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耐辐射奇球菌PprM蛋白与pprI/recA/pprA基因相互作用的研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
主要英文缩略词第12-13页
第1章 绪论第13-19页
第2章 耐辐射奇球菌中PprM蛋白的表达与纯化第19-29页
    2.1 材料及仪器设备第19-22页
        2.1.1 实验所用菌株、质粒及培养条件第19页
        2.1.2 主要试剂第19-20页
        2.1.3 主要仪器设备第20-21页
        2.1.4 培养基、生化试剂的配制第21-22页
    2.2 实验方法第22-26页
        2.2.1 GST-PprM融合蛋白诱导表达第22-23页
        2.2.2 SDS-PAGE电泳检测GST-PprM融合蛋白的表达第23-24页
        2.2.3 Western blotting检测GST-PprM融合蛋白的表达第24页
        2.2.4 GST-PprM融合蛋白的纯化第24-26页
    2.3 结果与分析第26-28页
        2.3.1 PprM蛋白的诱导表达结果第26-27页
        2.3.2 PprM蛋白Western blotting检测结果第27页
        2.3.3 PprM蛋白的纯化结果第27-28页
    2.4 本章小结第28-29页
第3章 EMSA体外验证PprM蛋白与pprI/recA/pprA启动子的相互关系第29-39页
    3.1 材料和方法第29页
    3.2 实验方法第29-34页
        3.2.1 pprI/recA/pprA启动子探针设计第29-31页
        3.2.2 EMSA胶的准备和配制第31页
        3.2.3 EMSA反应第31-33页
        3.2.4 生物素标记探针的检测第33-34页
    3.3 结果与分析第34-38页
        3.3.1 PprM蛋白与pprI基因启动子探针相互作用的结果第34-35页
        3.3.2 PprM蛋白与recA基因启动子探针相互作用的结果第35-36页
        3.3.3 PprM蛋白与pprA基因启动子探针相互作用的结果第36-37页
        3.3.4 pprI/recA/pprA启动子结合序列的motif查找与分析第37-38页
    3.4 本章小结第38-39页
第4章 实时荧光定量PCR检测pprM突变株中的pprI/rec A/pprA的转录水平第39-51页
    4.1 材料和方法第39-40页
        4.1.1 实验所用菌株、质粒及培养条件第39页
        4.1.2 主要试剂第39-40页
        4.1.3 主要仪器设备第40页
        4.1.4 培养基、生化试剂的配制第40页
    4.2 实验方法第40-45页
        4.2.1 RNA的提取第40-41页
        4.2.2 RNA质量检测第41-42页
        4.2.3 RT-PCR反应前去除RNA样品中的DNA第42页
        4.2.4 RT-PCR反应第42-43页
        4.2.5 SYBR Green方法进行RT-qPCR反应第43-45页
    4.3 结果与分析第45-50页
        4.3.1 PprM对pprI的m RNA表达水平的影响第45-46页
        4.3.2 PprM对recA的mRNA表达水平的影响第46-47页
        4.3.3 PprM对pprA的mRNA表达水平的影响第47-49页
        4.3.4 PprM对耐辐射奇球菌抗寒能力的影响第49-50页
    4.4 本章小结第50-51页
第5章 讨论第51-55页
第6章 结论第55-57页
参考文献第57-63页
综述第63-73页
    参考文献第68-73页
作者攻读学位期间的科研成果第73-75页
致谢第75页

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