 |
| 3.1 材料与方法 | 第39-44页 |
| 3.1.1 主要试剂与仪器 | 第39页 |
| 3.1.2 样品采集与总RNA的提取 | 第39-40页 |
| 3.1.3 不同泌乳时期差异表达miRNAs的筛选 | 第40页 |
| 3.1.4 miRNAs qRT-PCR内参的筛选 | 第40-41页 |
| 3.1.5 miRNAs的反转录与定量 | 第41-43页 |
| 3.1.6 乳腺上皮细胞的培养 | 第43页 |
| 3.1.7 miR-145 Mimics和Mimics control的转染 | 第43-44页 |
| 3.1.8 细胞中总RNA的提取 | 第44页 |
| 3.1.9 脂滴油红Ｏ染色 | 第44页 |
| 3.1.10 甘油三酯的测定 | 第44页 |
| 3.2 结果 | 第44-50页 |
| 3.2.1 乳腺组织内差异表达miRNAs的筛选 | 第44-46页 |
| 3.2.2 miRNAs定量检测内参的筛选 | 第46-47页 |
| 3.2.3 差异表达miRNAs的组织定量结果 | 第47-48页 |
| 3.2.4 超表达miR-145对细胞脂滴含量的影响 | 第48-50页 |
| 3.2.5 细胞中甘油三酯的检测 | 第50页 |
| 3.3 讨论 | 第50-51页 |
| 3.3.1 差异表达miRNAs的鉴定 | 第50-51页 |
| 3.3.2 miR-145对乳脂合成的影响 | 第51页 |
| 3.4 小结 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 附录 | 第61-65页 |
| 缩略词 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
