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重组胶原蛋白及其生物材料的制备和性质研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 绪论第11-26页
    1.1 胶原蛋白概述第11-17页
        1.1.1 胶原蛋白定义及分类第11-14页
        1.1.2 胶原蛋白结构第14-17页
        1.1.3 胶原的生物特性第17页
    1.2 胶原蛋白生物材料第17-20页
        1.2.1 生物材料概述第17-19页
        1.2.2 胶原蛋白生物材料的应用第19页
        1.2.3 胶原蛋白生物材料面临的挑战第19-20页
    1.3 重组胶原蛋白概述第20-24页
        1.3.1 细菌中的胶原样蛋白第20-22页
        1.3.2 重组胶原蛋白第22页
        1.3.3 重组胶原蛋白生物材料的应用及优势第22-24页
    1.4 课题提出及研究内容第24-26页
2 重组胶原蛋白的表达纯化及理化性质研究第26-36页
    2.1 引言第26页
    2.2 实验试剂及仪器第26-28页
        2.2.1 实验试剂第26页
        2.2.2 LB培养基第26-27页
        2.2.3 缓冲溶液第27页
        2.2.4 实验主要仪器第27-28页
    2.3 试验方法第28-31页
        2.3.1 SDS-PAGE缓冲溶液制备第28页
        2.3.2 Ni-NTA琼脂糖亲和层析柱的制备第28-29页
        2.3.3 重组胶原蛋白的表达及纯化第29页
        2.3.4 重组胶原蛋白VCL纯度检测第29-30页
        2.3.5 重组胶原蛋白表征第30-31页
    2.4 实验结果与讨论第31-35页
        2.4.1 重组胶原蛋白的表达及纯化第31-32页
        2.4.2 重组胶原蛋白纯度检测第32页
        2.4.3 重组胶原蛋白红外光谱分析第32-34页
        2.4.4 重组胶原蛋白圆二色谱分析第34-35页
    2.5 本章小结第35-36页
3 重组胶原蛋白复合水凝胶的制备及其对骨缺损的修复作用第36-52页
    3.1 引言第36-37页
    3.2 实验材料及仪器第37-38页
        3.2.1 实验动物第37页
        3.2.2 实验材料第37页
        3.2.3 实验仪器第37-38页
    3.3 试验方法第38-41页
        3.3.1 重组胶原蛋白CL的制备第38页
        3.3.2 己二酸二酰肼改性硫酸软骨素(ChS-ADH)的合成第38页
        3.3.3 PEG-ChS及PEG-ChS-CL水凝胶的制备第38页
        3.3.4 PEG-ChS及PEG-ChS-CL水凝胶细胞毒性检测第38页
        3.3.5 5mm大鼠颅骨缺损模型的构建第38-39页
        3.3.6 凝胶材料红外光谱测定第39页
        3.3.7 ~1H NMR测定第39页
        3.3.8 水凝胶形貌表征第39-40页
        3.3.9 骨缺损修复情况CT表征第40页
        3.3.10 骨缺损修复情况MRI表征第40页
        3.3.11 组织切片HE染色第40-41页
    3.4 实验结果与讨论第41-51页
        3.4.1 凝胶材料红外表征结果分析第41-42页
        3.4.2 ChS-ADH取代度的测定第42-44页
        3.4.3 水凝胶的制备第44-45页
        3.4.4 凝胶样品的形貌第45-47页
        3.4.5 凝胶生物相容性评价第47页
        3.4.6 骨缺损修复情况CT及MRI结果分析第47-50页
        3.4.7 组织切片HE染色分析第50-51页
    3.5 本章小结第51-52页
4 不同长度重组胶原蛋白修饰的荧光二氧化硅纳米粒子的研究第52-62页
    4.1 引言第52页
    4.2 实验材料及仪器第52-53页
        4.2.1 实验材料第52-53页
        4.2.2 实验主要仪器及设备第53页
    4.3 实验方法第53-55页
        4.3.1 重组胶原蛋白SDS-PAGE检测第53页
        4.3.2 掺杂FITC的二氧化硅纳米粒子的合成第53-54页
        4.3.3 FNPs的表面修饰第54页
        4.3.4 FNPs表面重组胶原样蛋白的修饰第54页
        4.3.5 重组胶原蛋白修饰性FNPs的表征第54-55页
        4.3.6 重组胶原蛋白修饰性FNPs体外细胞毒性检测第55页
    4.4 结果与讨论第55-61页
        4.4.1 重组胶原蛋白SDS-PAGE分析第55-56页
        4.4.2 掺杂FITC的及胶原修饰的二氧化硅纳米粒子的合成第56-57页
        4.4.3 改性FNPs红外光谱分析第57页
        4.4.4 改性FNPs的形貌及尺寸观察第57-59页
        4.4.5 荧光光谱分析第59-60页
        4.4.6 改性FNPs体外毒性检测第60-61页
    4.5 本章小结第61-62页
结论第62-63页
致谢第63-64页
参考文献第64-70页
攻读学位期间的研究成果第70页

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