| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-16页 |
| 1.1 瘤胃上皮细胞 | 第10-12页 |
| 1.1.1 瘤胃上皮细胞培养研究概况 | 第10-11页 |
| 1.1.2 亚临床瘤胃酸中毒对瘤胃上皮的影响 | 第11-12页 |
| 1.2 谷氨酰胺对动物机体胃肠道的影响 | 第12-14页 |
| 1.2.1 谷氨酰胺在动物机体中的代谢 | 第12-13页 |
| 1.2.2 谷氨酰胺对人体的影响 | 第13页 |
| 1.2.3 谷氨酰胺对猪生长的影响 | 第13-14页 |
| 1.2.4 谷氨酰胺对家禽生长的影响 | 第14页 |
| 1.3 本试验目的和意义 | 第14-16页 |
| 第2章 牛瘤胃上皮细胞原代培养 | 第16-26页 |
| 2.1 试验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 试验材料来源 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂与仪器 | 第16-17页 |
| 2.2 试验方法 | 第17-18页 |
| 2.2.1 微生物去除 | 第17页 |
| 2.2.2 瘤胃上皮细胞分离 | 第17-18页 |
| 2.3 试验结果 | 第18-22页 |
| 2.3.1 瘤胃上皮表面微生物去除 | 第18-19页 |
| 2.3.2 瘤胃上皮细胞分离结果 | 第19-22页 |
| 2.4 讨论 | 第22-24页 |
| 2.4.1 现场处理和微生物去除 | 第22-23页 |
| 2.4.2 细胞分离培养 | 第23-24页 |
| 2.5 结论 | 第24-26页 |
| 第3章 牛瘤胃上皮细胞的纯化与鉴定 | 第26-34页 |
| 3.1 试验材料 | 第26页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第26页 |
| 3.2 试验方法 | 第26-27页 |
| 3.2.1 细胞纯化 | 第26-27页 |
| 3.2.2 CCK-8法检测细胞增殖 | 第27页 |
| 3.3 细胞鉴定 | 第27页 |
| 3.3.1 HE染色 | 第27页 |
| 3.3.2 流式细胞鉴定 | 第27页 |
| 3.4 试验结果 | 第27-31页 |
| 3.4.1 瘤胃上皮细胞的纯化 | 第27-29页 |
| 3.4.2 细胞鉴定结果 | 第29-30页 |
| 3.4.3 细胞生长曲线 | 第30-31页 |
| 3.5 讨论 | 第31-32页 |
| 3.6 结论 | 第32-34页 |
| 第4章 瘤胃上皮细胞损伤模型的建立 | 第34-52页 |
| 4.1 试验材料 | 第34页 |
| 4.2 试验方法 | 第34-37页 |
| 4.2.1 细胞培养及处理 | 第34-35页 |
| 4.2.2 上清液中LDH、MDA、SOD、NO的测定 | 第35页 |
| 4.2.3 RNA的提取及反转录 | 第35页 |
| 4.2.4 引物设计与合成 | 第35-36页 |
| 4.2.5 荧光定量PCR | 第36-37页 |
| 4.2.6 数据分析 | 第37页 |
| 4.3 试验结果 | 第37-47页 |
| 4.3.1 酸处理后细胞培养上清液中LDH、MDA、SOD、NO变化 | 第38页 |
| 4.3.2 酸处理对细胞连接蛋白occludin和claudin-1 基因mRNA水平的影响 | 第38-40页 |
| 4.3.3 酸处理对细胞炎症因子mRNA水平的影响 | 第40-45页 |
| 4.3.4 酸处理对细胞表面受体TLR-2和TLR-4基因mRNA水平的影响 | 第45-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-50页 |
| 4.5 结论 | 第50-52页 |
| 第5章 谷氨酰胺对REC损伤模型的修复 | 第52-60页 |
| 5.1 材料与方法 | 第52页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第52页 |
| 5.1.2 试验方法 | 第52页 |
| 5.2 试验结果 | 第52-58页 |
| 5.2.1 不同浓度Gln修复酸损伤的REC后细胞活性 | 第52-53页 |
| 5.2.2 细胞上清液中MDA、SOD、LDH、NO的变化 | 第53-54页 |
| 5.2.3 Gln对REC连接蛋白occludin和claudin-1 基因m RNA水平的影响 | 第54-55页 |
| 5.2.4 Gln对REC炎症因子mRNA水平的变化 | 第55-57页 |
| 5.2.5 Gln对REC相关表面受体TLR-2 和TLR-4 基因mRNA水平的变化 | 第57-58页 |
| 5.3 讨论 | 第58-59页 |
| 5.4 结论 | 第59-60页 |
| 第6章 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 缩略语词汇表 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第75页 |
