| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第13-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-24页 |
| 1.1 炎症的病理生理学 | 第15-19页 |
| 1.1.1 炎症介质与炎症 | 第16-17页 |
| 1.1.2 细胞因子与炎症 | 第17页 |
| 1.1.3 前列腺素通路分子 | 第17-18页 |
| 1.1.4 自由基 | 第18页 |
| 1.1.5 一氧化氮与炎症 | 第18-19页 |
| 1.2 手性药物 | 第19页 |
| 1.3 研究背景、意义与内容 | 第19-24页 |
| 1.3.1 研究背景 | 第19-22页 |
| 1.3.1.1 手性 β_2-受体药物不同光学异构体对气道平滑肌的作用 | 第20-21页 |
| 1.3.1.2 手性 β_2-受体药物不同光学异构体对气道炎症的作用 | 第21-22页 |
| 1.3.2 研究意义 | 第22页 |
| 1.3.3 研究内容 | 第22-24页 |
| 第二章 沙丁胺醇不同光学异构体对RAW264.7小鼠单核巨噬细胞的作用 | 第24-51页 |
| 2.1 引言 | 第24-25页 |
| 2.1.1 巨噬细胞系统 | 第24页 |
| 2.1.2 炎症因子 | 第24-25页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第25-27页 |
| 2.2.1 实验仪器与试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.2 细胞株 | 第26页 |
| 2.2.3 试剂的配制 | 第26-27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-33页 |
| 2.3.1 左旋硫酸沙丁胺醇和右旋硫酸沙丁胺醇的纯度检测 | 第27-28页 |
| 2.3.1.1 光学纯度的检测方法 | 第27-28页 |
| 2.3.1.2 化学纯度—有关物质的检测方法 | 第28页 |
| 2.3.2 细胞培养 | 第28-29页 |
| 2.3.3 细胞毒性实验 | 第29-30页 |
| 2.3.4 细胞内NO释放量检测 | 第30页 |
| 2.3.5 亚硝酸盐分泌量检测 | 第30-31页 |
| 2.3.5.1 沙丁胺醇不同光学异构体对巨噬细胞释放NO的影响 | 第30-31页 |
| 2.3.5.2 标准曲线的绘制 | 第31页 |
| 2.3.6 亚硝酸根清除实验 | 第31页 |
| 2.3.7 活性氧自由基检测 | 第31-32页 |
| 2.3.8 细胞因子检测 | 第32-33页 |
| 2.3.8.1 上清液的获取 | 第32页 |
| 2.3.8.2 酶联免疫吸附试验ELISA | 第32-33页 |
| 2.3.9 统计分析 | 第33页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第33-49页 |
| 2.4.1 硫酸沙丁胺醇左旋体和右旋体原料药的纯度检测 | 第33-36页 |
| 2.4.2 细胞毒性实验 | 第36-38页 |
| 2.4.3 NO分泌量实验 | 第38-41页 |
| 2.4.3.1 R-Sal作用细胞后，胞内NO分泌量 | 第38-39页 |
| 2.4.3.2 S-Sal作用细胞后，胞内NO分泌量 | 第39-41页 |
| 2.4.4 亚硝酸根分泌量实验 | 第41-43页 |
| 2.4.4.1 NO_2~-含量标准曲线的绘制 | 第41-42页 |
| 2.4.4.2 沙丁胺醇不同光学异构体对巨噬细胞释放NO的影响 | 第42-43页 |
| 2.4.5 亚硝酸根清除实验 | 第43-44页 |
| 2.4.6 活性氧自由基检测 | 第44-47页 |
| 2.4.6.1 R-Sal单独孵育细胞后，细胞ROS含量 | 第44-46页 |
| 2.4.6.2 S-Sal单独孵育细胞后，细胞内ROS含量 | 第46-47页 |
| 2.4.7 细胞因子检测 | 第47-49页 |
| 2.4.7.1 TNF-α标准曲线的绘制 | 第47-48页 |
| 2.4.7.2 不同浓度R-Sal对巨噬细胞TNF-α分泌的影响 | 第48-49页 |
| 2.4.7.3 不同浓度S-Sal对巨噬细胞TNF-α分泌的影响 | 第49页 |
| 2.5 本章小结 | 第49-51页 |
| 第三章 R-Sal抗炎作用的体内研究 | 第51-66页 |
| 3.1 引言 | 第51页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第51-54页 |
| 3.2.1 动物来源 | 第51页 |
| 3.2.2 实验仪器与试剂 | 第51-53页 |
| 3.2.3 试剂配制 | 第53-54页 |
| 3.3 实验方法 | 第54-60页 |
