摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
主要英文缩略词 | 第12-13页 |
第1章 绪论 | 第13-19页 |
第2章 耐辐射奇球菌中PprM蛋白的表达与纯化 | 第19-29页 |
2.1 材料及仪器设备 | 第19-22页 |
2.1.1 实验所用菌株、质粒及培养条件 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第20-21页 |
2.1.4 培养基、生化试剂的配制 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-26页 |
2.2.1 GST-PprM融合蛋白诱导表达 | 第22-23页 |
2.2.2 SDS-PAGE电泳检测GST-PprM融合蛋白的表达 | 第23-24页 |
2.2.3 Western blotting检测GST-PprM融合蛋白的表达 | 第24页 |
2.2.4 GST-PprM融合蛋白的纯化 | 第24-26页 |
2.3 结果与分析 | 第26-28页 |
2.3.1 PprM蛋白的诱导表达结果 | 第26-27页 |
2.3.2 PprM蛋白Western blotting检测结果 | 第27页 |
2.3.3 PprM蛋白的纯化结果 | 第27-28页 |
2.4 本章小结 | 第28-29页 |
第3章 EMSA体外验证PprM蛋白与pprI/recA/pprA启动子的相互关系 | 第29-39页 |
3.1 材料和方法 | 第29页 |
3.2 实验方法 | 第29-34页 |
3.2.1 pprI/recA/pprA启动子探针设计 | 第29-31页 |
3.2.2 EMSA胶的准备和配制 | 第31页 |
3.2.3 EMSA反应 | 第31-33页 |
3.2.4 生物素标记探针的检测 | 第33-34页 |
3.3 结果与分析 | 第34-38页 |
3.3.1 PprM蛋白与pprI基因启动子探针相互作用的结果 | 第34-35页 |
3.3.2 PprM蛋白与recA基因启动子探针相互作用的结果 | 第35-36页 |
3.3.3 PprM蛋白与pprA基因启动子探针相互作用的结果 | 第36-37页 |
3.3.4 pprI/recA/pprA启动子结合序列的motif查找与分析 | 第37-38页 |
3.4 本章小结 | 第38-39页 |
第4章 实时荧光定量PCR检测pprM突变株中的pprI/rec A/pprA的转录水平 | 第39-51页 |
4.1 材料和方法 | 第39-40页 |
4.1.1 实验所用菌株、质粒及培养条件 | 第39页 |
4.1.2 主要试剂 | 第39-40页 |
4.1.3 主要仪器设备 | 第40页 |
4.1.4 培养基、生化试剂的配制 | 第40页 |
4.2 实验方法 | 第40-45页 |
4.2.1 RNA的提取 | 第40-41页 |
4.2.2 RNA质量检测 | 第41-42页 |
4.2.3 RT-PCR反应前去除RNA样品中的DNA | 第42页 |
4.2.4 RT-PCR反应 | 第42-43页 |
4.2.5 SYBR Green方法进行RT-qPCR反应 | 第43-45页 |
4.3 结果与分析 | 第45-50页 |
4.3.1 PprM对pprI的m RNA表达水平的影响 | 第45-46页 |
4.3.2 PprM对recA的mRNA表达水平的影响 | 第46-47页 |
4.3.3 PprM对pprA的mRNA表达水平的影响 | 第47-49页 |
4.3.4 PprM对耐辐射奇球菌抗寒能力的影响 | 第49-50页 |
4.4 本章小结 | 第50-51页 |
第5章 讨论 | 第51-55页 |
第6章 结论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
综述 | 第63-73页 |
参考文献 | 第68-73页 |
作者攻读学位期间的科研成果 | 第73-75页 |
致谢 | 第75页 |