| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 绪论 | 第8-16页 |
| 1.1 Toll样受体的简介 | 第8-9页 |
| 1.1.1 Toll样受体的发现 | 第8页 |
| 1.1.2 Toll样受体的成员 | 第8页 |
| 1.1.3 Toll样受体的结构特征 | 第8-9页 |
| 1.2 病毒型TLRs的概述 | 第9-11页 |
| 1.2.1 病毒型TLRs的成员 | 第9页 |
| 1.2.2 病毒型TLRs的配体 | 第9-10页 |
| 1.2.3 病毒型TLRs的信号转导通路 | 第10-11页 |
| 1.3 TLRs在对病毒免疫中的作用及病毒型TLRs的研究现状 | 第11-13页 |
| 1.4 哺乳动物的特征、分类以及其在进化研究中的意义 | 第13-14页 |
| 1.4.1 哺乳动物的主要特征 | 第13页 |
| 1.4.2 哺乳动物的起源与分类 | 第13-14页 |
| 1.4.3 哺乳动物的适应性进化研究及其意义 | 第14页 |
| 1.5 研究的目的与意义 | 第14-16页 |
| 第2章 哺乳动物病毒型TLRs基因选择压力分析 | 第16-38页 |
| 2.1 研究材料 | 第16页 |
| 2.2 研究方法 | 第16-18页 |
| 2.2.1 数据整理 | 第16页 |
| 2.2.2 胞膜外域序列的预测 | 第16-17页 |
| 2.2.3 选择压力分析 | 第17-18页 |
| 2.2.4 三维结构预测 | 第18页 |
| 2.3 结果 | 第18-34页 |
| 2.3.1 病毒型TLRs基因序列的获取情况 | 第18-19页 |
| 2.3.2 哺乳动物病毒型TLRs基因选择压力分析结果 | 第19-32页 |
| 2.3.3 鲸类病毒型TLRs基因选择压力分析结果 | 第32-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-38页 |
| 2.4.1 哺乳动物病毒型TLRs受到了普遍的正选择作用 | 第34-35页 |
| 2.4.2 病毒型TLRs的正选择信号集中于其胞外域部分 | 第35-36页 |
| 2.4.3 TLR9发生了最强烈、最广泛的适应性进化 | 第36-38页 |
| 第3章 鲸类TLR8基因功能验证与分析 | 第38-57页 |
| 3.1 实验材料 | 第38-40页 |
| 3.1.1 样品获取 | 第38页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第38-39页 |
| 3.1.3 实验器材 | 第39-40页 |
| 3.2 实验步骤与方法 | 第40-50页 |
| 3.2.1 瓶鼻海豚基因组DNA获取 | 第40页 |
| 3.2.2 家牛cDNA获取 | 第40-41页 |
| 3.2.3 表达载体的构建 | 第41-44页 |
| 3.2.4 细胞培养及转染 | 第44-46页 |
| 3.2.5 双荧光素酶报告系统检测NF-κB表达情况 | 第46-48页 |
| 3.2.6 实时荧光定量PCR检测IL-8表达情况 | 第48-50页 |
| 3.3 实验结果 | 第50-55页 |
| 3.3.1 基因组DNA,RNA质量检测 | 第50-51页 |
| 3.3.2 PCR及载体构建结果 | 第51页 |
| 3.3.3 TLR8的表达情况及转染效率 | 第51-52页 |
| 3.3.4 R848对TLR8下游基因NF-κB表达水平的影响 | 第52-54页 |
| 3.3.5 R848对TLR8下游基因IL-8表达水平的影响 | 第54-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-57页 |
| 3.4.1 瓶鼻海豚TLR8是有免疫识别和应答功能的基因 | 第55页 |
| 3.4.2 瓶鼻海豚与家牛TLR8免疫功能存在显著差异 | 第55-57页 |
| 总结 | 第57-58页 |
| 附录A | 第58-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