| 3.3.1 KM小鼠接触性皮炎模型建立 | 第54页 |
| 3.3.2 分组及给药 | 第54-55页 |
| 3.3.3 形态学观察 | 第55页 |
| 3.3.3.1 耳厚度检测 | 第55页 |
| 3.3.3.2 耳变应反应评分 | 第55页 |
| 3.3.4 病理学观察 | 第55-57页 |
| 3.3.5 组织学观察 | 第57-60页 |
| 3.3.5.1 动物耳片总RNA提取 | 第57-58页 |
| 3.3.5.2 一步法cDNA合成（逆转录） | 第58-59页 |
| 3.3.5.3 荧光定量PCR法测定细胞内mRNA的含量 | 第59-60页 |
| 3.3.6 统计学处理 | 第60页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第60-65页 |
| 3.4.1 小鼠耳厚度变化情况 | 第60-61页 |
| 3.4.2 小鼠耳变应反应评分 | 第61-62页 |
| 3.4.3 组织病理学 | 第62-64页 |
| 3.4.4 mRNA表达水平测量 | 第64-65页 |
| 3.5 本章小结 | 第65-66页 |
| 第四章 R-Sal抗炎作用的体外研究 | 第66-84页 |
| 4.1 引言 | 第66页 |
| 4.2 仪器与试剂 | 第66-69页 |
| 4.2.1 实验仪器与试剂 | 第66-68页 |
| 4.2.2 细胞株 | 第68页 |
| 4.2.3 试剂配制 | 第68-69页 |
| 4.3 实验方法 | 第69-73页 |
| 4.3.1 RAW264.7细胞的培养 | 第69页 |
| 4.3.2 细胞毒性实验 | 第69-70页 |
| 4.3.3 细胞内NO释放量检测 | 第70页 |
| 4.3.4 细胞培养液中亚硝酸盐分泌量检测 | 第70-71页 |
| 4.3.4.1 R-Sal对巨噬细胞上清液中NO分泌的影响 | 第70-71页 |
| 4.3.4.2 标准曲线的绘制 | 第71页 |
| 4.3.5 活性氧自由基检测 | 第71-72页 |
| 4.3.6 TNF-α、IL-1β细胞因子检测 | 第72-73页 |
| 4.3.6.1 细胞上清液获取 | 第72页 |
| 4.3.6.2 酶联免疫吸附试验ELISA | 第72-73页 |
| 4.4 统计分析 | 第73-74页 |
| 4.5 结果与讨论 | 第74-82页 |
| 4.5.1 细胞毒性 | 第74页 |
| 4.5.2 细胞内NO含量的测量 | 第74-76页 |
| 4.5.3 细胞培养液中亚硝酸盐分泌量检测 | 第76-77页 |
| 4.5.3.1 NO_2-含量标准曲线的绘制 | 第76页 |
| 4.5.3.2 不同浓度R-Sal对致炎细胞NO_2~-含量的影响 | 第76-77页 |
| 4.5.4 活性氧自由基检测 | 第77-79页 |
| 4.5.5 IL-1β、TNF-α细胞因子检测 | 第79-82页 |
| 4.5.5.1 IL-1β的标准曲线 | 第79-80页 |
| 4.5.5.2 炎症细胞因子检测 | 第80-81页 |
| 4.5.5.3 TNF-α的标准曲线 | 第81页 |
| 4.5.5.4 炎症细胞因子检测 | 第81-82页 |
| 4.6 本章小结 | 第82-84页 |
| 第五章 R-Sal抗炎机制研究 | 第84-93页 |
| 5.1 引言 | 第84页 |
| 5.2 实验材料 | 第84页 |
| 5.2.1 实验仪器及试剂 | 第84页 |
| 5.2.2 细胞株 | 第84页 |
| 5.2.3 试剂的配制 | 第84页 |
| 5.3 实验方法 | 第84-88页 |
| 5.3.1 RAW264.7细胞的培养 | 第84页 |
| 5.3.2 细胞内NO释放量检测 | 第84-85页 |
| 5.3.3 活性氧自由基检测 | 第85页 |
| 5.3.4 PDE4B mRNA含量测定 | 第85-88页 |
| 5.3.4.1 细胞总RNA提取 | 第85-86页 |
| 5.3.4.2 一步法cDNA合成（逆转录） | 第86-87页 |
| 5.3.4.3 荧光定量PCR法测定细胞内mRNA的含量 | 第87-88页 |
| 5.4 实验结果及分析 | 第88-91页 |
| 5.4.1 细胞内NO释放量检测 | 第88-90页 |
| 5.4.2 细胞内活性氧簇测定 | 第90页 |
| 5.4.3 RT-PCR | 第90-91页 |
| 5.5 本章小结 | 第91-92页 |
| 5.6 R-Sal抗炎作用机制图 | 第92-93页 |
| 结论与展望 | 第93-95页 |
| 结论 | 第93页 |
| 创新之处 | 第93页 |
| 展望 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-105页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 附件 | 第107页 |
