| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 符号说明 | 第10-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-38页 |
| 1.1 肝脏的免疫学特性 | 第18页 |
| 1.2 肝再生简介 | 第18-21页 |
| 1.3 巨噬细胞简介 | 第21-26页 |
| 1.3.1 巨噬细胞的发育 | 第21-22页 |
| 1.3.2 巨噬细胞的极化 | 第22-23页 |
| 1.3.3 巨噬细胞与组织稳态维持和组织修复 | 第23-26页 |
| 1.4 自然杀伤细胞(NK细胞)简介 | 第26-32页 |
| 1.4.1 NK细胞与肝脏免疫 | 第27-29页 |
| 1.4.2 NK细胞与不同类型肝脏疾病的关系 | 第29-32页 |
| 1.5 PTEN简介 | 第32-33页 |
| 1.6 免疫系统在肝再生中作用的研究进展 | 第33-38页 |
| 1.6.1 巨噬细胞与肝再生 | 第33-34页 |
| 1.6.2 NK细胞与肝再生 | 第34-35页 |
| 1.6.3 NKT细胞与肝再生 | 第35页 |
| 1.6.4 γδT细胞与肝再生 | 第35-36页 |
| 1.6.5 DC与肝再生 | 第36页 |
| 1.6.6 嗜酸性粒细胞与肝再生 | 第36页 |
| 1.6.7 固有淋巴样细胞与肝再生 | 第36-37页 |
| 1.6.8 适应性免疫系统与肝再生 | 第37-38页 |
| 第二章 材料与方法 | 第38-68页 |
| 2.1 实验材料 | 第38-49页 |
| 2.1.1 实验动物和细胞系 | 第38页 |
| 2.1.2 小鼠2/3肝切除手术所使用的主要材料和试剂 | 第38页 |
| 2.1.3 小鼠组织DNA的提取和基因型鉴定中使用的试剂 | 第38-40页 |
| 2.1.4 小鼠肝脏组织和巨噬细胞总RNA的提取、反转录及荧光定量PCR实验所用的试剂和材料 | 第40-41页 |
| 2.1.5 小鼠细组织总蛋白提取、定量及western blot检测实验所用的试剂和材料 | 第41-43页 |
| 2.1.6 小鼠各个脏器单个核细胞分离实验所用的试剂和材料 | 第43-45页 |
| 2.1.7 小鼠单个核细胞流式检测所使用的试剂 | 第45-47页 |
| 2.1.8 细胞培养实验所用的试剂和材料 | 第47页 |
| 2.1.9 小鼠Kupffer细胞清除所需试剂 | 第47页 |
| 2.1.10 小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)检测所用试剂 | 第47页 |
| 2.1.11 小鼠肝脏HE染色和免疫组化染色所需的试剂和材料 | 第47-49页 |
| 2.2 实验仪器和设备 | 第49-50页 |
| 2.3 实验方法 | 第50-68页 |
| 2.3.1 小鼠2/3肝切除手术操作 | 第50页 |
| 2.3.2 小鼠DNA提取以及基因鉴定 | 第50-52页 |
| 2.3.3 小鼠肝脏组织和巨噬细胞总RNA的提取 | 第52-53页 |
| 2.3.4 反转录和荧光定量PCR反应 | 第53页 |
| 2.3.5 荧光定量PCR反应 | 第53-54页 |
| 2.3.6 小鼠肝脏组织中总蛋白的提取、定量以及western blot检测蛋白水平 | 第54-55页 |
| 2.3.7 小鼠各脏器中单个核细胞的分离 | 第55-57页 |
| 2.3.8 小鼠肝实质细胞系AML-12的培养、传代、冻存与复苏 | 第57-58页 |
| 2.3.9 小鼠肝脏Kupffer细胞与NK细胞共培养实验 | 第58页 |
| 2.3.10 小鼠肝脏Kupffer细胞对AML-12细胞系的体外促生长作用检测 | 第58页 |
| 2.3.11 小鼠肝脏中Kupffer细胞的清除 | 第58页 |
| 2.3.12 细胞计数 | 第58-59页 |
| 2.3.13 流式细胞分析 | 第59-62页 |
| 2.3.14 流式细胞分选 | 第62页 |
| 2.3.15 小鼠血清ALT检测步骤 | 第62-63页 |
| 2.3.16 病理HE染色样品制作 | 第63-66页 |
| 2.3.17 统计学分析方法 | 第66-68页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第68-92页 |
| 3.1 引言 | 第68-70页 |
| 3.2 小鼠2/3 PHx手术后肝脏中Kupffer细胞的特征 | 第70-73页 |
| 3.2.1 正常小鼠Kupffer细胞清除抑制其肝再生的进程 | 第70-71页 |
| 3.2.2 WT鼠2/3 PHx后Kupffer细胞上调PTEN的表达水平并伴随着M1型极化特征 | 第71-73页 |
| 3.3 髓系细胞PTEN特异缺失小鼠(PTEN~(mKO)鼠)的肝再生速度加快 | 第73-75页 |
| 3.3.1 PTEN~(mKO)鼠与对照鼠在2/3 PHx后的肝脏损伤程度无明显差异 | 第73页 |
| 3.3.2 PTEN~(mKO)鼠在2/3 PHx后具有更强的肝再生能力 | 第73-75页 |
| 3.4 PTEN缺失的Kupffer细胞具有更明显的M2型极化特征 | 第75-78页 |
| 3.4.1 PTEN缺失不影响肝脏中MoDM的极化 | 第75页 |
| 3.4.2 PTEN~(mKO)鼠的Kupffer细胞在静息状态倾向于M2型极化 | 第75-76页 |
| 3.4.3 PTEN~(mKO)鼠的Kupffer细胞在2/3 PHx后倾向于M2型极化 | 第76-77页 |
| 3.4.4 PTEN通过调节Akt和FoxO1的活化而影响Kupffer细胞的极化 | 第77-78页 |
| 3.5 PTEN~(mKO)鼠的肝脏NK细胞在2/3 PHx后活化程度降低 | 第78-85页 |
| 3.5.1 Sham处理的PTEN~(mKO)鼠和PTEN~(f/f)鼠肝脏NK细胞的活化程度无显著差异 | 第78-80页 |
| 3.5.2 2/3 PHx处理后PTEN~(mKO)鼠的肝脏NK细胞活化程度降低 | 第80页 |
| 3.5.3 PTEN~(mKO)鼠和PTEN~(f/f)鼠肝脏NK细胞的增殖和凋亡水平无明显差异 | 第80-81页 |
| 3.5.4 PTEN~(mKO)鼠来源的Kupffer细胞对NK细胞的活化能力降低 | 第81-82页 |
| 3.5.5 PTEN~(mKO)鼠来源的Kupffer细胞表达更低水平的NK细胞活化相关的分子 | 第82-83页 |
| 3.5.6 Kupffer细胞通过直接的细胞间相互作用和间接的细胞因子分泌影响NK细胞的活化 | 第83-85页 |
| 3.6 PTEN缺陷的Kupffer细胞具有更强的促进肝细胞增殖的能力 | 第85-87页 |
| 3.7 结论 | 第87-89页 |
| 3.8 讨论 | 第89-92页 |
| 参考文献 | 第92-116页 |
| 致谢 | 第116-118页 |
| 第四章 在读期间发表的学术论文与取得的其它研究成果 | 第118-119页 |
| 4.1 已发表论文 | 第118页 |
| 4.2 参加的学术会议 | 第118-119页 |
